Elabscience MS-小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒怎么用

Elabscience MS-小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中IL-10浓度。MS为Mini Sample的缩写。MS系列试剂盒的上样量仅为传统夹心法ELISA试剂盒的1/4，能有效解决实验样本体积不够的问题。Elabscience®自主开发的新技术，旨在帮助您以更高效的方式进行科学研究。那么你知道Elabscience MS-小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒该怎么用吗？让我们一起来看看吧！

使用方法：

1. 分别设定标准孔、空白孔和样本孔。标准孔加入25 μL倍比稀释的标准品， 空白孔加入25 μL 标准品&样本稀释液，其余孔加入25 μL待测样本(建议所有的待检样本和标准品在检测中设立复孔；建议通过预实验或咨询技术支持确定待检样本的稀释倍数)。给酶标板覆膜，37℃孵育90分钟。

提示：加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，避免产生气泡。加样时间宜控制在10分钟内。

2. 甩尽孔内液体，不用洗涤。每个孔中加入生物素化抗体工作液50 μL，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。

3. 甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干。每孔加洗涤液350 μL，浸泡1分钟，吸去或甩掉酶标板内的液体，拍干。重复此洗板步骤 3 次。

提示：此处与其他洗板步骤都可使用洗板机。洗板完成后请立即进行下步操作，不要让微孔板干燥。

4. 每孔加HRP 酶结合物工作液50 μL，酶标板加上覆膜，37℃温育30分钟。

5. 甩尽孔内液体，洗板5次，方法同步骤 3。

6. 每孔加底物溶液(TMB) 50 μL，酶标板加上覆膜，37℃避光孵育15分钟左右。提示：根据实际显色情况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时(前4个显色孔出现明显蓝色梯度)，即可终止。提前15分钟打开酶标仪预热。

7. 每孔加终止液25 μL，终止反应。

提示：终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。

8. 立即用酶标仪在450 nm 波长测量各孔的光密度(OD 值)。

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Elabscience MS-小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒的原理与注意事项有哪些？

Elabscience MS-小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中IL-10浓度。MS为Mini Sample的缩写。MS系列试剂盒的上样量仅为传统夹心法ELISA试剂盒的1/4，能有效解决实验样本体积不够的问题。Elabscience®自主开发的新技术，旨在帮助您以更高效的方式进行科学研究。那么你知道Elabscience MS-小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒的原理与注意事项有哪些吗？让我们一起来看看吧！

一、检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IL-10抗体包被于酶标板上， 实验时样品（或标准品）中的小鼠IL-10会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗小鼠IL-10抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗小鼠IL-10抗体与结合在包被抗体上的小鼠IL-10结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD 值，IL-10浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中IL-10的浓度。

二、注意事项

1. 试剂盒注意事项

1) 本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断。

2) 试验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时，请按国家生物试验室安全防护条例执行。

3) 检测使用的酶标仪需要安装能检测450±2 nm波长的滤光片，光密度范围在0-3.5之间。建议使用时提前15分钟预热。

2. 样品注意事项

1) 收集血液的试管应为一次性无内毒素试管。避免使用溶血，高血脂样品。

2) 样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃(3个月内检测)，避免反复冻融。在检测前，冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。室温混匀后使用。

3) 试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围。如果样品中待测物浓度过高或过低，请对样本做适当的稀释或浓缩。

4) 若所检样本不在说明书所列样本之中，建议做预实验验证其检测有效性。

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