UDP糖|嗜性聚集杆菌的n -糖基转移酶通过放松的核苷酸激活糖供体选择性合成糖肽

N-糖基转移酶(N-(X≠P)- t /S)是一种与己糖单糖一致序列(N-(X≠P)- t /S)中的糖基化多肽的特殊途径的糖基化转化酶。


在此,我们表达并鉴定了一种来自嗜性聚集杆菌(Aggregatibacter aphrophilus)的新型n -糖基转移酶(命名为AaNGT)。


采用反相高效液相色谱法和质谱法对AaNGT生成的糖肽进行定量分析,并确定其底物特异性。


AaNGT可以利用多种核苷酸激活的糖供体,包括UDP-Glc、UDP-Gal、UDP-Xyl、GDP-Glc、dGDP-Glc和UDP-GlcN,对被测肽进行糖基化。


据我们所知,AaNGT是第一种能够将GlcN部分转移到天冬酰胺残基上的天然糖基转移酶。


与胸膜肺炎放线菌(ApNGT)的NGT相比,AaNGT也表现出不同的底物多肽的位置特异性偏好。


对不同合成肽的体外分析表明,与ApNGT相比,AaNGT更喜欢不同的肽底物。


利用AaNGT对天然短肽进行有效的糖基化修饰,显示出修饰哺乳动物重要的治疗性n -糖蛋白的潜力。

UDP糖|嗜性聚集杆菌的n -糖基转移酶通过放松的核苷酸激活糖供体选择性合成糖肽

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UDP糖|嗜性聚集杆菌的n -糖基转移酶通过放松的核苷酸激活糖供体选择性合成糖肽

上海金畔生物科技有限公司是国内光电材料,纳米材料,聚合物;化学试剂供应商;专业于科研试剂的研发生产销售。供应有机发光材料(聚集诱导发光材料)和发光探针(磷脂探针和酶探针)、碳量子点、金属纳米簇;嵌段共聚物等一系列产品。

UDP糖|嗜性聚集杆菌的n -糖基转移酶通过放松的核苷酸激活糖供体选择性合成糖肽

N-糖基转移酶(N-(X≠P)- t /S)是一种与己糖单糖一致序列(N-(X≠P)- t /S)中的糖基化多肽的特殊途径的糖基化转化酶。


在此,我们表达并鉴定了一种来自嗜性聚集杆菌(Aggregatibacter aphrophilus)的新型n -糖基转移酶(命名为AaNGT)。


采用反相高效液相色谱法和质谱法对AaNGT生成的糖肽进行定量分析,并确定其底物特异性。


AaNGT可以利用多种核苷酸激活的糖供体,包括UDP-Glc、UDP-Gal、UDP-Xyl、GDP-Glc、dGDP-Glc和UDP-GlcN,对被测肽进行糖基化。


据我们所知,AaNGT是第一种能够将GlcN部分转移到天冬酰胺残基上的天然糖基转移酶。


与胸膜肺炎放线菌(ApNGT)的NGT相比,AaNGT也表现出不同的底物多肽的位置特异性偏好。


对不同合成肽的体外分析表明,与ApNGT相比,AaNGT更喜欢不同的肽底物。


利用AaNGT对天然短肽进行有效的糖基化修饰,显示出修饰哺乳动物重要的治疗性n -糖蛋白的潜力。

UDP糖|嗜性聚集杆菌的n -糖基转移酶通过放松的核苷酸激活糖供体选择性合成糖肽

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UDP糖|嗜性聚集杆菌的n -糖基转移酶通过放松的核苷酸激活糖供体选择性合成糖肽

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UDP糖|拟南芥中一种新的udp -糖基转移酶91C1通过解毒反应产生特异性的除草剂抗性

植物可以减少或消除除草剂造成的危害,获得除草剂抗性,这是现阶段发展抗除草剂作物的重要理论依据。


因此,发现新的抗除草剂基因,培育多种抗除草剂作物具有重要的价值。植物界普遍存在的糖基转移酶通过修饰受体分子来改变其物理特性和生物活性,在抗除草剂育种中具有重要的应用潜力。


在此,我们从拟南芥中鉴定了一种新型除草剂诱导的udp -糖基转移酶91C1 (UGT91C1),并证明了其对世界上广泛使用的三酮类除草剂sulcotrione的糖基化活性。


过表达UGT91C1基因增强了拟南芥对磺三酮的耐受性。而ugt91c1突变体在sulcotrione存在下表现出严重的破坏,叶绿素含量降低,提示ugt91c1在除草剂糖基化解毒过程中发挥重要作用。


此外,UGT91C1还可以通过降低磺三酮的毒性来影响酪氨酸的代谢。总之,我们对糖基转移酶UGT91C1的鉴定,作为一个潜在的通过糖基化实现除草剂解毒的基因,可能为作物抗除草剂育种和环境植物修复开辟新的可能性。

UDP糖|拟南芥中一种新的udp -糖基转移酶91C1通过解毒反应产生特异性的除草剂抗性

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UDP糖|拟南芥中一种新的udp -糖基转移酶91C1通过解毒反应产生特异性的除草剂抗性

植物可以减少或消除除草剂造成的危害,获得除草剂抗性,这是现阶段发展抗除草剂作物的重要理论依据。


因此,发现新的抗除草剂基因,培育多种抗除草剂作物具有重要的价值。植物界普遍存在的糖基转移酶通过修饰受体分子来改变其物理特性和生物活性,在抗除草剂育种中具有重要的应用潜力。


在此,我们从拟南芥中鉴定了一种新型除草剂诱导的udp -糖基转移酶91C1 (UGT91C1),并证明了其对世界上广泛使用的三酮类除草剂sulcotrione的糖基化活性。


过表达UGT91C1基因增强了拟南芥对磺三酮的耐受性。而ugt91c1突变体在sulcotrione存在下表现出严重的破坏,叶绿素含量降低,提示ugt91c1在除草剂糖基化解毒过程中发挥重要作用。


此外,UGT91C1还可以通过降低磺三酮的毒性来影响酪氨酸的代谢。总之,我们对糖基转移酶UGT91C1的鉴定,作为一个潜在的通过糖基化实现除草剂解毒的基因,可能为作物抗除草剂育种和环境植物修复开辟新的可能性。

UDP糖|拟南芥中一种新的udp -糖基转移酶91C1通过解毒反应产生特异性的除草剂抗性

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CellScript 2-O-甲基转移酶试剂盒代理商

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CellScript 2-O-甲基转移酶试剂盒代理

详情介绍

CellScript 2-O-甲基转移酶试剂盒代理——上海金畔生物科技有限公司,提供CellScript产品,如T7转录试剂盒、mRNA合成试剂盒、加帽试剂盒等,更多CellScript品牌产品,欢迎选购!

CellScript公司介绍:

CELLSCRIPT的使命旨在为临床研究和治疗提供制造和使用RNA在细胞中翻译的最佳产品和技术。

目前的产品包括用于体外转录的试剂盒、使用帽类似物或帽酶的5'RNA帽盖和3'RNA多腺苷酸化,以及用于制造用于在细

胞中翻译的带帽多(a)尾mRNA的一体式试剂盒。

CELLSCRIPT引入INCOGNITO™ RNA转录试剂盒,用于体外合成含有修饰核苷的RNA,如假尿苷(Ψ)和/或5-甲基胞苷

(m5C)代替相应的U或C规范核苷(图1)。这些试剂盒之所以如此命名,是因为被封端的、聚腺苷酸化的和核苷修饰的

RNA产物(称为“INCOGNITO mRNA”)被wei装,因此当它们被转染到表达各种RNA传感器的哺乳动物细胞中时,它们

不会像相应的未修饰的mRNA那样诱导先天免疫反应。

CellScript 2-O-甲基转移酶试剂盒介绍:

ScriptCap™ 2'-O-甲基转移酶试剂盒从任何来源的帽状物0-RNA制备帽状物1-RNA。在某种程度上,帽1甲基化可以提高

信使核糖核酸的翻译效率。1 ScriptCap™ 2'-O-甲基转移酶将甲基从供体分子S-腺苷甲liu氨酸(SAM)转移到帽0 RNA倒

数第二个核苷酸的2'-O位置(m7G[5']ppp[5']NpN…),以合成具有帽1结构的RNA(m7GPpp[m2'-O]NpNpN..)™ 

m7G帽盖系统或在二核苷酸帽盖类似物存在下通过DNA模板的体外转录(例如,m2 7,3'-OGPpG;例如,使用

MessageMAX™ T7 ARCA封端的消息转录试剂盒)。Cap 1 RNA也可以在含有ScriptCap m7 G封端系统和

ScriptCap 2'-O-甲基转移酶加SAM的单一反应混合物中由未封端的RNA合成。

一个ScriptCap 2'-O-甲基转移酶试剂盒反应使60μg 5'-Cap 0封端的RNA甲基化。

更多有关CellScript 2-O-甲基转移酶试剂盒的介绍,请联系CellScript 2-O-甲基转移酶试剂盒代理——上海金畔生物科技有限公司:

EcoRI 甲基转移酶 货 号 #M0211S NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

EcoRI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧腺嘌呤残基(N6)进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从 E. coli RY 13(R.N. Yoshimori)克隆 EcoRI 修饰基因。 

反应条件

1X EcoRI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl,50 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),10 mM EDTA]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温
育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 EcoRI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

40,000 units/ml。 

注意事项

MgCl2 抑制 EcoRI 甲基转移酶活性。在存在 4 mM MgCl2 条件下,酶活只保留 50%。 

HpaII 甲基转移酶 货 号 #M0214S NEB酶试剂 New England Biolabs

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HpaII 甲基转移酶                  货   号                  #M0214S

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述

HpaII 甲基转移酶与 MspI 甲基转移酶识别序列相同,但对左侧序列中的内侧胞嘧啶(C5)进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从副流感嗜血杆菌(Haemophilus parainfluenzae)(ATCC 49669)克隆的 HpaII 修饰基因。 

反应条件

1X HpaII 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HpaII 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml。 

MspI 甲基转移酶 货 号 #M0215S NEB酶试剂 New England Biolabs

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MspI 甲基转移酶                  货   号                  #M0215S

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述

MspI 甲基转移酶与 HpaII 甲基转移酶识别序列相同,但对左侧识别序列外侧胞嘧啶(C5)进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从莫拉氏菌属(Moraxella species)(ATCC 49670)克隆的 MspI 修饰基因。 

反应条件

1X MspI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[100 mM NaCl,50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MspI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217S NEB酶试剂 New England Biolabs

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  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述

HhaI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基(C5)进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从溶血嗜血杆菌(Haemophilus haemolyticus) (ATCC 10014)克隆的 HhaI 修饰基因。 

反应条件

1X HhaI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HhaI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

25,000 units/ml。 

TaqI 甲基转移酶 货 号 #M0219S NEB酶试剂 New England Biolabs

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TaqI 甲基转移酶                  货   号                  #M0219S

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述

Taq I 甲基转移酶对左侧序列中的腺嘌呤残基(N6)进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从水栖高温菌(Thermus aquatics)克隆的 Taq I 修饰基因。 

反应条件

1X CutSmart Buffer + SAM
[50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,100 μg/ml BSA(pH 7.9 @ 25℃)]。加入 80 μM SAM(随酶提供),65℃ 温育。 

注意事项

37℃ 条件下的活性为 25%。 

单位定义

1 单位指在 20 μl 反应体系中,65℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 Taq I 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

AluI 甲基转移酶 货 号 #M0220S NEB酶试剂 New England Biolabs

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AluI 甲基转移酶                 货   号                  #M0220S AluI 甲基转移酶                 货   号                  #M0220S AluI 甲基转移酶                 货   号                  #M0220S AluI 甲基转移酶                 货   号                  #M0220S AluI 甲基转移酶                 货   号                  #M0220S

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100 units
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AluI 甲基转移酶                 货   号                  #M0220S

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述

AluI 甲基转移酶能对左侧序列中的胞嘧啶残基(C5)进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)(ATCC 21606)克隆的 AluI 修饰基因。 

反应条件

1X AluI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 AluI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

dam 甲基转移酶 货 号 #M0222L NEB酶试剂 New England Biolabs

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dam 甲基转移酶                              收藏

dam 甲基转移酶                货   号                  #M0222L dam 甲基转移酶                货   号                  #M0222L dam 甲基转移酶                货   号                  #M0222L dam 甲基转移酶                货   号                  #M0222L

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dam 甲基转移酶                货   号                  #M0222L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
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概述

dam 甲基转移酶能对左侧序列中的腺嘌呤残基(N6)进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有 pTP166 载体,该载体含有从 E. coli(M. Marinus)克隆的 dam 修饰基因。 

反应条件

1X dam 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,5mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MboI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

8,000 units/ml。 

BamHI 甲基转移酶 货 号 #M0223L NEB酶试剂 New England Biolabs

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BamHI 甲基转移酶                              收藏

BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L

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#M0223L
500 units
3,309.00

#M0223S
100 units
869.00

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识别位点

BamHI 甲基转移酶                 货   号                  #M0223L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述

BamHI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基(N4)进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从解淀粉芽孢杆菌 H(Bacillus amyloliquefaciens)(ATCC 49763)克隆的 BamHI 修饰基因。 

反应条件

1X BamHI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM EDTA,5 mM DTT]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BamHI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml。 

HaeIII 甲基转移酶 货 号 #M0224S NEB酶试剂 New England Biolabs

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HaeIII 甲基转移酶                              收藏

HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S

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广州库存
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#M0224S
500 units
869.00

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HaeIII 甲基转移酶                 货   号                  #M0224S

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述

HaeIII 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基(C5)进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从埃及嗜血杆菌(Haemophilus aegyptius)(ATCC 11116)克隆的 HaeIII 修饰基因。 

反应条件

1X HaeIII 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl,50 mM Tris-HCl(pH 8.5 @ 25℃),10 mM DTT]。加入 80 μM SAM(随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HaeIII 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

注意事项

HaeIII 甲基转移酶能保护 DNA 不被 NotI切割。 

CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L NEB酶试剂 New England Biolabs

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CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                              收藏

CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L

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#M0226L
500 units
3,409.00

#M0226M
(高浓度5X)500 units
3,409.00

#M0226S
100 units
849.00

#M0226V
50 units
449.00

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识别位点

CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                货   号                  #M0226L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

特性

 阻止限制性内切酶的切割
 CpG 甲基化依赖性基因表达的研究
 研究探针序列特异性与 DNA 大沟的相互作用
 改变 DNA 的物理特性
 对 DNA 统一进行 [3H] 标记
 减少限制性内切酶的酶切位点数目,提高限制性内切酶的特异性 

概述

CpG 甲基转移酶(M.SssI)能将双链二核苷酸识别序列 5´ …CG…3´ 中所有胞嘧啶残基(C5)甲基化。 

来源

分离自重组的 E. coli 菌株,该菌株克隆有桑皱褶螺原体(Spiroplasma sp.)MQ1 菌株的 CpG 甲基转移酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 2 + SAM
[50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸(SAM,随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

注意

MgCl2 并不是必需的辅因子。Mg2+ 存在时,M.SssI 更倾向于分散甲基化,而不是连续甲基化,同时,会出现具有拓扑异构酶的活性。 

质保声明

CpG 甲基转移酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 个酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BstUI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度

4,000 units/ml 和 20,000 units/ml(通过 λDNA检测)。 

注意事项

CpG 甲基转移酶(M.SssI)可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式,因而可用于研究高等真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同,CpG 甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的 DNA 底物的甲基化效率相同,因此该酶是更为有效的 DNA 修饰工具。
只要限制性内切酶的识别位点含有 CG 序列或此二核苷酸的重叠序列,CpG 甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是,CpG 甲基转移酶使 DNA 甲基化,而 E. coli 中的 Mcr 和 Mrr 的限制作用不受甲基化影响(详见 315-317 页),故应使用 Mcr、MrrE. coli 菌株(例如,NEB #C2925)作为转化的宿主菌。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) 货 号 #M0227L NEB酶试剂 New England Biolabs

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GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)                              收藏

GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)                货   号                  #M0227L GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)                货   号                  #M0227L GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)                货   号                  #M0227L GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)                货   号                  #M0227L

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#M0227L
1,000 units
3,539.00

#M0227S
200 units
879.00

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GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)                货   号                  #M0227L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

特性

 阻止限制性内切酶的切割
 改变 DNA 的物理特性
 对 DNA 统一进行 [3H] 标记 

GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)                货   号                  #M0227L

概述

GpC 甲基转移酶(M.CviPI)能将双链二核苷酸识别序列 5´ …GC…3´ 中所有胞嘧啶残基(C5)甲基化。 

来源

分离自重组的 E. coli 菌株,该菌株表达小球藻病毒(Chlorella virus)的甲基转移酶,该酶与麦芽糖结合蛋白(MBP)组成融合蛋白。 

反应条件

1X GC 反应缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl,50 mM Tris-HCl,10 mM DTT(pH 8.5 @ 25℃)]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸(SAM,随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。 

注意

MgCl2 并不是必需的辅因子。 

质保声明

GpC 甲基转移酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请联系我们。  

单位定义

1 酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HaeIII 限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml,通过 λDNA 检测。 

注意事项

胞嘧啶残基被甲基化后,可影响 DNA 的物理特性,如:降低 Z-DNA 形成的自由能,增加 DNA 的螺旋程度,改变 DNA 十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联氨的反应性降低,5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1) 货 号 #M0230L NEB酶试剂 New England Biolabs

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人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                              收藏

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L

货 号
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#M0230L
250 units
5,499.00

#M0230S
50 units
1,379.00

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识别位点

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

停产通知

 停产通知:该产品于2021年12月15日停产。

概述

Dnmt1 在半甲基化 DNA 的 5´…CG…3´ 位点甲基化胞嘧啶残基。现认为哺乳动物 Dnmt1 与癌症发生、胚胎发育和几种其它生物功能有关。在细胞循环 S 期的 DNA 复制阶段发生大量的甲基化。 

来源

用杆状病毒表达系统表达人 Dnmt1 cDNA。 

反应条件

1X Dnmt1 反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.8), 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 5% 甘油],加入 100 μg/ml BSA 和 160 μM SAM, 37℃温育。热失活:65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X Dnmt1 反应缓冲液
100X BSA
32 mM S-腺苷甲硫氨酸(SAM)

质保声明

未检测到核酸内切酶、外切酶污染。 

单位定义

1 单位指在 25 μl 反应体系中,37℃ 条件下 30 分钟催化 1 pmol 的甲基基团转移到多聚 dI.dC 底物上所需要的酶量。 

浓度

2,000 units/ml 

注意事项

议选用 M.Sssl(NEB #M0226)修饰和保护DNA,因该酶能同时有效地对未甲基化和半甲基化的底物 DNA 进行甲基化。 

参考文献

有关该产品性质和应用的参考文献请联系我们。  

EcoGII 甲基转移酶 货 号 #M0603S NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 甲基转移酶

EcoGII 甲基转移酶                              收藏

EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S EcoGII 甲基转移酶                  货   号                  #M0603S

货 号
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#M0603S
200 units
939.00

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  • compatible ends     | 
  • single letter code

概述:

 EcoGII 甲基转移酶是非特异甲基转移酶,能对序列中任意腺嘌呤残基(N6)进行甲基化修饰。

来源:

 重组 E. coli 菌株,该载体含有从 E. coliC227-11 克隆的 EcoGII 修饰基因。

反应条件:

 1X CutSmart 缓冲液 + SAM [50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,100 μg/ml BSA(pH 7.9 @ 25℃)],加入 160 μMSAM(随酶提供),37℃ 温育。

热失活:65℃ 加热 10 分钟。

单位定义:

 1 单位指在 20 μl 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟能保护 100 ng FAM 标记 dsDNA 不被MboI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度:

 5,000 units/ml

注意事项:

 SAM 在 37℃(pH 7.5)条件下不稳定,温育超过 4 个小时需要补充新的 SAM。甲基化反应中,SAM 以 1:200 的比例稀释到终浓度为 160μM。EcoGII 甲基转移酶对盐敏感。确保 DNA 溶液的盐浓度很低或者确保总反应体系中 DNA 溶液仅占很低的比例。

mRNA 帽结构 2′-O-甲基转移酶 货 号 #M0366S NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

mRNA 帽结构 2′-O-甲基转移酶                              收藏

mRNA 帽结构 2 mRNA 帽结构 2

货 号
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#M0366S
2,000 units
669.00

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  • compatible ends     | 
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特性

 提高 RNA 的翻译效率
 改善 mRNA 在显微注射和转染后的表达 

概述

该酶能在 RNA 5´ 末端紧邻帽结构的第一个核苷酸的 2´ -O 上添加甲基基团。利用 S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体,使带帽 Cap O 甲基化为 Cap 1。 

来源

纯化自携带牛痘病毒 mRNA 帽结构 2´ –O-甲基转移酶基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X 加帽缓冲液
[50 mM Tris-HCl,5 mM KCl,1 mM DTT,1 mM MgCl2,(pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。 

单位定义

1 单位是指在 37℃ 的条件下,1 小时内将 10 pmol 80 nt 的带帽 RNA 转录子甲基化所需酶量。 

浓度

50,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品性能和应用的相关文献请联系我们。  

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1) 货 号 #M0230L NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 表观遗传学 – 组蛋白/DNA 甲基转移酶

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                              收藏

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L 人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#M0230L
250 units
5,499.00

#M0230S
50 units
1,379.00

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  • single letter code

停产通知

 停产通知:该产品于2021年12月15日停产。

识别位点

人 DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶(Dnmt1)                  货   号                  #M0230L

概述

Dnmt1 在半甲基化 DNA 的 5´…CG…3´ 位点甲基化胞嘧啶残基。现认为哺乳动物 Dnmt1 与癌症发生、胚胎发育和几种其它生物功能有关。在细胞循环 S 期的 DNA 复制阶段发生大量的甲基化。

来源

用杆状病毒表达系统表达人 Dnmt1 cDNA。

反应条件

1X Dnmt1 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.8), 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 5%甘油],加入 100 μg/ml BSA 和 160 μM SAM, 37℃温育。
热失活:65℃ 20 分钟。

随酶提供的试剂

10X Dnmt1 反应缓冲液
100X BSA
32 mM S-腺苷甲硫氨酸(SAM)

质保声明

未检测到核酸内切酶、外切酶污染。

单位定义

1 单位指在 25 μl 反应体系中,37℃ 条件下 30 分钟催化 1 pmol 的甲基基团转移到多聚dI.dC 底物上所需要的酶量。

浓度

2,000 units/ml

注意事项

建议选用 M.Sssl(NEB #M0226)修饰和保护DNA,因该酶能同时有效地对未甲基化和半甲基化的底物    DNA 进行甲基化。

参考文献

有关该产品性质和应用的参考文献请联系我们。