怎么配置1640培养基?

怎么配置1640培养基?

1640培养基是一种广泛应用于动物细胞培养的培养基,其配方基于早期由Eagle等人开发的培养基,经过了多年的改进和优化。这种培养基的配方和成分经过精心设计,以提供细胞生长所需的营养物质和环境。那么你知道该怎么配置1640培养基吗?让我们一起来看看吧!

一、材料准备:

1. 1640培养基粉末

2. 纯净水或去离子水

3. 高温灭菌的培养器具(烧杯、磁力搅拌器、培养瓶等)

4. 灭菌的量筒、移液器、滤器等

二、步骤:

1. 将所需的量筒、移液器等器具进行高温灭菌,确保无菌。

2. 根据需要配置所需的培养基量,一般以500 mL为例。

3. 将纯净水或去离子水倒入高温灭菌的量筒中,量取500 mL

4. 1640培养基粉末加入到量筒中的水中,用磁力搅拌器搅拌溶解,直至wan全溶解。

5. 溶解后的培养基液进行高温灭菌处理,通常使用121℃高压蒸汽灭菌器,时间为15-20分钟。

6. 灭菌后的培养基液倒入预先灭菌的培养瓶中,每个培养瓶装满适量的培养基液。

7. 培养瓶口用无菌滤纸盖好,确保无菌。

8. 培养瓶放入培养箱中,进行温度、湿度和二氧化碳浓度的调节,通常为37摄氏度、95%湿度和5%二氧化碳。

9. 将培养瓶中的培养基液在无菌条件下用移液器取出,用于细胞的培养和增殖。

1640培养基的配置方法相对简单,主要是将粉末溶解于适量的水中,并进行高温灭菌。配置完成后,根据需要放入培养瓶中,用于细胞的培养和增殖。在整个配置过程中,注意保持无菌条件,确保培养基的质量和细胞的生长环境。更多有关1640培养基的配置方法,请联系上海金畔生物科技有限公司。

如何配置1640培养基?

如何配置1640培养基?

RPMI 1640培养基最初是为淋巴细胞培养专门设计的,现被发现适用于多种哺乳动物细胞,包括 HeLa 细胞、Jurkat 细胞、 MCF-7 细胞、PC12 细胞、PBMC 细胞、星形胶质细胞和癌细胞等。那么你知道该如何配置1640培养基吗?让我们一起来看看吧!

一、材料

1. 1640培养基粉末

2. 纯水

3. 无菌量筒或烧杯

4. pH试纸或pH

5. 无菌培养瓶或离心管

6. 无菌滤器

二、步骤

1. 准备工作区域:确保实验室台面清洁,并使用消毒剂将台面消毒。

2. 洗手:che底洗手,并戴上实验手套。

3. 准备无菌器具:将无菌培养瓶或离心管、无菌滤器放入高压灭菌器中,按照厂商说明进行高压灭菌。

4. 准备1640培养基:根据需求量,称取适量的1640培养基粉末,放入无菌量筒或烧杯中。

5. 加入纯水:使用纯水,缓慢加入1640培养基粉末中,同时搅拌,直到溶解wan全,形成均匀的液体。

6. 调节pH值:使用pH试纸或pH计,检测培养基的pH值。如果需要调节pH值,可以加入少量的NaHCO3NaOH(用于提高pH)或HCl(用于降低pH),并逐渐调节至目标pH值。

7. 过滤培养基:将调节好pH值的培养基通过无菌滤器过滤,以去除其中的微生物和杂质。

8. 分装培养基:将过滤好的培养基分装到已经高压灭菌的无菌培养瓶或离心管中,每个容器装满后紧密封闭。

9. 高压灭菌:将分装好的培养基放入高压灭菌器中,按照厂商说明进行高压灭菌,以确保培养基的无菌性。

10. 存储:将高压灭菌后的培养基存放在冰箱中,以防止其变质。

更多有关1640培养基的配制方法,请联系上海金畔生物科技有限公司。

pei转染试剂如何配置

pei转染试剂如何配置  

  pei转染试剂广泛应用于多种细胞系包括293、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2 和 Hela 细胞等。pei转染试剂如何配置呢?
  一、pei转染试剂配置前准备:
  (1)通过胰酶消化收集细胞,用适当的完q培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上(根据实验需要选择培养皿,使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90%)。
  (2)根据细胞贴壁情况于含5%CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完q后即可开始转染。
  (3)转染前换入2mL预热的无血清培养基。
  二、配置PEI-DNA混合物
  以60mm组织培养皿用420μL反应总体积为例。准备两支1.5mL离心管,一管将质粒DNA(总量2-8μg为佳)加入240μLHBS中,混匀。另一管中则用HBS将100μM的PEI储存液稀释成10μM,充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中,充分混匀后于室温静置20-30min。
  三、pei转染试剂配置后细胞孵育
  将420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中,轻轻摇动平皿混匀,置于含5%~7%CO2的37℃温箱孵育。
  注:每次用100μM的核酸PEI转染试剂储存液前都需要先将其充分混匀,保证所取的浓度一致。
  四、pei转染试剂配置后细胞培养
  培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基,继续培养,16h左右可以观测到报告基因的表达。