UDP 糖|原位udp -葡萄糖再生促进β-葡萄糖苷的生成

糖基转移酶(GT)介导法被认为是大规模生产糖苷最实用的方法之一。

然而,GT酶需要一个糖核苷酸作为供体底物,必须通过回收核苷酸部分在原位生成用于制备应用,例如通过蔗糖合酶(SUS)。

将3个植物GT基因CaUGT2、VvGT14a和VvGT15c与真菌SbUGTA1在大肠杆菌BL21和W细胞中成功共表达。

在体外实验中,由4个GT基因和GmSUS共表达细胞制备的粗蛋白提取物,在提供蔗糖和UDP的条件下,能够将几个小分子转化为相应的糖苷。

此外,GmSUS能够提高糖基化效率,降低UDP-glucose供给量。

在生物转化体系中,VvGT15c与GmSUS共表达也能改善香叶醇的糖基化作用,增强细胞对有毒萜烯醇的抗性。

GT-EcW和GTSUS-EcW细胞可耐受2 mM香叶醇,在超过40 μg ml−1 h−1的生产速率下,将超过99%的底物转化为葡萄糖苷。

结果证实,SUS的共表达允许UDP-糖的原位再生,并避免了UDP对产物的抑制。

UDP-L-RhaNAc UDP-4n-D-FucNAc
UDP-D-XylNAc UDP-VioNAc
UDP-2-Biotinyl-GalNAc UDP-6-Biotinyl-GalNAc

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