分析13C或15N标记的中心碳代谢及相关途径的极性代谢物

分析13C或15N标记的中心碳代谢及相关途径的极性代谢物

    提出了一种基于靶向串联质谱分析(LC-MS / MS)的方法,用于分析极性代谢物的13C或15N标记情况。该平台利用三重四极杆(QQQ)质谱仪,极性切换的选择性反应监测模式(SRM)和酰胺亲水作用液相色谱(HILIC),捕获碳和氮在选定代谢物中的离子对。本方案是对先前发表的非标记靶向代谢组学方案的扩展,并已广泛用于追踪各种生物样本(例如,体外细胞培养实验和经静脉注射小鼠体内标记)中营养物质的代谢,如13C标记的葡萄糖,13C-谷氨酰胺和15N-谷氨酰胺等。

     对SRM信号进行积分,生成每种标记形式的峰面积阵列。将处理后的数据用于获得目标分子标记的程度和分布(称为代谢流量组学)。每种方法都可以基于已知的未标记Q1 / Q3 SRM离子对而定制,并根据相应的13C或15N标记情况进行调整。从标记实验、代谢物提取到峰积分,单个样品的整个过程大约需要6-7小时。

实验步骤

1 提取代谢物并添加同位素标记。代谢物可以从多种不同的生物来源样本中提取,根据样本类型和实验目的选择相应的提取方法,然后考察确定标记时间。

2 设置MS方法。根据正负离子检测模式调整Q1 / Q3 SRM离子对列表,匹配每种代谢物的13C或15N标记类型。

3 将样品重悬于约20-25 µL LC-MS级水中,然后通过自动进样器进样5 µL,使用步骤2中Analyst软件中定义的靶向采集方法。

4 使用分析和峰积分软件(例如SCIEX的MultiQuhait),在质谱图中查找13C/15N标记峰以及未标记的12C峰。

5 作为SRM的替代方法:可以进行高分辨率LC-MS / MS分析,高分辨质谱仪应在MS和MS / MS模式下均具有高质量精度且有极性切换功能,例如QExactive Orbitrap的数据相关采集(DDA)模式。

结果

此平台可用于分析未标记(12C或14N)和标记(13C或15N)的代谢物。应根据生物学问题选择靶向SRM LC-MS/MS方法,提供了超过140个全标记代谢物的分析方法和多达40-50个独特代谢物的同位素分析。图1 是靶向13C代谢组学工作流程,展示了从代谢物提取、LC-MS / MS采集到数据统计分析的整套流程。

分析13C或15N标记的中心碳代谢及相关途径的极性代谢物

产品供应:

3C同位素标记的松柏醇葡萄糖甙 碳-13同位素标记的溴化膦化合物
(11C、13C、14C、D、3H、18O)同位素标记葡萄糖 碳同位素标记双酚S和双酚AF
13C同位素标记木素木素-木聚糖复合体13C-NMRHSQC 同位素标记磷酸三苯酯化合物
14C标记葡萄六糖 同位素标记链状化合物
(13)C标记尿苷二磷酸葡萄糖 同位素标记环状化合物
同位素标记寡糖和多糖 同位素标记碳氢化合物
13C稳定性同位素标记1,6缩水β-D-吡喃葡萄糖 同位素标记烃的衍生物
同位素标记仿生糖/糖组 L-亮氨酸-U-13C6
N-糖链双同位素标记 13C标记L-亮氨酸示踪剂
同位素标记1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸 稳定同位素标记多肽氨基酸
同位素标记2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸 稳定同位素马来酸酐标记
葡萄糖-D-13C6 稳定同位素13C标记的sp2碳纳米材料
稳定同位素标记吉西他滨-13C/15n2 稳定性同位素13C标记富勒烯C60
双标记尿嘧啶核苷-(13C,15N2) 同位素13C标记的4-羟基脯氨酸
13)C-海藻糖 同位素13C标记二氯乙酸
13C稳定性同位素标记纤维素 稳定同位素(13)C标记乙醇
15N稳定性同位素标记L-谷氨酸 同位素标记莨菪亭-2-13C
(125)I标记胰高糖素 同位素13C,15N双标记-氨基脲盐酸盐
稳定同位素巯基化合物标记 C-13同位素标记17β-雌二醇([3,4-13C]-17β-E2)
(13)C标记氨基酸化合物 13C-全标记乙酸钠
同位素标记哌虫啶 13C-标记17芳香雌二醇([3,4-13C]-17β-E2)
同位素标记环氧虫啶 同位素13C标记水杨酸
同位素标记顺硝烯新烟碱类化合物 同位素^13C标记小麦植株
吖啶酮类稳定同位素巯基化合物标记 同位素13C/D标记对甲氧基苯甲酸
稳定同位素标记N‑(4‑(吖啶酮‑10‑基)‑苯基)‑N D-13C6-甘露糖
同位素标记马来酰亚胺基团 13C同位素标记硫酸盐木素
稳定同位素标记莨菪亭213C 13C同位素标记果胶-木素复合物
稳定同位素13C标记C60 13C同位素标记木质素与木聚糖复合物
稳定同位素标记脱氧核苷代码 (13)C标记甘氨胆酸
稳定同位素标记脱DNA N6-甲基腺嘌呤 同位素(13)C标记富勒醇纳米颗粒
稳定同位素15N标记化合物 13C和15N稳定同位素双标记
同位素标记有机金属钌化合物 同位素标记合成吉西他滨-13C
同位素标记蛋白酪氨酸磷酸酶1B 苯甲酸-13C同位素标记
丙酯草醚和苦皮藤素同位素标记物 双标记13C,15N3-呋喃妥因
稳定同位素标记碱性橙Ⅱ N,N-二异丙基-[(1-13C)乙基]胺化合物
稳定同位素标记苯 α-13C标记β-O-4型木素模型化合物
稳定同位素标记硝基苯 愈创木基丙三醇-β-愈创木基醚-[α-13C]
氘代有机化合物 13C,14C同位素标记17-E2,17-E2,E1
氘标记化合物 13C,14C同位素标记雌酮(E1)
同位素标记氨基甲酸酯(3a-3c) 13C,14C同位素标记17β-雌二醇(17-E2)
蓝藻碳稳定同位素标记 13C,14C同位素标记17-雌二醇(17β-E2)
稳定同位素标记氮素 13C,14C同位素标记天然固醇类雌激素
稳定同位素MALDI-TOF-MS 稳定性同位素碳13全标记L型亮氨酸
植物碳同位素标记 同位素标记原儿茶酸-(13COOH)
稳定同位素标记卤代苯-Dsub5/sub 13C标记脂肪酸的同位素
稳定同位素标记13C6结晶紫 3C稳定性同位素标记1,6-缩水-β-D-吡喃葡萄糖
稳定同位素标记13C6隐色结晶紫 13C内醚糖/13C葡萄糖
稳定同位素标记15N-N,N-二甲基苯胺 13C标记磷脂脂肪酸
稳定同位素氘标记D6-结晶紫 DNA-稳定同位素探针标记
稳定同位素标记溴布特罗-D9 同位素标记物D3-左氧氟沙星
稳定同位素标记卤代苯-D5 稳定同位素标记双酚F-D8
稳定同位素标记D4-罗丹明B 氘代沃拉帕沙
稳定同位素标记氨基甲酸乙酯-D5 稳定同位素标记磷脂
稳定同位素标记碱性嫩黄O-D12 稳定同位素标记氯丙那林-D6
同位素标记氨基甲酸乙酯-D5 同位素标记常咯啉
稳定同位素标记敌百虫 稳定同位素标记D5-氯氰菊酯
稳定同位素标记甲氧基一D/甲氧基姻6 稳定同位素D标记甜蜜素
稳定同位素标记卤代苯 同位素氘标记2-甲基-4-异噻唑-3-酮
同位素标记D6-苯 同位素标记邻苯二甲酸
稳定同位素标记碱性嫩黄O-D(12) 氘标记苯乙醇胺类β受体激动剂
稳定同位素标记硼氘化钠 氘代乙琥胺d5
稳定同位素标记妥布特罗-D9 氘标记川芎嗪
稳定同位素标记D6-二甲基黄 氘代维生素D类似物
稳定同位素标记孔雀石绿-D12 同位素氘代标记吡罗昔康-d3
稳定同位素标记2-异丙基硫杂蒽酮-D3 苯基羟乙酸酯氘标记化合物
稳定同位素标记双氰胺 同位素标记的西布特罗-D9/马布特罗-D9
同位素标记2异丙基硫杂蒽酮 氘标记夫沙那韦钙盐
稳定同位素氘标记亚磷酸二甲酯或亚磷酸三甲酯 同位素标记全氘代邻二甲苯
稳定同位素氘标记有机磷杀虫剂 同位素标记15N-N,N-二甲基苯胺
稳定同位素标记三苯甲烷类化合物 同位素标记3,5-二硝基水杨酸肼-15N2
稳定同位素标记克伦普罗化合物 15N同位素标记尿素
同位素标记2,6二氯苯胺 15N同位素标记L-精氨酸
同位素标记3,5二氯4氨基苯乙酮; 同位素标记灭蝇胺-氨基-15N2
同位素标记3,5二氯4氨基苯乙酮 15N稳定同位素标记集胞藻
稳定同位素标记3,5二氯4氨基α溴代苯乙酮 蛋白质酰胺侧链15N同位素标记
稳定同位素标记1(4氨基3,5二氯)2异丙基氨基乙酮 同位素标记15N-L-谷氨酰胺
同位素标记1(4氨基3,5二氯)2异丙基氨基乙酮 15N标记-L-赖氨酸盐酸盐
稳定同位素氘标记DDT 同位素标记15N-L-天冬氨酸
同位素标记双酚A或双酚F衍生物 同位素标记15N-L-蛋氨酸
13C3-三聚氰酸 同位素15N标记水合肼
15N3-三聚氰胺 同位素15N标记2-甲基-5-硝基咪唑
稳定同位素标记脂肪酸 同位素15N标记L-天冬酰胺
同位素标记蛋白质 同位素15N标记L-半胱氨酸
同位素标记血红素/叶绿素 同位素标记(15)N-N,N-二甲基苯胺
同位素标记酶/激素 同位素15N标记螺旋藻
同位素标记木醇/甲醇 同位素15N标记八肽拟生长因子
同位素标记酒精(乙醇) 同位素15NN标记L-缬氨酸
同位素标记甘醇(乙二醇) 1-18O稳定性同位素标记葡萄糖
同位素标记甘油(丙三醇) 18O稳定同位素标记磷酸化蛋白质
同位素标记石炭酸(苯酚) 15N标记邻位芳香羟肟配位体
同位素标记蚁酸(甲酸) 同位素15N标记三肽
同位素标记水杨醛(邻羟基苯甲醛) 15N稳定同位素标记副溶血弧菌
同位素标记肉桂醛(β苯基丙烯醛) 同位素15N标记氧化亚氮
同位素标记巴豆醛(2-丁烯醛) 16O/18O标记糖肽
同位素标记氯仿(三氯甲烷) 糖苷内切酶催化同位素标记n-糖链

上述产品仅用于科研,不可用于人体实验!

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