Elabscience丙二醛(MDA)比色法测试盒(测细胞)(E-BC-K028-M)产品介绍

Elabscience丙二醛(MDA)比色法测试盒(测细胞)(E-BC-K028-M)产品介绍

Elabscience丙二醛(MDA)比色法测试盒(测细胞)适用于检测细胞样本中的丙二醛含量。

过氧化脂质降解产物中的丙二醛(MDA)在高温及酸性环境下可与硫代ba比妥酸(TBA)反应产生红棕色产物 3,5,5’-三甲基恶唑 2,4-er酮(三甲川),该物质在 532 nm 处有最大吸收峰。

试剂准备

① 检测前,试剂盒中的试剂平衡至室温。

② 试剂一2-8℃存放时会凝固,使用前37℃加热,直到透明液体方可使用。

③ 试剂三若有析出,需在80℃加热溶解,冷却后使用。

④ 试剂二应用液的配制:

按试剂二:双蒸水= 1.2:34的比例进行配制,2-8°C保存3个月。

⑤ 工作液的配制:

按试剂一:试剂二应用液:试剂三= 0.2:3:1的比例进行配制,现配现用。

实验关键点

① 水浴反应 40 min 时温度要控制在 95-100°C。

② 吸取上清液到酶标板时,防止产生气泡。

③ 试剂三中若有析出,需 80℃水浴加热溶解后使用。

操作步骤

① 空白管:取 0.1 mL 无水乙醇,加入到 1.5 mL EP 管中。

标准管:取 0.1 mL 10 nmol/mL 标准品,加入到对应的 1.5 mL EP 管中。

样本管:取 0.1 mL 待测样本,加入到 1.5 mL EP 管中。

② 向①中各管加入 1 mL 工作液。

③ EP 管口用保鲜膜扎紧,充分混匀,并在保鲜膜上扎一个小孔,100°C水浴 40 min。

④ 流水冷却至室温,1078×g 离心 10 min。

⑤ 用微量移液器取上清液 0.25 mL 到酶标板。(不能将沉淀加入酶标板中)。

⑥ 酶标仪上测定 532 nm 处的 OD 值。

注:如果不用保鲜膜,可先用注射器针头在 EP 管盖上扎一个小孔,防止水浴时,管盖崩开。

产品选购:

货号

产品名称

规格

E-BC-K028-M

丙二醛(MDA)比色法测试盒(测细胞)

48T(44 samples)

96T(92 samples)

 

碧云天脂质氧化MDA检测试剂盒(S0131S)产品介绍

上海金畔生物科技有限公司提供碧云天脂质氧化MDA检测试剂盒(S0131S)产品介绍 ,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
碧云天脂质氧化MDA检测试剂盒(S0131S)产品介绍

碧云天脂质氧化MDA检测试剂盒(S0131S) (Lipid Peroxidation MDA Assay Kit)采用MDA和TBA反应生成红色产物的显色反应,通过比色法定量检测血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中的MDA含量。该试剂盒广泛应用于脂质氧化水平的检测。

MDA是生物体脂质氧化的自然产物,在氧化应激时产生。脂质氧化导致脂肪酸逐渐分解为多种化合物,包括MDA。通过检测MDA水平,可以评估脂质氧化程度,因此MDA测定被广泛应用于脂质氧化的评估。虽然生物体内其他生化反应也会产生MDA,例如thromboxane synthase的催化作用,但通过适当的对照设置,可以准确观察脂质氧化水平的变化。

本试剂盒中采用了特殊的抗氧化剂,可以有效地抑制样品在检测过程中产生新的MDA,使检测更加准确。同时本检测试剂盒在检测过程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA,使对脂质氧化的测定更加准确。

本试剂盒可以检测低达1μM的MDA,也可检测高达200μM的MDA。血浆、血清样品中的MDA含量通常在约2-4μM,尿液中的MDA含量通常在约5-30μM,在本试剂盒的检测范围内,可以直接用本试剂盒检测血浆、血清、尿液样品等。

使用说明:

1. 样品的准备:

a. 血浆、血清或尿液样品制备后可以直接用于MDA测定。

b.对于组织,组织重量占匀浆液或裂解液的比例为10%;对于细胞,每100万细胞使用0.1ml裂解液或匀浆液。匀浆或裂解后,10,000g-12,000g离心10分钟取上清用于后续测定。对于一些特殊样品,离心不能获得澄清的上清溶液的,可以使用0.2微米孔径的过滤器过滤以获得澄清的样品溶液。匀浆或裂解等样品制备步骤宜在冰浴或4℃进行操作。

c. 对于组织或细胞样品,样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的MDA含量。

2. 试剂盒的准备工作:

TBA储存液的配制:称取适量TBA,用TBA配制液配制成浓度为0.37%的TBA储存液。例如18.5mg TBA用5ml TBA配制液配制,或者25mg TBA用6.76ml TBA配制液配制,最终浓度即为0.37%。TBA配制液需wan全溶解后再使用,可以加热到70℃以促进溶解。TBA储存液较难溶解,需加热到70℃,并通过剧烈Vortex以促进溶解。配制好的TBA储存液室温避光保存,至少3个月内有效。

标准品的稀释:取适量标准品用蒸馏水稀释至1、2、5、10、20、50μM,用于后续制作标准曲线。如果样品中MDA的浓度很高,可以增加100、150和200μM的标准品浓度。

3. 样品测定:

a. 在离心管或其它适当容器内加入0.1ml匀浆液、裂解液或PBS等适当溶液作为空白对照,加入0.1ml上述不同浓度标准品用于制作标准曲线,加入0.1ml样品用于测定;随后加入0.2ml MDA检测工作液。

b. 混匀后,100℃或沸水浴加热15分钟。加热时务必注意避免液体暴沸溅出。如果使用加热块(Heat block)进行加热注意用重物压紧离心管盖;如果使用沸水浴,则需使用可把盖子锁死的离心管或螺旋盖离心管,或用Parafilm封住离心管口,用针头刺一小孔。zui方便和准确的加热方法是使用带有热盖并可以加热0.5ml PCR管的PCR仪。
c. 水浴冷却至室温,1000g室温离心10分钟。取200微升上清加入到96孔板中,随后用酶标仪在532nm测定吸光度。如果不方便测定532nm的吸光度,也可以测定530-540nm之间的吸光度。可以设定450nm为参考波长进行双波长测定。
d. MDA含量的计算:对于血浆、血清或尿液等样品可以直接根据标准曲线计算获得MDA的摩尔浓度,对于细胞、或组织样品,计算出样品溶液中的MDA含量后,可以通过单位重量的蛋白含量或组织重量等来表示最初样品中的MDA含量,例如μmol/mg蛋白或μmol/mg组织。

产品选购:

货号

产品名称

规格

S0131S

脂质氧化(MDA)检测试剂盒

100

MDA-MB-231细胞

上海金畔生物科技有限公司提供MDA-MB-231细胞 ,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
MDA-MB-231细胞

详情介绍

MDA-MB-231细胞代理——上海金畔生物科技有限公司,提供AcceGen细胞,如原代细胞、肿瘤细胞系、干细胞等,更多AcceGen细胞,欢迎咨询!

MDA-MB-231细胞产品属性:

产品名称: MDA-MB-231细胞

产品规格:1 vial

物种:人

生物安全等级:一级

运输信息:干冰

储存:液氨

产品描述:物种:人类,高加索女性,51岁;组织:乳房;肿瘤:腺癌;源自:胸腔积液。

源器官: 乳房

推荐培养基和补充剂:L-15 Medium + 10% FBS

产品应用:仅用于科研

生长条件:37°C,5% CO2

MDA-MB-231细胞代理——上海金畔生物科技有限公司,成立于2017年,由经验丰富的技术团队、商业团队及管理团队组建而成,专注于免疫学、细胞生物学、分子生物学等领域核心试剂产品的研发、生产与销售基于“客户第一”的核心理念,上海金畔在产品自主研发的同时,也与全球多家生命科学试剂供应商建立良好的合作关系,向全球10,000+客户提供200,000+优质产品。上海金畔将以品质树立品牌,以服务赢得口碑,致力于成长为重要的生物化学试剂开发与成果转化的kai tuo zhe,并成为行业ling xian的优质品供应商。