细胞培养基的理化性质有什么?

细胞培养基的理化性质有什么?

动物细胞在细胞培养基中不仅能存活,还要分裂增殖,合适的渗透压、pH值等理化性质是细胞培养基必须具备的前提条件。那么细胞培养基的理化性质有什么呢?让我们一起来看看吧!

一、pH

动物细胞大多数需要轻微的碱性条件,适宜pH在7.2~7.4之间。细胞培养基的pH值通常需经校正的pH计来测定。在细胞生长过程中,随细胞数量的增多和代谢活动的加强,二氧化碳不断被释放,培养液变酸,pH值发生变化。酚红是细胞培养基中常用的pH指示剂,但依靠细胞培养基中的酚红等pH指示剂进行判断,需要实验员的经验积累,存在较大的主观性。实际上,个性化细胞培养基或是无血清细胞培养基中酚红含量较少或是不含酚红,只能通过pH计或者pH电极进行pH值的检测,结果更为准确可靠。

二、缓冲能力

 细胞培养基应具有一定的缓冲能力。细胞培养过程中造成细胞培养液 pH 波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2。在封闭式培养过程中CO2与水结合产生碳酸,细胞培养液pH 很快下降;打开培养器具时CO2逸出则会引起pH升高。细胞培养基通常采用NaHCO3-CO2缓冲系统,按下列化学反应方程式调节细胞培养基的pH值:

H2O + CO2 → H2CO3 ⇌ H+ + HCO3-

NaHCO3 ⇌ Na+ + HCO3-

三、渗透压

细胞必须生活在等渗的环境中,大多数体外培养的细胞对渗透压有一定耐受性。研究显示,对于大多数哺乳类动物细胞,渗透压在260~320 mOsm/kg的范围内都适宜。在生产、配制细胞培养基的过程中,渗透压的测定较为重要,有助于防止在生产、配制过程中出现称量等方面的错误。反应器高密度培养动物细胞过程,在添加碳酸氢钠的过程中注意渗透压的监控,防止渗透压过高对细胞的损害。

四、温度

温度对细胞培养基有较大的影响,温度过高可引起营养成份的降解或破坏,细胞培养基的pH、离子强度和电解常数pKa也可能受到影响。如细胞培养液中的谷氨酰胺,在高温条件下降解的速度较快,如35 ℃贮存时,放置3天降解25 %左右,在4 ℃贮存3周降解约20%。

五、粘滞性及表面张力

含血清细胞培养液的粘滞性主要是由血清引起的,在转瓶培养贴壁细胞时,培养液的粘滞性对细胞生长没有多大影响;但在生物反应器悬浮培养细胞时,细胞培养液的粘滞性则直接影响搅拌转速控制及搅拌剪切力对细胞造成的损伤程度。

表面张力对细胞培养有较大的作用,尤其在利用生物反应器进行悬浮培养时,搅拌和通气都会引起泡沫的产生。对于含血清培养液,由于血清中多种蛋白的存在,搅拌时产生的气泡较多,气泡的上升运动对细胞的损伤程度还有争议,但气泡的破裂对细胞有明显的损伤作用。为降低这种损伤,可通过在细胞培养基中添加一些保护剂,降低细胞-气体和细胞-液体的表面张力,减少气泡的形成。

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赛默飞Tris-17926理化性质和应用

赛默飞Tris-17926理化性质和应用

1、产品介绍:(物化性质)

三羟甲基氨基甲烷是一种有机物,化学式为C4H11NO3,分子量121.135白色结晶颗粒。可作为生物缓冲剂;用于凝胶电泳配置缓冲液。作为碱性药物,用于酸中毒的纠正

其中文名是三羟甲基氨基甲烷,英文名是Tris(hydroxymethyl)methyl aminomethane THAM;别名是氨丁三醇。

2、产品应用(配方原理/应用)

其缓冲液的一般配方0.5 M/pH7.6

Tris(三羟甲基氨基甲烷)

60.57g

1N HCl

420ml

双蒸水

1000ml

大致步骤为:

先以少量双蒸水(300~500ml)溶解Tris,后加入HCl,用HCl1N)或NaOH1N)将pH调至7.6,最后双蒸水加至1000ml。此液为储备液,4℃冰箱中保存。

注意:Tris-HClPH值随温度的变化而变化,所以应等到室温时再测,这样测出来的结果比较可靠。

产品主要用途

Tris因其缓冲特性,被广泛用作核酸和蛋白质的缓冲溶剂;此外,还有许多重要用途,例如Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。

3、Thermo Scientific作为科学服务领域的世界较优产品之一。其多种产品可帮助客户加速生命科学领域的研究以及解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战。

其中Thermo Scientific Pierce Tris17926是一种用于制备多种分子生物学缓冲液的标准试剂其以高纯度和较为广泛的PH范围被广泛使用。