白鲨易GUS染色试剂盒 gus(β-glucuronidase的使用说明书

gus(β-glucuronidase,β-D- 葡萄糖苷酸酶)基因是目前常用的一种报告基因,其表达产物β-葡萄糖苷酸酶 (GUS)是一种水解酶,能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解,它可以将5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯(X-gluc.htm' target=_blhaik>x-gluc)分解为蓝色的物质,其检测方法简单、快速、灵敏、稳定,且背景活性低。因为绝大多数植物细胞内不存在内源的GUS活性,因此gus基因广泛用作转基因植物的报告基因,尤其是在研究外源基因瞬时表达的转化实验中广泛应用。

Gus染色试剂盒包含GUS染色的全部试剂,使用方便,只需将染色液和缓冲液按照比例混合即配成GUS染色液。该试剂盒可以配制50ml GUS染色液。

Gus染色试剂盒贮存和效期:Gusblue kit 

 X-gluc染色液-20℃保存;GUS染色缓冲液 4℃贮存。自开封之日起有效期一年。

使用说明:

 一.  GUS染色液配制:

 X-gluc染色液为50×浓缩液,使用前用GUS染色缓冲液稀释50倍即配成GUS染色液。如0.1 ml X-gluc染色液加入到5 ml GUS染色缓冲液中,即配成5 ml GUS染色溶液。该染色溶液现用现配,短期贮存可以-20℃保存2-3天。

 二. GUS染色步骤:

 1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保温1小时至过夜。 

 2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次,至阴性对照材料呈白色。 

 3.肉眼或显微镜下观察,白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。

 注:用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和器官的不同而异。例如,拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像烟草和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片(1-3mm)。当操作大的组织和样品时,可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。

产地:上海

厂家:上海金畔生物科技有限公司

FDGlcU|Fluorescein di-beta-D-glucuronide|荧光素-二-β-D-葡糖醛酸苷的应用

【背景资料】:来自于大肠杆菌的β-葡萄糖苷酸酶(GUS),被用于转基因植物中具有优良特性的标志基因。GUS报告基因系统具有很多优势,如稳定表达的大肠杆菌的GUS酶对正常植物代谢无干扰,而高等植物中具有低背景的GUS活性。FDGlcU被认为是测定GUS酶最敏感的荧光底物之一。无色且非荧光的FDGlcU 被水解成高荧光的荧光素,它可以展现出完美的光谱特性(Ex/Em=492/520nm),与大多数荧光检测设备的最佳检测窗口所匹配。葡萄糖苷酸酶催化水解FDGlcU ,并在520nm处产生荧光。此外,由于FDGlcU的产物,荧光素具有强大的消光系数(100,000 cm-1mol-1),FDGlcU也被作为显色底物用于在发光模式下检测葡萄糖苷酸酶的活性。通过荧光显微镜或者流式细胞仪FDGlcU也能用来识别GUS阳性表达细胞。

供应荧光素-二-β-D-葡糖苷酸,波长Ex (nm)/Em(nm) :494 /521nm

FDGlcU|Fluorescein di-beta-D-glucuronide|荧光素-二-β-D-葡糖醛酸苷的应用

状态:固体/粉末

产地:上海

储存时间:1年

保存:冷藏

储藏条件:-20℃

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仅用于用于科研,不能用于人体试验(zyl 2022.04.14)