荧光标记法在生物中有哪些实验
当选择荧光基团时,每个实验都应考虑每个荧光基团的激发和发射光谱。如果需要共同定位两种不同的蛋白质,应避免发射光谱重叠。
建议选择消光系数高,量子产率高的荧光基团。荧光基团亮度的一个决定因素是其消光系数; 消光系数越高,荧光团越亮,量子产率是荧光过程效率的读数
光漂白是降低荧光信号强度的光化学过程,例如已知FITC和R-藻红蛋白具有相对较高的光漂白率。
我们建议避免对光漂白高度敏感的荧光团,一些光稳定荧光团包括DyLightTM、AlexaFluorTM、ATTO染料。或者可以使用抑制光漂白的抗淬灭剂来保存荧光标记的靶分子的信号。
荧光物标记法介绍:
荧光物标记法,神经纤维的末梢可以吸收很多荧光化合物或荧光染料,经轴突逆向运输到细胞体内,从而建立逆行荧光标记法。例如:Kuypers等(1977)用这种方法在荧光显微镜下根据所用荧光物标记物特有的波长显示吸收荧光物的神经细胞。
用于神经元标定的荧光物质有十多种。可以根据实验的要求进行单荧光物、双标定和三标定。后者可以用来做神经元轴突侧枝投射的追踪。
上海金畔生物提供酶HRP,荧光FITC,Biotin、Cy3、Cy5、Cy7、罗丹明等荧光物质标记蛋白,标记位置是氨基,标记的蛋白有:牛血红蛋白、胶原蛋白、链霉亲和素、大鼠免疫球蛋白、牛胎球蛋白、人转铁蛋白、胰岛素、重组蛋白G等几十种蛋白,提供检测图谱。
金畔生物提供荧光标记蛋白产品列表:
Biotin -羊IgG干粉,羊免疫球蛋白;Biotin -IgG from sheep serum
Biotin -氧化低密度脂蛋白(人); Biotin -Oxidized Humhai LDL; OxLDL
Biotin-胰岛素(牛);牛胰岛素;Biotin -INSULIN
Cy5.5-胰岛素(人);重组人胰岛素;Cy5.5-Humhai recombinhait Insulin
Biotin -胰岛素(猪);猪胰岛素;Biotin -INSULIN
HRP -乙酰化低密度脂蛋白(人) ;HRP – Humhai Ac-LDL, AcLDL
Biotin -鱼精蛋白硫酸盐来源于鲑鱼;Biotin -Protamine sulfate from Salmom
HRP标记粘蛋白;HRP -Mucin from bovine submaxillary glhaids
Biotin-重组蛋白G琼脂糖凝胶;Biotin -FF rProtein G Sepharose
HRP -猪IgG干粉,猪免疫球蛋白;HRP -IgG from pig serum
Cy5-组蛋白,from Calf Thymus(冻干); Cy5- Histone from Calf Thymus(Lyophilized)