Q5^® 超保真 DNA 聚合酶

Q5 超保真 2X 预混液

Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶

Q5 超保真 PCR 试剂盒

Q5 定点突变试剂

Q5 定点突变试剂盒（不含感受态细胞）

Q5 超保真 DNA 聚合酶，以其无与伦比的扩增保真性（＞ Taq 酶的 100 倍）及其超低的错配率，建立了高保真聚合酶的新标准。Q5 DNA 聚合酶是一种新型聚合酶，携带具有持续合成能力的 Sso7d DNA
结合域，能够提高反应速度、保真度和稳定性。
Q5 反应缓冲液系统使扩增范围更广泛，无论模板 GC 含量的高低，Q5 超保真 DNA 聚合酶均以最少的优化，表现出卓越的扩增能力。对于常规或 GC 含量 ≤ 65% 的复杂模板，使用 Q5 反应缓冲液可以进行可靠的、超强的扩增；对于高 GC 含量的模板（＞ 65%），添加 Q5 High GC Enhancer 确保最大的扩增性能。

与化学修饰或基于抗体结合的热启动机制相比，NEB 的 Q5 采用了独特的核酸适配体修饰的热启动方式。该核酸适配体结构通过非共价键作用与聚合酶结合，在建立反应时可有效封闭聚合酶活性。Q5 热启动聚合酶在常规热循环条件下才能发挥作用，因此可在室温条件下建立反应体系。Q5 热启动 DNA 聚合酶无需额外的高温激活
步骤，从而减少了样品降解的可能性，缩短了反应时间，使操作更为简便。无论 GC 含量高低，Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶都能表现出高特异性扩增性能和广泛的模板适应性，是您理想的选择。为了加样方便，Q5 和 Q5 热启动 DNA 聚合酶均有单酶或预混液剂型可供选择。预混液中包含 dNTPs、Mg++ 和所有必需的缓冲液组份。

为了加样方便，Q5 DNA 聚合酶有预混液或试剂盒剂型可供选择。Q5 超保真 PCR 试剂盒包含 Q5 超保真 2X Master Mix、无核酸酶污染的水、Quick-Load 紫色 2-Log DNA Ladder。关于 Q5 定点突变试剂盒（包含或不包含感受态细胞）的详细信息见 104 页。

2,000 units/ml。

Q5 (A) 和 Q5 热启动 (B) 超保真 DNA 聚合酶具有超强扩增能力，可用于任何 GC 含量的扩增。使用 Q5 或 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶扩增从低到高不同 GC 含量的人类基因组 DNA。使用 Q5 热启动的反应在室温下建立，所有的反应均为 30 个循环并用微流控芯片技术（microfluidic LabChip® analysis）检测。

• 反转录延伸能力强，可快速获得大量长片段 cDNA

体验新型反转录酶，感受II 型内含子编码的反转录酶带来的超强反转录活性

Induro 反转录酶是由 II 型内含子编码的反转录酶，在 RNA 反转录合成 cDNA 过程中，展示出更强持续合成能力、热稳定性，以及抑制剂耐受能力。特别适用于长转录本、复杂二级结构，以及含有抑制成分的 RNA 样品反转录合成 cDNA。Induro 反转录酶提升了长转录本的 5′ 端测序覆盖度，因此适用于 RNA-seq 应用，例如：RNA 直接测序、长片段 cDNA 测序。

图 1：Induro 反转录酶的持续合成能力强，能够快速高效合成 cDNA

Induro 反转录酶能够在 55℃ 条件下，5 分钟内合成 12 kb cDNA 全长产物。以体外转录获得的不同长度且带有 Poly (A) 尾的 RNA 作为模板 (1 kb、4 kb、8 kb 或 12 kb)，验证全长 cDNA 反转录效果。验证全长 cDNA 的合成效果。首先，合成第一链 cDNA，随后，用 NaOH 水解 RNA 链，然后，将 cDNA 产物等分，分别加入 5´ 特异性引物合成全长双链 cDNA。最后，在琼脂糖凝胶上加入等体积的双链 cDNA 产物进行检测。

图 2：Induro 反转录酶热稳定性能卓越，能够在更高反应温度下稳定合成

Induro 反转录酶能够在 45°C-60°C条件下，10 分钟内合成 12 kb cDNA 全长产物。以体外转录获得的不同长度且带有 Poly (A) 尾的 RNA 作为模板 (1 kb、4 kb、8 kb 或 12 kb)，验证全长 cDNA 的合成效果。首先，合成第一链 cDNA，随后，用 NaOH 水解 RNA 链，然后，将 cDNA 产物等分，分别加入 5´ 特异性引物合成全长双链 cDNA。最后，在琼脂糖凝胶上加入等体积的双链 cDNA 产物进行检测。

图 3：Induro 反转录酶合成长片段 cDNA 时，产量最高

转录本长度 ≥8 kb 时，Induro 反转录酶合成的 cDNA 产量最高。以体外转录获得的不同长度且带有 Poly (A) 尾的 RNA 作为模板 (1 kb、4 kb、8 kb 或 12 kb) 。首先，合成第一链 cDNA，随后，水解 RNA 链，加入 5´ 特异性引物合成第二链 cDNA

图 4：Induro 反转录酶能够以复杂的人 RNA 为模板，反转录合成长片段 cDNA

Induro 反转录酶能够以人总 RNA 为模板，分别在 50°C、55°C 或 60°C 条件下，经 10 分钟孵育，合成 >14 kb cDNA 产物。第一链 cDNA 合成后，将产物等分，使用 LongAmp^® Taq 2X 预混液 (NEB #M0287) 进行 PCR。

图 5：Induro 反转录酶耐受抑制剂的能力比 TGIRT 更强

与 TGIRT^®-III酶 (T) 相比，Induro 反转录酶 (I) 对 RNA 生物样品中常见的抑制成分耐受力更强。在 20 μ 反转录体系中加入 1 μg 长度为 8 kb 的 RNA 体外转录产物（含 poly A）和 oligo dT23VN。所有反应组分（包含 RT 酶）在冰上混合均匀后，加入抑制剂。Induro 的反转录条件为：55°C 10 min，95°C 1 min。TGIRT 的反转录条件为：60℃ 60 min，95℃ 1 min。图中抑制剂含量为其在第一链 cDNA 合成体系中的终浓度。之后加入 5´ 特异性引物合成第二链。

 Ÿ   HPLC 纯度≥99%

Ÿ   应用于不依赖连接的克隆（LIC）

Ÿ   本产品也在以下两种剂型中提供：dNTP 混合液（NEB #N0447）及 dNTP 套装（NEB #N0446）

 dGTP 溶液为 100 mM 超纯 dGTP 的钠盐溶液，pH 7.5，共 0.25 ml，

稀释液

可使用无菌蒸馏水稀释，Milli-Q^® 水稀释更佳，也可使用无菌 TE 稀释（10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA（pH 7.5））稀释。

含有 100 mM dATP，pH 7.4 的钠盐溶液。

acyNTP 可作为链终止基团，因而可用于一般采用 ddNTP 的实验，如 DNA 测序和 SNP 分析。acyNTP 尤其适用于古生菌 DNA 聚合酶的反应，特别是 Therminator DNA 聚合酶。Therminator DNA 聚合酶经过基因工程改造后，拥有更强的掺入核苷酸类似物的能力，这些类似物的糖环发生了改变，如 rNTP，ddNTP，2´ 脱氧核苷酸，特别是 acy 碱基类似物。  

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。