蛋白质生产的细胞类型有什么?

蛋白质生产的细胞类型有什么?

在悬浮培养大规模生产中,常用的细胞类型有什么呢?让我们一起来看看吧!

一、真核细胞:真核细胞是具有真核细胞核的细胞,包括哺乳动物细胞、昆虫细胞和酵母细胞等。真核细胞通常被用于大规模生产复杂蛋白质,如重组蛋白质、抗体等。以下是常用的真核细胞类型:

1.CHO细胞(Chinese Hamster Ovary cells):CHO细胞是一种常用的哺乳动物细胞,被广泛应用于大规模生产蛋白质。CHO细胞具有较高的产量和较好的蛋白质折叠和糖基化能力,同时易于培养和扩展。

2.HEK293细胞(Human Embryonic Kidney cells):HEK293细胞是来自人类胚胎肾脏的细胞系,也常被用于大规模生产蛋白质。HEK293细胞具有高产量和较好的蛋白质折叠能力,但相比CHO细胞,其糖基化能力较差。

3. BHK细胞(Baby Hamster Kidney cells):BHK细胞是源自小鼠胚胎的哺乳动物细胞系。BHK细胞常用于病毒研究和生物药物生产中,特别是疫苗和蛋白质表达。

4. 昆虫细胞:昆虫细胞,如昆虫卵巢细胞(Sf9、Sf21)和昆虫脾脏细胞(High Five),也常被用于大规模生产蛋白质。昆虫细胞具有高产量,培养条件较简单,并且能够实现蛋白质正常折叠和糖基化,但其表达的蛋白质往往需要进一步纯化和修饰。

5. 酵母细胞:酵母细胞,如酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和甘酒酵母(Pichia pastoris),也常被用于大规模生产蛋白质。酵母细胞具有高产量和较好的蛋白质折叠能力,同时易于培养和扩展。特别是甘酒酵母,能够实现糖基化和区分性泛素化等重要后翻译修饰。

二、原核细胞:原核细胞是没有真核细胞核的细胞。原核细胞常被用于大规模生产简单蛋白质、酶类和多肽等。以下是常用的原核细胞类型:

大肠杆菌(Escherichia coli):大肠杆菌是zui常用的原核细胞,被广泛应用于大规模生产蛋白质。大肠杆菌具有高产量、培养条件简单和易于扩展的特点,但由于其为原核细胞,其表达的蛋白质缺乏糖基化和蛋白质折叠较复杂。

三、植物细胞:

植物细胞,如鸟嘌呤二核苷酸酶(PMP)和转基因植物的细胞,近年来在大规模生产蛋白质方面也得到了广泛研究。植物细胞有很高的产量潜力和较好的蛋白质折叠机制,并且可以实现重要的翻译后修饰,如糖基化。此外,植物细胞还有易于培养和扩展的特点,以及低成本和低传染性等优势。

四、鱼类细胞:

近年来,鲤鱼细胞(LC3)和鲈鱼卵巢细胞(SDJY)等鱼类细胞也成为了大规模生产蛋白质的新型候选细胞。鱼类细胞在表达复杂蛋白质时具有出色的折叠机制和高产量特点,因此在蛋白质生产中表现良好。

悬浮培养大规模生产中常用的细胞类型包括CHO细胞、HEK293细胞、昆虫细胞、大肠杆菌和酵母细胞等。每种细胞类型具有不同的特点和应用范围,选择合适的细胞类型可以提高蛋白质生产效率和产品质量。更多有关蛋白质生产的细胞类型,请联系上海金畔生物科技有限公司:

Gibco™病毒生产培养基

上海金畔生物科技有限公司提供Gibco™病毒生产培养基 ,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
Gibco™病毒生产培养基

详情介绍

Gibco™ Viral Production Medium(Gibco™病毒生产培养基)

Features of Viral Production Medium include:

• Supports growth of suspension Viral Production Cells 2.0 to densities of over 1.2 x 107 cells/mL

• Enables production of high AAV titers, greater than 5 x 1010 vg/mL (unpurified)

• Supports growth and transfection of Viral Production Cells 2.0 from shake flask to bioreactor scales                   Antibiotic Spectrum:None.

Product Type:AAV production medium.

Regulatory Status:RUO – Research Use Only.

Storage Requirements:Protect from light.

Storage:2-8 °C, protected from light.

Sterility:Sterile.

Shipping Condition:Room Temperature.

Supplementation Required:Yes, GlutaMAX.

Volume (Metric):10 L.

Product Line:AAV-MAX.

Form:Liquid.

Glutamine:No.

Phenol Red Indicator:Yes.

Expression System:Mammalian.

Shelf Life:12 months from date of manufacture.

Format:Bag.

Reagent Type:Cell Culture Medium.

Cell Type:HEK 293 cells.

Culture Type:Suspension Cell Culture.

Glucose:Yes.

Sodium Pyruvate Additive:Yes.

For Use With (Application):AAV Production.

Research Category:Cell and gene therapy.

pH:7.

Cell Line:Viral Production Cells 2.0                                                                                  Classification:Serum-free, animal origin-free, chemically defined, protein free.

Polyplus常见问题—病毒生产

Polyplus常见问题—病毒生产

我应该使用哪种试剂进行病毒包装?

jetPRIME®是一种科研级试剂,用于含血清培养基中生长的贴壁细胞中进行小规模病毒包装。常规用于病毒包装的细胞(例如HEK-293和衍生细胞系,CHO、VERO、WOP及BHK细胞)使用jetPRIME®可以达到高达90%的转染效率,因此能获得高病毒滴度。

PEIpro®是专门为大规模病毒包装开发的转染试剂。可用于含血清或无血清培养基中生长的贴壁细胞和悬浮细胞。PEIpro®可提供全面的质检文件,适用于临床病毒包装。

PEIpro®-HQ是 PEIpro®的高质量转染试剂,专门为临床批量包装病毒载体(如腺病毒,腺相关病毒(AAV)和慢病毒)而开发,还可用于蛋白生产。 PEIpro®-HQ提供相关质控检测和批文,使其可作为GMP生产工艺中合格的原料,用于生产临床治疗产品。

 

我可以使用PEIpro®生产哪种类型的病毒?

几年来,PEIpro®已被证明是从小规模到大规模生产几种病毒类型的金标准,特别是腺病毒,慢病毒,腺相关病毒(AAV)以及病毒样颗粒。

 

 PEIpro®是否适用于cGMP级病毒载体包装?

为满足使用PEIpro®生产,用于人体临床试验的重组病毒载体的所有质量要求,Polyplus公司近推出了更高质量的PEIpro®——PEIpro®-HQ,符合药典要求。 PEIpro®-HQ非常适合做GMP环境下生产病毒的原料。 PEIpro®-HQ是按照严格的生产工艺生产和配制的,此外还经过全面的特性鉴定和质量检测,以确保每个生产批次均符合有关特性、效力、纯度、可追溯性和安全性规范的预设指标。

PEIpro®PEIpro®-HQ病毒包装可以适用于哪些细胞?

 

根据病毒载体的类型来确定, 不同亚型的HEK-293细胞对不同病毒的偏好性不同, 例如HEK-293细胞适用于腺病毒和AAV病毒生产, HEK-293T和HEK-293FT细胞适用于AAV和慢病毒生产。PEIpro®PEIpro®-HQ适用于贴壁和悬浮HEK-293细胞的病毒包装

 

哪些培养基适用于PEIpro转染?

PEIpro®PEIpro®-HQ与各种含血清培养基和商业化的合成培养基兼容,用于贴壁和悬浮HEK-293细胞的病毒包装(表1)。 更多信息,请咨询我们的技术支持。

 

1:在不同HEK-293细胞培养基中使用PEIpro®的病毒产量。

使用PEIpro®进行大规模病毒包装时,可用哪些类型的培养容器?

 

不同的培养容器,包括HYPERFlasks™和HYPERstacks™(Corning)等多层培养瓶,或iCELLis®生物反应器(Pall)等固定化的培养系统,均可用于在贴壁HEK-293细胞中转染PEIpro®PEIpro®-HQ。如果在悬浮HEK-293细胞中进行病毒包装,则需要使用大型摇瓶或生物反应器。