CellScript mRNA加帽加尾试剂盒代理商

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CellScript mRNA加帽加尾试剂盒代理

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CellScript mRNA加帽加尾试剂盒代理——上海金畔生物科技有限公司,提供CellScript产品,如加帽试剂盒、T7转录试剂盒、加尾试剂盒等,更多CellScript品牌产品,欢迎选购!

CellScript公司介绍:

CellScript的使命旨在为临床研究和治疗提供制造和使用RNA在细胞中翻译的最佳产品和技术。

目前的产品包括用于体外转录的试剂盒、使用帽类似物或帽酶的5'RNA帽盖和3'RNA多腺苷酸化,以及用于制造用于在细

胞中翻译的带帽多(a)尾mRNA的一体式试剂盒。

CellScript 引入INCOGNITO™ RNA转录试剂盒,用于体外合成含有修饰核苷的RNA,如假尿苷(Ψ)和/或5-甲基胞

苷(m5C)代替相应的U或C规范核苷(图1)。这些试剂盒之所以如此命名,是因为被封端的、聚腺苷酸化的和核苷修饰

的RNA产物(称为“INCOGNITO mRNA”)被wei装,因此当它们被转染到表达各种RNA传感器的哺乳动物细胞中时,它

们不会像相应的未修饰的mRNA那样诱导先天免疫反应。

CellScript mRNA加帽加尾试剂盒介绍:

T7 mScript™ 标准信使核糖核酸生产系统提供所有酶和酶相关试剂,用于生产5'-封端的3'-聚腺苷酸信使核糖核酸。该mScript试剂盒包括用于:

(i)使用mScript T7酶溶液、标准核苷酸ATP、CTP、GTP和UTP体外转录线性双链DNA模板的模块,

(ii)使用ScriptCap酶法封端RNA的模块™ 帽盖酶系统(用于制造具有Cap 0帽盖结构的mRNA),

(iii)ScriptCap™ 2'-O-甲基转移酶(用于任选地制备具有Cap 1帽结构的mRNA)和(iv)a-Plus™ Poly(A)聚合酶,用于添加3'-Poly(A)尾部。在大多数真核细胞系中,转染后,带帽和带尾的信使核糖核酸提高了稳定性和翻译效率。mScript系统改进了现有的封端方法,确保了几乎100%的转录物封端,所有的封端都处于正确的方向,并且能够以合理的成本产生大量的封端RNA。这种信使核糖核酸适用于转染和微注射实验以及体外翻译系统。

更多CellScript mRNA加帽加尾试剂盒的介绍,请联系CellScript mRNA加帽加尾试剂盒代理——上海金畔生物科技有限公司:

CellScript T7 ARCA加帽试剂盒代理商

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CellScript公司介绍:

CELLSCRIPT的使命旨在为临床研究和治疗提供制造和使用RNA在细胞中翻译的最佳产品和技术。

目前的产品包括用于体外转录的试剂盒、使用帽类似物或帽酶的5'RNA帽盖和3'RNA多腺苷酸化,以及用于制造用于在细胞

中翻译的带帽多(a)尾mRNA的一体式试剂盒。

CELLSCRIPT引入INCOGNITO™ RNA转录试剂盒,用于体外合成含有修饰核苷的RNA,如假尿苷(Ψ)和/或5-甲基胞苷

(m5C)代替相应的U或C规范核苷(图1)。这些试剂盒之所以如此命名,是因为被封端的、聚腺苷酸化的和核苷修饰的

RNA产物(称为“INCOGNITO mRNA”)被wei装,因此当它们被转染到表达各种RNA传感器的哺乳动物细胞中时,它们

不会像相应的未修饰的mRNA那样诱导先天免疫反应。

CellScript T7 ARCA加帽试剂盒介绍

MessageMAX™ T7 ARCA封端信息转录试剂盒通过使用T7 RNA聚合酶和抗反向封端类似物(ARCA)m2 7,3'-OG[5']ppp[5]的体外转录产生封端RNA。30分钟,20μl MessageMAX反应从1μg 1.4kb标准T7对照模板DNA中产生高达60μg ARCA封端的RNA。由于ARCA在m7G核苷酸上含有3'-O-甲基(图1),因此在体外转录/封端反应过程中,ARCA只能以正确的方向掺入RNA的5'端。1-3标准帽类似物(m7G[5']ppp[5']G)并非如此。因此,ARCA掺入导致帽状RNA的合成,其在体内比标准帽状类似物更有效地翻译。ARCA/NTP PreMix包含所有四种核糖核苷酸和ARCA。PreMix确保了每个NTP的最佳浓度和ARCA与GTP的比例(4:1),最大限度地提高了转录封端(~80%)和产量。由于GTP在反应中的浓度是有限的,ARCA优先作为转录物的第一个或5’-末端G结合。CELLSCRIPT还提供INCOGNITO™ T7 ARCA 5mC-&-RNA转录试剂盒,用于生产含5-甲基胞嘧啶-假尿苷的(GA m5C)ARCA封端的RNA。这种RNA已在Warren等人的里程碑式出版物中使用。(2010),成功地将多种人类细胞类型重新编程为诱导多能干细胞。4研究表明,与相应的未修饰信使核糖核酸相比,-mRNA和5mCmRNA在表达各种RNA传感器的人类和其他哺乳动物细胞中被翻译成更高水平的蛋白质,并诱导更低的先天免疫反应。

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CellScript Cap1加帽试剂盒代理商

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CellScript公司介绍:

CELLSCRIPT的使命旨在为临床研究和治疗提供制造和使用RNA在细胞中翻译的最佳产品和技术。

目前的产品包括用于体外转录的试剂盒、使用帽类似物或帽酶的5'RNA帽盖和3'RNA多腺苷酸化,以及用于制造用于在细

胞中翻译的带帽多(a)尾mRNA的一体式试剂盒。

CELLSCRIPT引入INCOGNITO™ RNA转录试剂盒,用于体外合成含有修饰核苷的RNA,如假尿苷(Ψ)和/或5-甲基胞苷

(m5C)代替相应的U或C规范核苷(图1)。这些试剂盒之所以如此命名,是因为被封端的、聚腺苷酸化的和核苷修饰的

RNA产物(称为“INCOGNITO mRNA”)被wei装,因此当它们被转染到表达各种RNA传感器的哺乳动物细胞中时,它们

不会像相应的未修饰的mRNA那样诱导先天免疫反应。

CellScript Cap1加帽试剂盒介绍:

ScriptCap™ Cap 1 Capping System  可提供 ScriptCap Capping Enzyme 和 ScriptCap 2'-O-Methyltransferase 两种酶进行盖帽过程。其中,ScriptCap Capping Enzyme 可在体外通过三种酶促反应催化一个cap nucleotide(帽核苷酸)连接到具有 5'- 三磷酸基团的初始RNA 的5' 末端 ,从而形成cap0,其表现形式是:m7G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') 。(m7G 代表 N7- 甲基鸟苷帽核苷,ppp 三磷酸链接帽苷碳端和RNA氮端,N1(pN)x-OH(3') 代表初始转录后 RNA)。

ScriptCap 2'-O-Methyltransferase 可介导 cap0 到 cap1 的盖帽过程,其可从供体SAM中转移一个甲基到 cap0  的 2' 位置,从而形成 cap1。

特点:

1 、ScriptCap™Cap 1 Capping System 提供 ScriptCap Capping Enzyme 和 ScriptCap 2'-O-Methyltransferase(2' 氧甲级转移酶),可在 RNA 的 5' 末端产生 Cap 0 或 Cap 1 帽结构,也可满足其单一需求,可单独获得Cap 0或 Cap 1 。

2 、反应后的 Cap RNA  可直接进行 Poly(A )聚合反应,无需再次进行处理,可方便进行后续的翻译过程。

3 、ScriptCap Cap 1 Capping System  改进了共转录加帽方法,使其加帽效率可以接近100% ,所有加帽RNA均在正确的方向上且能够大量产生,最终可以合理的成本获得大量且正确的加帽 RNA 。

应用:

该产品多用于用于动物体外 RNA 转录合成过程,以进行 5' 末端的 Cap 0 或 Cap 1 结构的产生,提高体外 RNA 的稳定性和翻译效率。

ScriptCap™ Cap 1 Capping System cat(Cap 1 加帽试剂盒)是 CELL CRIPT™ 公司旗下的一款代表性产品,其最大的特点是高效性和灵活性,可分别进行 cap0 和 cap1 的修饰过程,其加帽效率可以接近 100%;且该产品可与公司其它产品混合使用(加尾等),无需加以处理。

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CellScript m7G加帽试剂盒代理商

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CellScript m7G加帽试剂盒代理

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CellScript公司介绍:

CELLSCRIPT的使命™ 旨在为临床研究和治疗提供制造和使用RNA在细胞中翻译的最佳产品和技术。目前的产品包括用于体外转录的试剂盒、使用帽类似物或帽酶的5'RNA帽盖和3'RNA多腺苷酸化,以及用于制造用于在细

胞中翻译的带帽多(a)尾mRNA的一体式试剂盒。

CELLSCRIPT引入INCOGNITO™ RNA转录试剂盒,用于体外合成含有修饰核苷的RNA,如假尿苷(Ψ)和/或5-甲基胞苷

(m5C)代替相应的U或C规范核苷(图1)。这些试剂盒之所以如此命名,是因为被封端的、聚腺苷酸化的和核苷修饰的

RNA产物(称为“INCOGNITO mRNA”)被wei装,因此当它们被转染到表达各种RNA传感器的哺乳动物细胞中时,它们

不会像相应的未修饰的mRNA那样诱导先天免疫反应。

CellScript m7G加帽试剂盒介绍:

ScriptCap m7G加帽试剂盒提供了在体外转录(IVT)反应期间通过共转录封端制备封端RNA的替代方案,在体外转录反应中包括二核苷酸封端类似物(例如m7G(5')ppp(5',G)代替GTP的一部分。假设RNA的5’末端没有结构,使用ScriptCap m7G封端系统的封端效率可以接近100%。相反,由于帽类似物与GTP竞争RNA聚合酶的转录起始,共转录封端效率受到帽类似物浓度及其浓度与GTP浓度之比的限制。因此,在转录反应中使用帽类似物封端的RNA的百分比总是小于100%。在使用帽类似物的共转录封端反应中可以制备的封端RNA的量也受到降低GTP浓度以允许帽类似物竞争转录起始的需要的限制。另一方面,如果要封端的RNA具有高度结构化的5'末端,则用帽类似物进行共转录封端可能是有益的。

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mRNA加帽工具:cellscript加帽试剂盒

mRNA加帽工具:cellscript加帽试剂盒

1970年,科学家发现了mRNA的5’端结构——帽子结构(m7GpppN),它一方面保护mRNA使其具有稳定性,另外一方面,5′端帽子还是前体mRNA剪接、多聚腺苷酸化及和核输出的标识符。同时,mRNA的5′端帽子结构如果出现异常,将会引起细胞发生抗病毒反应。因此,RNA加帽和mRNA的扩增,促进了mRNA的大规模生产,mRNA疫苗成为可能。

一、mRNA加帽原理

真核生物mRNA加帽需要在TPase、GTase、N7 MTase等酶的参与下合成帽子结构,原理如下:

(1)RNA三磷酸酶(TPase)从5’-三磷酸中去除 γ-磷酸,生成 5’-二磷酸 RNA

pppN1(p)N.-OH(3')→ ppNi(pN)x-OH(3')+Pi

(2)RNA 鸟苷酸转移酶(GTase)通过赖氨酸-GMP 共价中间体将 GMP 基团从 GTP 转移到 5’-二磷酸

ppN1(pN)x-OH(3')+GTP→G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3')+PPi

(3)嘌呤-N7 甲基转移酶(鸟嘌LING-N7 MTase)在鸟嘌LING帽的N7胺上添加一个甲基,形成基本帽结构(Cap0)

G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3')+AdoMet → m7G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3')+ AdoHyc

(4)m7G 特异性 2’O-甲基转移酶(mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase)还可将核糖2’O位置的核糖核苷酸甲基化生成Cap1结构

m7GpppN1(pN)x-OH(3')+AdoMet → m7Gppp[m3'-o]N1(pN)x-OH(3')+ AdoHyc

                                        Cap 0 RNA                                               Cap 1 RNA

二、RNA加帽酶的应用

1. 促进靶蛋白的表达

mRNA是蛋白质合成的模板,因此,将mRNA导入细胞,促进胞内蛋白的表达。

2. 促进Cap0/Cap1的RNA合成

根据上述mRNA的加帽原理,合成Cap0/Cap1结构的mRNA。

3. 合成mRNA疫苗

只要获取致病因子的序列,在RNA加帽酶和RNA自扩增技术下,合成mRNA疫苗。对比于减毒疫苗,mRNA疫苗不会对载体产生免疫反应;对比于DNA疫苗,mRNA疫苗无需转录直接翻译成蛋白质,反应时间更快、作用更有效。

三、加帽方法

1. 酶法加帽

利用上述的加帽原理,即可获得Cap0/Cap1结构。上海金畔生物科技有限公司提供的CellScript加帽试剂盒(货号:C-SCCS1710)的反应时间短,加帽效率高(接近100%),同类产品可直接交叉使用。

2. 共转录法加帽

转录起始,加入帽类似物,转录本沿着帽类似物延长,转录完成形成的mRNA就具有帽子结构。


CELLSCRIPT™体外加帽试剂盒工作原理

CELLSCRIPT™体外加帽试剂盒工作原理

CELLSCRIPT™的使命是提供安全高效的转录产品和技术,用于制造和使用RNA以便进行临床研究和治疗的细胞翻译。

目前的产品包括多种体外转录试剂盒、加帽类似物或加帽酶的5' RNA加帽试剂盒和3' RNA多聚腺苷酸化的试剂盒,以及用于转录、加帽、poly(A)尾mRNA以进行翻译的多合一试剂盒。

其中,ScriptCap™ Cap 1 Capping System(C-SCCS1710)包含ScriptCap加帽酶、ScriptCap 2'-O-甲基转移酶、GTP和SAM等成分,对体外转录的RNA进行转录后加帽修饰。Cap 0或Cap 1上限均可构建,效率接近100%(这不能通过共转录加帽方法来完成)。

ScriptCap加帽酶在体外催化具有5‘-三磷酸基的初级RNA的5’末端加成帽核苷酸。“帽核苷酸”或“帽”是一种鸟嘌呤核苷,它通过5‘C连接到一个三磷酸基团,然后再连接到初级mRNA转录本中最多的5’核苷酸的5‘碳上,在大多数真核生物中,帽核苷酸中鸟嘌呤7位的氮是甲基化的。表示为:m7G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3')。其中m7G代表N7-甲基鸟嘌呤核苷,PPP代表帽子核苷的5’碳与初级RNA转录本的第一个核苷酸之间的三磷酸桥,N1(PN)x-OH(3’)代表初级RNA转录本,其中N1是最多的5’核苷酸。

ScriptCap加帽酶可依次催化三种不同的酶反应:

(1) RNA三磷酸酶将RNA的5‘三磷酸裂解成二磷酸:

pppN1(p)Nx-OH(3')——ppN1(pN)x-OH(3') + Pi

(2) RNA鸟苷酸转移酶将GTP连接到RNA最5‘核苷酸(N1)的5’二磷酸上:

ppN1(pN)x-OH(3') + GTP——G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + PPi

(3) 鸟嘌呤-7-甲基转移酶以S-腺苷甲硫氨酸(SAM或ADOMet)为辅因子,催化帽核苷酸中鸟嘌呤7-氮的甲基化:

G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + AdoMet——m7G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + AdoHyc

这一过程被称为“盖帽”,与未盖帽的RNA相比,它提高了RNA的稳定性和翻译效率。ScriptCap盖帽酶构建的封端RNA产物具有“0″帽结构。在体外,通过同时使用ScriptCap 2‘-O-甲基转移酶和ScriptCap盖帽酶,可以将CAP0 RNA转化为“CAP1″结构。

ScriptCap 2‘-O-甲基转移酶通过将供体分子SAM上的甲基转移到CAP 0 RNA倒数第二个核苷酸的2’-O位,从CAP 0-RNA制备CAP1-RNA,合成具有CAP 1结构的RNA。


Cap1 RNA可以进一步提高mRNA的体内翻译效率,并有助于将mRNA标记为相对于细胞内免疫监视机制的“自身RNA”。

ScriptCap1盖帽系统提供了一种在IVT反应中通过共转录盖帽来制造盖帽RNA的替代方案,在IVT反应中,用二核苷酸盖帽类似物(例如m7GpppG)代替部分GTP,如果RNA的5‘末端不是结构化的,使用ScriptCap 1盖帽系统的盖帽效率可以接近100%。相反,由于CAP类似物与GTP竞争RNA聚合酶的转录启动,共转录的盖帽效率受到CAP类似物的浓度及其与GTP浓度之比的限制。因此,在转录反应中使用CAP类似物盖帽的RNA百分比总是小于100%。在使用CAP类似物的共转录盖帽反应中可以产生的CAP RNA的量也受到降低GTP浓度以允许CAP类似物竞争转录起始的需要的限制。另一方面,如果要盖帽的RNA具有高度结构的5‘末端,则与CAP类似物共转录盖帽可能是有益的。

优势:灵活进行cap0和cap1的加帽;

   效率*,接近100%;

   同类产品可直接交叉使用以及价格合适。

应用:进行体外mRNA的修饰,用作体外蛋白表达系统和生理试验;

   前体mRNA的研究试验以及疫苗研究。

Cellscript体外加帽试剂盒2022年开学大促

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Cellscript体外加帽试剂盒2022年开学大促

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上海金畔生物2022年开学大促开始啦!

Cellscript体外加帽试剂盒2022年开学大促!


产品名称:Cellscript体外加帽试剂盒

英文名称:ScriptCap™ Cap1 Capping System

产品编号:C-SCCS1710


原价:4285/盒

现价:2666/盒

邮费:包邮,偏远地区除外



Cellscript体外加帽试剂盒2022年开学大促

产品优势:

  1. 可灵活进行Cap0Cap1的加帽;

  2. 效率*,接近100%

  3. 同类产品可直接交叉使用。

  4. 价格合适。

产品应用:

 1. 进行体外mRNA的修饰

 2. 用于体外蛋白表达系统和生理实验

 3. 前体mRNA的研究试验

 4. 疫苗试验

产品编号

产品名称

产品类型

产品规格

C-SCCS1710

体外加帽试剂盒

Cap0和Cap1的盖帽系统

10 reactions

上海金畔生物科技有限公司:

一、辐射五大服务方向:

1.国内试剂耗材经销代理;

2.国外试剂订购(直订,或境外代理);

3.基因组测序(二代,二代+三代);

4.基因分型(SNP检测):低/中/中 高通量项目;

5.生物样本运输(国内、);

二、多家代理品牌,涉及30多种,经营代理500多个品牌:

Qiagen、Sigma、R&D、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific、

Matreya、Sage Science、List Labs、Macrocyclics、Steraloids、

NIBSC、mobio、immunodx、cellsystems、medicago、abcam

CST、Roche、Bethyl、sino Biological、clodrosome、adi

BIO-WORLD、TOKU-E、HYPHEN BioMed、moltox、ZeptoMetrix

International Humic、biocytex、Toxin Technology  、Streck

Elastin、biomax、Orflo Technologies、Accegen、Advbiomart、genlantis、R&D

R&D、Cygnus Technologies LLC、Enzyme Research、Bio/Data Corporation

Greer Lab 、Solarbio、bangslabs、bioline、musechem、Novocastra

stemrd、hyphen-biomed、polyplus、moltox 、exiqon、pentapharm、verichemlabs

GenStar、ALZET、lucernatechnologies 、meridian、origene、zimmerpeacocktech

horizondiscovery、Reagents、megazyme、elisasystems………

所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷门品牌,均能给客户购买到。价格优,货期短,可加急,zui kuai 10天到货;保证服务质量,所有产品均提供售后服务。大部分客户我们提供货到付款服务,

公司自成立依靠过硬的服务和良好的信誉与各大企事业单位、科研单位建立长期合作。客户包括北大,清华,地大,中科院各所,各大药企等等。

专业订购国内外试剂耗材,常备现货,一手货源,欢迎合作。



牛痘病毒加帽系统 货 号 #M2080S NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

牛痘病毒加帽系统                              收藏

牛痘病毒加帽系统              货   号                  #M2080S 牛痘病毒加帽系统              货   号                  #M2080S

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小鼠 RNase 抑制剂

特性

 体内或体外翻译前 mRNA 的加帽
 标记 mRNA 5´ 末端

概述

牛痘病毒加帽体系利用牛痘病毒加帽酶及其它组份,将 7-甲基鸟苷帽结构(Cap 0)加到 RNA 的 5´ 末端。在真核生物中,该类末端帽结构影响到 mRNA 的稳定、转运和翻译。使用酶促反应为 RNA 加帽是一种简单有效的方法,对用于体外转录、转染和显微注射的 RNA,能改善其稳定性和翻译能力。另外,反应中所用到的标记 GTP 还能提供一种便捷的标记方法,将 5´ 末端带有三磷酸的任何 RNA 进行标记。
牛痘病毒加帽酶由两个亚基(D1 和 D12)组成,具有三种酶活性(D1 亚基具有 RNA 三磷酸酶和鸟苷转移酶活性;D12 亚基具有鸟嘌呤甲基转移酶活性),所有这些活性都是添加一个完整的 Cap 0 结构,即 m7Gppp (5´ ) N 所必需的。加帽反应不仅高效而且方向正确,不像共转录会添加上一些帽类似物。 

来源

携带牛痘病毒(WR)加帽酶基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X 加帽反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),5 mM KCl,1 mM DTT,1 mM MgCl2],37℃ 温育。 

提供的试剂

牛痘病毒加帽酶
加帽缓冲液(10X)
GTP 溶液(10 mM)
SAM 溶液(32 mM) 

质保声明

无单链或双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下,1 小时内将 10 pmol (α-32P) GTP 掺入到一条 80 个核苷酸的转录产物上所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。