NEBNext 多样本接头引物试剂盒 1（96 种 Unique 双端）

NEBNext 多样本接头引物试剂盒 2（96 种 Unique 双端）

NEBNext 多样本接头引物试剂盒 3 （96 种 Unique 双端）

-20°C

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每个试剂盒都通过对基因组 DNA、ChIP DNA 和 mRNA 进行文库构建，并在 Illumina 平台测序进行验证。 

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NEBNext 接头是为 DNA、ChIP DNA 和 RNA（不包括 Small RNA）文库构建而设计的，能够确保接头的高效连接及文库的高产量，并且最大限度的减少接头二聚体的形成。NEBNext 接头包含一个特殊的发卡环状结构，能够更高效的和经末端修复的带 dA 尾的 DNA 结合。环状结构包含一个 U，当 U 被 USER 酶（由 UDG 和内切酶 VIII 组合而成）切掉后，环状结构打开，使它可以成为 PCR 的反应底物。检索序列通过 PCR 引入文库，从而实现了多样本的制备。NEBNext 接头引物不仅能够用于 NEBNext 产品，也可以用于其它的兼容 Illumina 标准平台的文库制备方法。

 每个试剂盒都通过对基因组 DNA、ChIP DNA 和 mRNA 进行文库构建，并在 Illumina 平台测序进行验证。

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NEBNext 文库稀释缓冲液

二代测序文库的精确定量对于每次测序得 到 的 数 据 量 及 数 据 的 质 量 至 关 重 要 。 特 别是  Illumina 平台，精确的文库定量对于优化簇密度，从而得到最好的测序结果非常重要。实时定量  PCR（qPCR） 是最精确及有效的文库定量方法，与测量总核苷酸浓度的电泳法和分光光度计法相比，qPCR 有更高的一致性和重复性。基于扩增的定量方法只测量包含两个接头序列的分子，从而提供更为精准的可测序文库分子的浓度。

NEBNext  文库定量试剂盒对二代测序中基于 qPCR 的文库定量提供了显着的提升。NEBNext  文库定量试剂盒优化了针对 Illumina 平台基于 qPCR 定量组分。NEBNext  文库定量试剂盒包含 P5 和 P7 Illumina 接头序列的引物，以及一组高质量预稀释的 DNA 标准品，对 150-1000 bp 之间稀释的 DNA 文库进行可靠的定量。

 

图 1. 使用 NEBNext 文库定量试剂盒定量文库大小浓度，实现最佳簇密度。

使用 NEBNext，可以从具有广泛的文库大小 和 GC 含量的量化文库获得最佳簇密度。 使用 NEBNext 文库定量试剂盒定量来自指定来源的 310-963bp 的文库，然后稀释至8pM 并加载到 MiSeq（v2 化学; MCS v2.4.1.3） 上。文库浓度范围为 7-120 nM，文库的原始簇密度为 965-1300 k / mm 2（ave。= 1199）。 

 

图 2.  使用 NEBNext 文库定量试剂盒，文库定量结果一致性更好。

 文库定量试剂盒（通用），对 3 个 340-400 bp 的文库进行定量重复 2 – 4 次。 如图所示NEBNext 试剂盒（橙色）比 Kapa 试剂盒 （灰色）对文库浓度定量的一致性有显著改善。

 

 –  NEBNext 文库定量预混液 

NEBNext^® 文库定量试剂盒

• 与 NEBNext® 文库定量试剂盒（Illumina®）中的标准样品相同，为补充试剂

 NEBNext^® 文库定量 DNA 标准品包含六个标准样品，与 NEBNext^® 文库定量试剂盒（Illumina^®）一起使用，可建立从 100 pM 到 0.001 pM 的标准曲线。该标准品可作为 NEB #E7630L 中所含标准曲线试剂的补充装。NEB #E7630 产品说明书中包含了使用四个或六个标准样品设置标准曲线的详细步骤说明，从而为实验流程增添了灵活性。相较于同类型文库定量试剂盒，NEBNext^® 文库定量试剂盒（Illumina^®）提供了更简化的操作流程，并减少了批间差。

 

NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒 – 含纯化磁珠

NEBNext Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒 – 含片段化酶

NEBNext Ultra II FS DNA 文库制备试剂盒 – 含片段化酶/含纯化磁珠

The NEBNext Ultra II FS DNA Module has been optimized to convert 100 pg – 0.5 μg of intact DNA to fragmented, end-repaired DNA having 5´ phosphorylated, 3´ dA-tailed ends. The module is optimized for use

with the NEBNext Ultra II Ligation Module (NEB #E7595), and is part of the Ultra II FS DNA workflow.

For Illumina library construction, the NEBNext Ultra II FS DNA Module is designed for use with the 

following:

• NEBNext Ultra II Ligation Module (NEB #E7595) 
• NEBNext Ultra II Q5® Master Mix (NEB #M0544) 
• NEBNext Oligos for Illumina (NEB #E7335, #E7500, #E7710, #E7730, #E6609, #E7600 #E7535, 
• #E7350) 

TE Buffer

NEBNext® Ultra™ II FS Enzyme Mix

NEBNext® Ultra™ II FS Reaction Buffer

-20°C

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The NEBNext RNA First Strand Synthesis Module is designed for synthesis of cDNA from RNA fragments using ProtoScript® II Reverse Transcriptase and random priming. Single strand cDNA can be used directly for second strand cDNA synthesis. For use in directional (strand-specific) protocols, Actinomycin D is

required and must be purchased separately.

 –  NEBNext First Strand Synthesis Reaction Buffer

 –  Random Primers

 –  ProtoScript® II Reverse Transcriptase

 –  Murine RNase Inhibitor

Materials Required but not Supplied

If you are using the module for Directional RNA Seq, Actinomycin D (Sigma #A1410 dissolved in

dimethylsulfoxide [DMSO] to 5μg/μl) is required. See protocol for details.

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 –  Low input amounts (as low as 10ng total RNA, purified mRNA or ribosomal-depleted RNA)

 –  Fast workflow (5 – 5.5 hours), with minimal hands-on time

 –  Robust, reliable performance

 –  Ultra high fidelity amplification with minimized GC bias

The NEBNext® Ultra™ RNA Library Prep Kit for Illumina® contains reagents for preparation of non-directional RNA libraries for Illumina sequencing. Please note that adaptors, primers, rRNA depletion reagents and poly(A) mRNA isolation reagents are not included in the kit and are available separately.

Ultra Non-directional RNA Library Preparation for Illumina

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 yDcpS 是脱帽酶，来源于酿酒酵母（S. cerevisiae），可水解 mRNAm7G 帽结构中 gamma 和 beta 位磷酸基团之间的磷酸二酯键，产物为二磷酸化的 5’末端和 m7GMP。yDcpS 可使全长 mRNA 脱帽，留下的 5’二磷酸末端可用牛痘病毒加帽酶重新加帽。

 1X yDcpS 反应缓冲液，37℃ 温育。

 200,000 units/ml