UDP糖|有利于青钱柳类黄酮苷底物和区域特异性生物合成的udp -葡萄糖基转移酶的鉴定

青花C. paliurus GT1在嫩叶、愈伤组织和枝条中表达量较高,在老叶和树皮中表达量较低,在根中无表达。


重组C. paliurus GT1蛋白在大肠杆菌中异型表达,并表现出对多种黄酮类化合物的催化活性,有利于底物和区域特异性生物合成。进一步的酶分析表明,C. paliurus GT1偏爱某些羟基糖基化。


C. paliurus GT1对黄酮类化合物和黄酮醇的糖基化反应具有较强的催化活性,但对异黄酮类化合物、黄酮类化合物和三萜类化合物的糖基化反应较弱。


C. paliurus GT1也能够催化糖与芳香化合物上的硫醇(S-)或胺(N-)位点的结合,但不能催化脂肪族化合物上的结合。


分子对接和定点诱变分析表明,A43F、V84P和M201Y显著改变了该区域的选择性和活性,而W283M的V309-D320区域的突变和缺失增强了该区域的活性和二糖的形成。


在此,我们对青花菜中首个多功能糖基转移酶进行了鉴定和鉴定,为进一步了解黄酮类苷类化合物的生物合成提供了基础。C. paliurus GT1可作为合成生物学工具用于O-、N-或s -糖基化天然/非天然产物的合成。

UDP糖|有利于青钱柳类黄酮苷底物和区域特异性生物合成的udp -葡萄糖基转移酶的鉴定

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