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Bio-Rad伯乐细胞计数校正板1450014145-0014 145-0013

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Bio-Rad伯乐细胞计数校正板1450014

简要描述：
Bio-Rad伯乐细胞计数校正板1450014，Verification Side for Autmomated Cell Counter,20um.应用于TC20自动细胞计数仪。TC20 采用基于图像的分析方法，允许用户实时查看细胞，可通过目测证实 TC20 细胞计数器已正确识别细胞。

加工定制 否

Bio-Rad伯乐细胞计数校正板1450014

TC20 自动细胞计数器采用富有创新的自动聚焦技术和精密的细胞计数算法，只需简单的一步即可在 30 秒内计算出哺乳动物细胞的准确数量。一旦插入载玻片，TC20 细胞计数器即可快速提供细胞总数（无论是否采用台盼蓝染色）并通过台盼蓝染料评估细胞活性。TC20 采用基于图像的分析方法，允许用户实时查看细胞，可通过目测证实 TC20 细胞计数器已正确识别细胞。

1450003 Cell Ctng Kit, Ctng Slides & Trypan Blue
1450005 THERMAL PRINTER, 100-240V, CC
1450007 DIRECT THRM LBL,2″x2″,500/ROLL
1450011 Cell Counting Slides, 30 2-well slides
1450014 VERIFICATION SLIDE,CELL COUNT.
1450015 Cell Ctng Slides, 5 x 30 2-well slides
1450016 Cell Ctng Slides, 10 x 30 2-well slides
1450017 Cell Ctng Slides, 20 x 30 2-well slides
1450018 Cell Ctng Slides, 30 x 30 2-well slides
1450019 Cell Ctng Slides, 40 x 30 2-well slides
1450020 Cell Ctng Slides, 80 x 30 2-well slides
1450013 Trypan Blue 1 x 1.5 ml
1450021 Trypan Blue 5 x 1.5 ml
1450022 Trypan Blue 10 x 1.5 ml

Bio-Rad伯乐细胞计数校正板1450014 

细胞传代培养的常见问题

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细胞传代培养的常见问题

　　细胞培养几乎是所有细胞生物学实验的基础。其中，细胞传代是将部分细胞分离出来，重新接种到新的培养皿中，使细胞重新获得足够的营养条件和生长空间的过程。那么你知道细胞传代培养的常见问题有哪些吗？让我们一起来看看吧！
　　1、细胞何时进行传代
　　通常当细胞生长至w全汇合进行传代，避免细胞生长过密，对于特殊情况，比如有接触抑制的细胞，一般在密度70-80%就进行传代，避免引起细胞分化。
　　2、贴壁细胞胰酶消化如何控制时间
　　贴壁细胞培养一个关键步骤胰酶消化，消化过度会导致细胞碎片增多，细胞成片脱落，严重影响细胞活性，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失，消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打造成细胞损伤，活性下降。
　　一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要对于新购买的细胞，可以先用低浓度的胰酶去摸索一下消化时间，可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆，记录最佳消化时间，下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
　　3、如何看活细胞
　　可通过显微镜观察：活细胞中间透亮，饱满，有光泽，死细胞较暗。或通过台盼蓝染色来计算细胞活力，活细胞排斥台盼兰，因而染成蓝色的细胞是死细胞。有细胞计数仪的，可直接用计数仪计数。
　　4、细胞传几代开始死亡或细胞存活率不佳，增值变慢
　　可能是培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；或者消化过度，对细胞有严重影响；或者是传代比例不合适；细胞存在污染等。
　　更多有关细胞传代培养的常见问题，请联系上海金畔生物科技有限公司。

细胞传代的培养技巧

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细胞传代的培养技巧

　　细胞传代的培养技巧
　　细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，在无菌、适温和丰富的营养条件下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。那么你知道细胞传代的培养技巧有什么吗？让我们一起来看看吧！
　　一、选择适合的细胞培养基：
　　合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的重要条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。
　　二、根据细胞生长方式不同又分为贴壁细胞和悬浮细胞：
　　贴壁细胞：必须贴附于支持物表面才能生长，见于各种实体瘤细胞；
　　悬浮细胞：于悬浮状态下即可生长，不需要贴附于支持物表面，见于各种造血系统肿瘤细胞。
　　正常细胞形态较好，轮廓清晰，边缘透亮，细胞增殖状况良好。当贴壁细胞长到密度90%时，需进行传代。
　　贴壁细胞传代：
　　丢掉原有的培养基加入复温的PBS润洗两次，吸掉PBS，加入胰酶消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始漂浮的时候加入培养基，然后将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min，弃上清，细胞沉淀用培养基重悬，按合适的密度分到几个培养瓶中进行下一轮培养。
　　对于较难消化的细胞，可以用2%利多卡yin消化5-8分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。
　　悬浮细胞传代：
　　悬浮细胞传代比贴壁细胞传代操作步骤较简单。因为细胞已经悬浮在生长培养基中，所以无需进行酶处理即可将其从培养容器中取出，整个过程更快，对细胞的损伤更小。悬浮细胞多采用离心法传代，细胞离心后去掉上层清液，沉淀细胞加新培养液后吹打混匀传代。也可以直接稀释培养瓶中的细胞并使其继续扩增，或通过从培养瓶中取出一部分细胞并将剩余细胞稀释至适合细胞系的接种密度。
　　一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000 rpm/min室温离心5 min。弃上清，细胞沉淀用w全培养液重悬，按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8)，每T25瓶加w全培养液至4-5 ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
　　更多有关细胞传代的培养技巧，请联系上海金畔生物科技有限公司。

细胞铺板不匀的解决方法有哪些？

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细胞铺板不匀的解决方法有哪些？

细胞接种铺板作为体外药理实验中最基本的技能，是实验成败的关键因素。铺板不匀又是科研实验中通往成功道路的一大障碍，细胞聚集导致的接触抑制现象使实验数据的可信度大打折扣。本片文章将会介绍细胞铺板不匀的解决方法有哪些？一起来跟小编涨知识吧！

对于96孔板，每孔通常加入100μL细胞悬液。加样方式为倾斜枪头，从孔的左边靠近底部缓慢加入（加样过快同样容易导致细胞聚集）。笔者建议，每加完半拉板子时，把细胞重新混匀，继续加样。加样结束后，镜下观察如有局部不均匀现象，可以采取敲击法，具体操作如下：将板子置于台面上，左手持住板子的左边，右手轻轻敲击板子的右边缘(5-8次)，力度太强或次数太多会反而更易导致细胞聚集。将板子顺时针旋转，依次敲击剩余三个边（据说逆时针效果不好），静置约5-10分钟后，放入37℃培养箱。

对于6孔板、12孔板或24孔板，为防止表面张力导致的中间液面太低细胞聚集的现象。通常每孔首先滴加少量培基，轻轻晃动浸润整个孔底以保证板子的孔底都是湿润的，这样加液后细胞悬液会平铺在整个孔底，可以避免加在中间位置和加在周边晃匀后周边细胞局部太多的现象，细胞分散会较均匀。注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下（5-10分钟）。镜下观察细胞均匀度，如不均匀可采用以下8字法、十字法及震荡法等方法进行细胞均匀度处理。具体操作如下：

 方法一(8字法)：这种方法也是大家最常见的细胞摇匀方法。横向8字摇匀法参考下图，摇动次数根据镜下观察和个人力度具体分析（参考：保证液体不被晃动出去，8字晃动5次理论上就可以基本晃匀）。摇匀结束，切忌在镜下移动观察视野太久，以免伴随着轻微的移动，细胞又往中间聚集。

方法二(十字法): 细胞铺完板后，在水平方向上，上下左右四个方向进行移动，呈十字形状，重复5-6次。有些同学觉得十字法摇匀效果并不好，方法关键的是摇完后最好直接放入培养箱中，不要再做过多的移动（也有同学建议可以在培养箱中摇匀）。另外，同样不建议放到镜下长时间去观察。

方法三(十字类似法)：细胞铺完板后，放在水平板面上先上下移动，再左右移动，每个方向5-6次。其他具体操作同十字法。

方法四(震荡法)：细胞悬液加完后，将细胞培养板抬高，对着灯光，从底部往上看，看细胞有没有抱团。然后从底部敲击，使之分散。如果实验室有平板振荡器的话，我建议用这个仪器稍振荡一下，效果不错，就是振幅小，频率高的那种。（个人不太推荐这种方法，板子接触振荡器后增加了染菌的风险，而且转速的调节和时间的掌握比较困难）。
以上就是有关于细胞铺板不匀的解决方法有哪些的问题解答，如果你有更多问题请咨询上海金畔客服哦！

细胞转染的方法

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细胞转染的方法

　　转染（Transfection），是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。
　　转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。那么你知道细胞转染的方法有什么吗？让我们一起来看看吧！
　　转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。
　　一、化学转染法：
　　1.磷酸钙法
　　原理：磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞
　　应用：稳转，瞬转
　　特点：不适用于原代细胞，操作简便但重复性差，有些细胞不适用
　　2.阳离子脂质法
　　原理：带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞
　　应用：稳转，瞬转，所有细胞
　　特点：适用性广，转染效率高，重复性好，但转染时需除血清，转染效果随细胞类型变化大
　　3.DEAE-右旋糖苷法
　　原理：带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞
　　应用：瞬转
　　特点：相对简便、结果可重复，但对细胞有一定的毒副作用，转染时需除血清
　　二、生物转染法
　　1.病毒介导法
　　原理：通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中
　　应用：稳转
　　特点：可用于难转染的细胞、原代细胞，体内细胞等
　　2.逆转录病毒
　　应用：持定宿主
　　特点：但携带基因不能太大细胞需处分裂，需考虑安全因素
　　3.腺病毒
　　原理：通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中
　　应用：瞬时转染，待定宿主
　　特点：可用于难转染的细胞，需考虑安全因素
　　三、物理转染法
　　1.Biolistic颗粒传递法
　　原理：将DNA用显微重金属颗粒沉淀，再将包被好的颗粒用弹道装置投射入细胞，DNA在细胞内逐步释放表达
　　应用：瞬转
　　特点：可用于:人的表皮细胞，纤维原细胞，淋巴细胞系以及原代细胞
　　2.电穿孔法
　　原理：高脉冲电压破坏细胞膜电位，DNA通过膜上形成的小孔导入
　　应用：稳转，瞬转，所有细胞
　　特点：适用性广但细胞致死率高，DNA和细胞用量大
　　3.显微注射法
　　原理：用显微操作将DNA直接注入靶细胞核
　　应用：稳转，瞬转
　　特点：染细胞数有限，多用于工程改造或转基因动物的胚胎细胞
　　更多有关细胞转染的方法，请联系上海金畔生物科技有限公司。

细胞消化的注意事项有什么？

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细胞消化的注意事项有什么？

　　细胞培养中的消化传代操作是指将细胞从当前的培养瓶、皿中分离出来，经过消化处理后，分散到新的培养瓶、皿中进行继续培养。那么你知道细胞消化的注意事项有什么吗？让我们一起来看看吧！
　　一、胰蛋白酶的选择
　　EDTA是一种螯合剂，可以与金属离子结合。含有EDTA的胰蛋白酶除了具有胰蛋白酶的消化作用外，还具有螯合金属离子的作用。在细胞培养中，含有EDTA的胰蛋白酶，通过螯合细胞表面的钙离子，破坏细胞与细胞之间的黏附作用，从而使细胞分离出来。
　　因此，如果需要进行细胞解离和分离操作，可以选择含有EDTA的胰蛋白酶；如果只需要进行消化传代操作，可以选择不含EDTA的胰蛋白酶。
　　二、消化时间的掌握
　　消化时间的长短会影响细胞的生长和状态。如果消化时间过长，可能会导致细胞死亡或者受损；如果消化时间过短，则可能会导致细胞未能完q分散，影响细胞的生长和分化。但细胞多长时间能被消化下来，并不完q取决于胰蛋白酶，还和消化的温度、细胞的密度、以及消化环境有关。
　　通常，37°C下进行消化可以缩短消化时间。我们的胰蛋白酶平时一般放在冰箱内，在消化操作之前，可以提前拿出。加入胰蛋白酶后，可以把培养瓶放入培养箱内进行消化，这样可以有效缩短消化时间。另外，不应该在细胞密度太高时才想起来进行消化传代。当密度太高时，细胞之间的黏连会加剧，此时同等的消化条件，会需要花费更多的时间进行消化，进一步提高了判断消化进度的难度。比较合理的传代密度应该在70-80%之间。
　　三、其他注意事项
　　在加入胰蛋白酶之前，通常会使用pbs进行润洗，润洗后，应该彻d扔弃瓶内的pbs后，再加入胰蛋白酶进行消化。
　　加入胰蛋白酶的量应该是刚刚没过整个培养瓶底部即可。
　　在消化过程中，如果发现细胞解离太快，可以把培养瓶竖起来，让瓶壁上残留的消化液进行消化。
　　更多有关细胞消化的注意事项，请联系上海金畔生物科技有限公司。

细胞消化的方法有什么

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细胞消化的方法有什么

　　细胞消化的方法有什么
　　在贴壁细胞传代前必需将细胞与贴附介质分离，常见的方式就是通过胰蛋白酶对细胞进行消化。那么你知道细胞消化的方法有哪些吗？让我们一起来看看吧!
　　一、机械消化法
　　直接用液体吹打或用刮刀，施予外力让细胞与培养底物分离；适用于贴壁性弱的细胞传代，但相较于其它消化方法，这种外力无法量化控制，细胞分散效果差，且可能会造成大量细胞破损，使内容物释放到培养基，进而影响细胞传代状态。
　　二、离子螯合法
　　细胞膜表面蛋白大多需要钙、镁离子来维持与胞外基质的稳定键结，当然也包含各种黏附蛋白（例：整合素、钙黏着蛋白、桥粒等），螯合剂会在不破坏细胞膜表面蛋白的状况下，抽离这些离子，使黏附蛋白失活而减少细胞-细胞间及细胞-底物间的连接作用，让细胞较容易在施予外力时，脱离培养底物并促进细胞分散。
　　0.02%EDTA是细胞传代常用的离子螯合剂，在37℃作用效果佳（消化较敏感的细胞可在4℃作用），适用于消化一般贴壁性细胞或细胞表面标记实验细胞。但EDTA无法用血清终止其反应，所以在消化细胞后必须用缓冲盐溶液（如：PBS）清洗离心，以免影响后续细胞贴盘效果。
　　三、酶消化法
　　用蛋白水解酶消化连接细胞及培养底物的蛋白质，适用于消化贴壁性稍强的细胞。
　　更多有关细胞消化的方法，请联系上海金畔生物科技有限公司。

如何避免细胞污染？

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如何避免细胞污染？

　　你知道在细胞培养实验中该如何避免污染吗？让我们一起来看看吧！
 
　　一、培养环境：
 
　　1)无菌室：保持清洁，经常擦洗，使污染物不易积聚。
 
　　2)超净台：
 
　　①定期维护和保养，按厂家规定定期清洗和更换空气滤器，经常保持清洁并用75%乙醇消毒；
 
　　②操作前提前30 min启动超净台紫外灯消毒；
 
　　③存放的物品应全面消毒，并尽可能只将立即使用的物品放入；
 
　　④细胞培养操作时应尽量保持层流，避免气雾状污染物进入培养器皿；
 
　　⑤操作中溅出的液体应及时擦去，并用75%乙醇擦拭消毒；
 
　　⑥实验完毕后，移走所有物品，并用75%乙醇擦洗工作台。
 
　　二、物品的消毒灭菌
 
　　①操作前应做好所用器皿、试剂的消毒灭菌工作；
 
　　②高压蒸汽灭菌是常用的方法，不能采用此法灭菌的器皿、试剂，应采用其他消毒灭菌方法，如培养基等试剂可过滤除菌，盖玻片等器械可用75%乙醇浸泡消毒后置于无菌环境中晾干；
 
　　③若物品消毒灭菌后长时间未使用，应重新处理。
 
　　三、无菌操作
 
　　防止污染的关键在于严格无菌操作。无菌意识不强、动作不准确、操作不熟练等都会造成污染。注意事项主要如下：
 
　　①细胞培养的操作一定要在超净台等层流装置内进行，无菌的试剂、器械一定要在无菌区开封；
 
　　②操作时减少交谈、咳嗽等防止来自唾沫和呼出气流造成的污染；
 
　　③培养试剂不宜过早开瓶，操作时应尽可能保持瓶体倾斜，所有瓶口不能与超净台的风向相逆，使用后应立即封闭瓶口；
 
　　④培养的细胞处理前也不要过早暴露于空气中；
 
　　⑤不要在打开器皿上方操作；
 
　　⑥不允许用手触及器皿的无菌部分(如瓶口、瓶盖内侧)。
 
　　更多有关如何避免细胞污染，请联系上海金畔生物科技有限公司。

Elabscience MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒怎么用？

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Elabscience MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒怎么用？

Elabscience MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测。那么你知道Elabscience MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒该怎么用吗？让我们一起来看看吧！

1. 准备工作

本试剂盒中 MTT (5×)为浓缩液，实验前稀释成 1×工作液。例如：取 100 μL MTT (5×)，加入 400 μL

MTT Diluent Buffer，混匀后即为1×MTT 工作液。

2. 取生长状态良好的细胞，调整细胞密度，按每孔100 μL 细胞悬液接种于96 孔板中，同时设空白孔（不加细胞但是加入同体积的培养基）。

注：通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。

3. 根据实验设计对细胞进行培养和处理。

4. 每孔加入 50 μL 的 1×MTT 工作液。继续孵育 1~4 h，使 MTT 还原为甲臜。

注：MTT孵育条件与细胞培养条件相同。

5. 小心吸出上清液，每孔加入 150 μL 的 DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

6. 用酶标仪测定在 570 nm 处的吸光度。

7. 结果计算

[注]:

ODsample: 实验孔的OD值

ODcontrol: 对照孔的OD值

ODblank: 空白孔的OD值

更多有关Elabscience MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒的使用方法，请联系Elabscience试剂盒代理——上海金畔生物科技有限公司。

悬浮细胞的瞬时转染操作

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悬浮细胞的瞬时转染操作

　　知道悬浮细胞的瞬时转染操作有什么吗？让我们一起来看看吧！
　　一、细胞转染前的准备
　　1、细胞：
　　贴壁生长细胞：一般要求在转染前一日，必须应用胰酶处理成单细胞悬液，重新接种于培养皿或瓶，转染当日的细胞密度以70-90%（贴壁细胞），最好在转染前2-4 h换一次新鲜培养液。
　　悬浮细胞：转染前12-16 h进行悬浮细胞传代，传代后适宜的细胞密度为20-40×104/mL。台盼蓝染色进行活细胞计数保持活细胞比在95%以上。
　　提前将293F细胞的密度调整至合适的密度后（2×106-4×106细胞/ml）于37℃摇床培养2-4 h后进行转染。注意，参与转染的细胞必须是培养三代或以上的稳定细胞株。
　　2、DNA：
　　使用去内毒素质粒大提试剂盒提取质粒，于生物安全柜/超净台用0.22μm滤头过滤除菌。
　　3、稀释液：
　　于生物安全柜/超净台用0.22μm滤头过滤除菌。
　　4、转染试剂：
　　转染试剂如PEI溶液长期储存于-20℃，不可反复冻融，溶液在4℃放置不超过一周。
　　二、操作步骤（悬浮细胞）
　　1、取一支已灭菌的Ep管，加入一定量的DNA，以相应体积的300 mM NaCl稀释，用枪头混匀后静置5 min；
　　另取一支已灭菌的Ep管，加入相应体积的300 mM NaCl稀释对应体积的PEI溶液用枪头混匀后静置5 min（稀释液与DNA、PEI的总体积应为转染体积的5%）。
　　将质粒和PEI溶液混合，枪头混匀后静置一段时间，使DNA与PEI形成稳定的聚合物。
　　2、从摇床中取出293F细胞。用1 mL移液枪滴缓慢滴加转染混合液，边加边摇晃摇瓶使转染更加充分。
　　3、转染后将悬浮细胞置于摇床中培养，条件为37℃、8%CO2、110 rpm。每隔24 h进行细胞计数并用台盼蓝染色液观察细胞的存活率。
　　更多有关悬浮细胞的瞬时转染操作，请联系上海金畔生物科技有限公司。

hgc细胞能用DMEM培养基吗？

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hgc细胞能用DMEM培养基吗？

DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）是一种常用的细胞培养基，广泛用于许多细胞系的培养和研究。那么，HGC细胞能否使用DMEM培养基呢？让我们一起来看看吧！

HGC细胞是一种人类胃癌细胞系，通常用于胃癌相关的研究和实验。在选择合适的培养基时，需要考虑细胞的特性和要求。DMEM培养基具有多种组分，包括氨基酸、维生素、糖类和盐类等，能够提供细胞生长所需的营养物质。

HGC细胞在DMEM培养基中的生长和增殖情况会受到许多因素的影响。首先，pH值是细胞生长的重要因素之一。DMEM培养基的pH范围通常为7.2-7.4，这适合大多数细胞系的生长，包括HGC细胞。其次，温度和湿度也会影响细胞的生长情况，一般来说，37°C和5% CO2的条件下适合大多数细胞系的培养。

此外，DMEM培养基中还含有胎牛血清（FBS），它是一种常用的细胞培养所需的补充物。FBS中含有许多生长因子和细胞因子，能够促进细胞的增殖和生长。然而，对于某些特定的细胞系，如HGC细胞，可能需要根据实验目的和需求来确定是否需要使用FBS。

在使用DMEM培养基培养HGC细胞时，还需要考虑其他因素。例如，细胞密度、培养皿的类型和大小、细胞传代的时机等，都会影响细胞的生长和增殖。此外，还需要定期更换培养基，以保持细胞的健康和活力。

总结来说，DMEM培养基是一种常用的细胞培养基，适合大多数细胞系的培养和研究，包括HGC细胞。然而，在使用DMEM培养基培养HGC细胞时，需要考虑细胞特性、实验需求以及其他因素的影响，以确保细胞能够正常生长和增殖。

更多有关DMEM培养基能否用于hgc细胞，请联系上海金畔生物科技有限公司。

DMEM培养基适用于什么细胞？

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DMEM培养基适用于什么细胞？

DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是一种更为全面且适用于多种细胞类型的细胞培养基，被广泛应用于生物医学研究和生物技术领域。那么你知道DMEM培养基适用于什么细胞吗？让我们一起来看看吧！

DMEM一开始是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM培养基是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM相比，DMEM增加了各种成分用量，同时又分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型应用于生长快、粘附性低的细胞，杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、原代病毒宿主细胞，单一细胞。与最普通的MEM培养基相比，DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍、且含有非必须氨基酸；维生素浓度是MEM的4倍。

DMEM培养基广泛应用于生物医学研究、生物技术及制药行业的许多领域，包括但不限于：

基础细胞生物学研究：在细胞生物学研究中，DMEM被用于体外培养和维持多种细胞系，以研究细胞的功能、生长、增殖、分化和死亡等生理过程

肿瘤学研究：在癌症研究中，DMEM培养基常用于培养癌细胞株，探索肿瘤细胞的生长机制、治疗方法以及抗肿瘤药物的筛选　

病毒学研究：用于培养病毒颗粒，研究病毒的生命周期、复制过程以及抗病du药物的筛选

干细胞研究：在干细胞领域，DMEM培养基被用于维持和扩增干细胞群体，以及分化为特定细胞类型

生物药物生产：DMEM培养基在制药行业中用于生物药物的生产过程，如单克隆抗体、疫苗等　

细胞毒性测试：用于评估药物、化合物或化妆品对细胞的毒性影响

更多有关DMEM培养基适用的细胞，请联系上海金畔生物科技有限公司。

millipore 密理博 Scepter手持式细胞计数仪/计数器PHCC00000

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【简单介绍】

millipore 密理博 Scepter手持式细胞计数仪/计数器PHCC00000

与传统的细胞技术方法相比：

> 快速！14秒完成细胞计数

> 精确！（CV<5%） > 方便！像pipette一样

> 适合多种大小的细胞检测（3-36µm）

> 细胞状况实时监控！

> 强大的分析软件

【详细说明】

millipore 密理博 Scepter手持式细胞计数仪/计数器PHCC00000
 

与传统的细胞技术方法相比：

> 快速！14秒完成细胞计数

> 精确！（CV<5%）

> 方便！像pipette一样

> 适合多种大小的细胞检测（3-36μm）

> 细胞状况实时监控！

> 强大的分析软件

应用：

> 细胞实验要求的精确细胞计数

> 细胞消化，接种和传代

> 多个细胞样品快速计数

> 定量计算细胞繁殖率

> 监控细胞直径和体积

> 不同的细胞培养条件对细胞群体分布的影响     

 

操作面板：

> 细胞群体按细胞大小或体积分布的曲线图

> 细胞密度

> 细胞平均体积大小

> 可以根据要求设置取值上下限

> 提供细胞健康状况的定量信息
 

重点推介：AcceGen人胃癌细胞NUGC-4细胞(ABC-TC0862)

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重点推介：AcceGen人胃癌细胞NUGC-4细胞(ABC-TC0862)

AcceGen在细胞和基因组研究方面积累了丰富的专业知识。提供各种高质量的原代细胞、肿瘤细胞系、MicroRNA Agomir/Antagomir、干细胞、永生化细胞系、转染稳定细胞系和核酸试剂盒。AcceGen为细胞生物学、制药、生物技术和特种成分市场开发创新技术。AcceGen致力于通过全球制造、开发专业知识和*技术提供最hao的产品和服务，以提高整体质量。

NUGC-4，也称为“Nagoya University-Gastric Cancer-4“，“NU-GC-4“，和“NUGC4“，是一种在手术过程中从患者体内建立的人类癌症细胞系。该细胞系来源于转移性胃旁淋巴结的人胃印戒细胞癌。当在体外培养时，NUGC-4细胞表现出球形上皮样形态，并显示出细胞粘附的特征，尽管也可能存在一些自由漂浮的细胞。

AcceGen人胃癌细胞NUGC-4细胞支持1mL体积超过5×105个细胞的NUGC-4细胞，并配有专业的冷冻保存包装，以确保高质量和生存能力。AcceGen NUGC-4对HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌呈阴性。在AcceGen提供的条件下，NUGC-4的种群倍增可达15倍以上。NUGC-4作为癌症细胞系，广泛应用于科学研究，如寻找人类癌症形成的关键因素和抗癌药物的靶点。表皮生长因子（EGF）强烈激活NUGC-4中的酪氨酸磷酸化。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3-激酶）主要由酪氨酸激酶激活，与抗磷酸酪氨酸抗体在NUGC-4中沉淀。外源性肝细胞生长因子可刺激NUGC-4的增殖，MET酪氨酸激酶抑制剂可抑制NUGC-4增殖。研究NUGC-4细胞系及其与生长因子的相互作用，可以为确定癌症信号通路和筛选潜在的治疗靶点提供方向。下面让我们一起来看看AcceGen人胃癌细胞NUGC-4细胞(ABC-TC0862)的产品属性吧！

产品类型：人胃癌细胞系

细胞来源：淋巴结

推荐培养基：RPMI 1640 + 10% FBS

生物安全等级：一级

生长条件：37℃，5%CO2

储存方式：液氮储存

应用：仅供研究使用

上海金畔生物科技有限公司重点推介AcceGen人胃癌细胞NUGC-4细胞(ABC-TC0862)，欢迎选购！

重点推介：AcceGen人结直肠腺癌细胞Caco-2细胞(ABC-TC0102)

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重点推介：AcceGen人结直肠腺癌细胞Caco-2细胞(ABC-TC0102)

AcceGen是一家美国生物技术公司。成立于2016年，位于新泽西州费尔菲尔德，AcceGen提供完整和精确的细胞产品和科研服务。AcceGen为客户开发了专有的原代细胞永生化服务科研服务。

Caco-2 (人结直肠腺癌细胞)分离自一位72岁男性直肠原位癌，人结肠癌Caco-2细胞系在标准培养条件下汇合后，自发分化为肠上皮样细胞，是常用的肠癌细胞模型。Caco-2细胞分离自直肠原位癌；当长到满时，Caco-2细胞表现出特征性的肠上皮细胞分化。Caco-2细胞表达维甲酸结合蛋白I和维甲酸结合蛋白Ⅱ，并呈角质蛋白阳性。下面让我们一起来看看AcceGen人结直肠腺癌细胞Caco-2细胞的培养要点吧！

1. 细胞不贴壁怎么办

Caco-2细胞培养基里添加的胎牛血清比例为20%，当血清比例降低，贴壁性下降时，补充胎牛血清至20%，继续培养1-2天，细胞即可贴壁。检查培养基是否偏碱（呈紫红色），偏碱的培养基可能导致细胞无法贴壁。

2. 能否用DMEM替代MEM

可以。DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是在MEM培养基的基础上研制的。Caco-2细胞在DMEM+20%FBS+1%P/S条件下生长状态正常。

3. MEM中不含NEAA会怎样

当使用不含NEAA的MEM培养基时，Caco-2生长速度可能下降，漂浮细胞增多。

4. 细胞消化不下来怎么办

如果消化5-10分钟，细胞部分脱落，另一部分仍然贴壁紧密，可以将脱落细胞转移至离心管，向原瓶中加入新的胰酶，放入培养箱继续消化剩余细胞，每隔1min拿出来观察，直到细胞滑落。

5. 漂浮细胞多怎么办

有少量发亮的细胞漂浮或黏附在细胞克隆上，是正常的，随后会进入克隆并正常生长。所以避免频繁观察细胞，可以减少漂浮细胞产生。

如果Caco-2细胞随着培养过程，漂浮得越来越严重，甚至大块儿飘起，就要检查培养基成分、培养环境是否出现异常了。

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重点推介：AcceGen非洲绿猴肾细胞Vero细胞(ABC-TC1273)

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重点推介：AcceGen非洲绿猴肾细胞Vero细胞(ABC-TC1273)

AcceGen是美国领xian的生物技术公司，致力于为细胞生物学、生物制药、生物技术等领域提供高质量的原代细胞、肿瘤细胞系、干细胞、永生化细胞、转染稳定细胞等细胞类产品。

Vero细胞是一种从非洲绿猴的肾上皮中分离出的细胞系。它们常用于生产许多病毒疫苗，如脊髓灰质炎疫苗、埃博拉病毒疫苗和黄热病疫苗等。Vero细胞具有良好的感染性，并在无血清培养条件下生长，适宜进行大规模培养。由于细胞株的稳定性和较低的变异性，Vero细胞是疫苗生产中的常用细胞。Vero细胞来源方便，容易建立细胞库和保存，可连续传代，生长速度快；遗传性状稳定，恶性化概率小，无外源性污染，具有良好的生物安全特性；对多种病毒敏感，生产的病毒滴度高；对培养条件要求不高，在微载体表面能良好的贴附生长，易在生物反应器放大培养；Vero 细胞系可无限传代，从而可用于广泛的细胞特性和大型细胞库的创建。下面让我们一起来看看AcceGen非洲绿猴肾细胞Vero细胞(ABC-TC1273)的产品属性吧！

物种：非洲绿猴；

产品类型：猴肾细胞系；

细胞类型：上皮细胞；

生物安全等级：一级；

运输方式：干冰运输；

推荐培养基和补充剂：MEM + 10% FBS；

应用：仅供研究使用。Vero细胞广泛应用于细菌毒素和病毒的筛选。Vero细胞谱系在寄生虫研究和生物制药研究中也发挥着极其重要的作用，如多病原体研究和疫苗生产。纯化Vero细胞狂犬病疫苗（PVRV）是WHO批准的细胞培养疫苗之一。

上海金畔生物科技有限公司重点推介AcceGen非洲绿猴肾细胞Vero细胞(ABC-TC1273)，欢迎选购！

细胞表面染色实验操作流程是什么？

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细胞表面染色实验操作流程是什么？

你知道细胞表面染色实验操作流程是什么吗？让我们一起来看看吧！

一、细胞计数

将培养好的细胞收集于15mL离心管并计数；500g离心4min，去上清。

二、制备单细胞悬液

将收集的细胞用1mL 0.5%BSA/PBS溶液重悬，400g离心3min，去上清，重复2次；用0.5%BSA/PBS溶液重悬细胞至浓度1×106个细胞/mL，分配到96孔板中，每孔100μl细胞悬液。

三、阻断Fc受体

室温孵育10-20min。

四、一抗孵育

每孔加入稀释后的一抗溶液100μl，2-8℃反应30min。

五、洗涤

400g离心5min，去上清后加入200μl 0.5%BSA/PBS溶液重悬，离心去上清，重复两遍。

六、二抗孵育

对于非荧光染料直标抗体，加入100μl荧光二抗重悬，避光2-8℃反应30min。对于直标抗体直接跳到步骤八。

七、洗涤

400g离心5min，去上清后加入200μl 0.5%BSA/PBS溶液重悬，离心去上清，重复两遍。

八、重悬细胞

用200μl 0.5%BSA/PBS溶液重悬细胞，4℃保存，上机分析。

更多有关细胞表面染色实验的操作流程，请联系上海金畔生物科技有限公司：

免疫细胞（ICC）实验常见问题有哪些？

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免疫细胞（ICC）实验常见问题有哪些？

免疫细胞化学 (ICC) 是一种使用荧光抗体或染料来检测细胞内靶抗原的技术。那么免疫细胞（ICC）实验常见问题有哪些？让我们一起来看看吧！

一、荧光信号弱

1. 样品质量

选用新鲜制备的样本以及适当的保持条件。

2. 靶标丰度低

适当提高一抗浓度。

选择荧光强度更强的二抗。

3. 固定方法不当

甲醛和蛋白的氨基通过共价键结合，可能会遮盖抗原表位，导致靶表位信号减弱。建议调整抗原修复方法或固定方法。

多聚甲醛会与GFP荧光蛋白发生醛化反应，导致信号减弱。

检测膜蛋白一般不建议使用甲醇或丙酮固定，有机溶剂能够破坏膜结构。

4. 透化方法不当

检查靶标蛋白表达位置，胞内蛋白需要透化处理。

膜蛋白需要考虑所检测靶表位位于膜内还是膜外，膜外则不需要透化。

5. 信号放大不够

如果检测靶点是低丰度蛋白．信号弱可能是由于信号放大不足导致的，可以使用Invitrogen SuperBoost 酪胺信号放大技术，进一步增强信号，实现低丰度，难以检测蛋白的检测。

二、背景太高

1. 封闭不足

（1）选用二抗种属来源的血清封闭。

（2）选用链霉亲和素/生物素系统，需要用链霉亲和素封闭内源的生物链酶。

（3）选用HRP系统，需要使用过氧化氢等商业化试剂盒去活化内源性HRP。

（4）选用AP系统，需要使用左旋咪唑等商业化试剂去活化内源性磷酸酶。

2. 一抗

一抗浓度过高，减少用量

3. 二抗

（1）设置无一抗对照，帮助确认背景是否来源二抗。

（2）二抗浓度过高，减少用量。

（3）抗体凝聚，使用二抗前离心去掉抗体凝聚物。

（4）使用高交叉吸附的Alexa Fluor Plus二抗，信噪比比Alexa Fluor提高4-5倍。

4. 自发荧光

（1）设置自发荧光对照，确定是否自发荧光。

（2）固定剂如醛类和氨基共价结合导致的自发荧光，可用硼氢化na去除。

（3）增加固定剂的漂洗次数。

（4）避开背景高的波段，选用背景较低的波段检测。

更多有关免疫细胞（ICC）实验常见问题，请联系上海金畔生物科技有限公司：

细胞转染的分类方法

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细胞转染的分类方法

　　细胞转染是指将外源性基因导入到细胞内的技术。那你知道细胞转染的分类方法是什么吗？让我们一起来看看吧！
　　一、根据导入的核酸存在的时间长短，可分为瞬时转染和稳定转染
　　瞬时转染：指将构建好的质粒通过某种方式导入到哺乳动物细胞内，该质粒上的外源基因不整合到细胞自身的基因组上。
　　细胞中瞬时转染的外源基因表达时间有限，通常仅持续几天，直到外源基因在细胞分裂过程中因各种因素丢失为止。多用于启动子和其他调控元件的分析。
　　稳定转染：外源DNA整合到细胞基因组中或作为附加体质粒保留在细胞中。与瞬时转染不同，稳定转染能够整合到宿主基因组，因此转染细胞及其子代细胞的基因组中会同时保留转染的DNA。
　　由于稳转效率较低，因此选用有效的细胞转染方法很重要。
　　二、根据转染方式可以分为化学，生物，物理方法
　　化学方法：利用载体分子包被核酸使其呈现中性电荷或正电荷。如阳离子脂质体方法、磷酸钙共沉淀法、其他阳离子物质介导等技术。
　　生物方法：利用基因工程病毒转染非病毒基因到细胞中。现在比较多见的是各种病毒介导的转染技术。
　　物理方法：在细胞膜表面产生一个瞬时的孔从而导入DNA。如电穿孔法、显微注射法。
　　更多有关细胞转染的分类方法，请联系上海金畔生物科技有限公司。

细胞瞬时转染的原理

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细胞瞬时转染的原理

　　哺乳动物细胞瞬时转染能在短期内快速表达高活性蛋白而被广泛应用。那么细胞瞬时转染的原理是什么？让我们一起来看看吧！
　　哺乳动物细胞自身具有蛋白折叠和翻译后修饰的功能，获得的蛋白更具有天然活性。哺乳动物细胞生产蛋白的方式有两种：瞬时转染和稳定转染。瞬时转染的特点是短期快速表达，满足蛋白的小量制备。而稳定转染通过构建稳定细胞系能够满足蛋白的大量、长期生产。
　　瞬时转染的原理是指将构建好的质粒通过某种方式导入到哺乳动物细胞内，该质粒上的外源基因不整合到细胞自身的基因组上。随着细胞的生长分裂，外源基因会逐渐丢失。质粒在细胞内能够存在3-4天，此时间内，质粒外源基因在细胞内发生转录翻译，得到极为少量的蛋白。这一整个快速转染得到蛋白的过程就称为瞬时转染表达。
　　更多有关细胞瞬时转染的原理，请联系上海金畔生物科技有限公司。