怎么解冻胎牛血清呢?

怎么解冻胎牛血清呢?

胎牛血清是一种常用的细胞培养基和生化实验中的重要试剂,然而在使用前需要进行解冻。正确的解冻方法对于保持胎牛血清的活性和质量至关重要。那么,我们应该怎么解冻胎牛血清呢?下面将介绍一种常用的解冻方法。
首先,选择适宜的解冻温度。通常情况下,胎牛血清应该在2-8摄氏度的冰箱中解冻,避免过快或过慢的解冻。迅速解冻可能导致血清中蛋白质的不均匀沉淀,而缓慢解冻则可能引发蛋白质的降解。
接着,将储存胎牛血清的冻存管或瓶子取出,并放置在室温下静置片刻。如此一来,能够使温度逐渐上升,减少温度梯度对血清中蛋白质的影响。
然后,轻轻振荡解冻后的胎牛血清,使其充分混合。避免剧烈摇晃或搅拌,以防产生气泡和蛋白质的不均匀沉淀。
在解冻过程中,可将胎牛血清置于37摄氏度的水浴中加速解冻。但需留意的是,解冻时间不宜过长,一般在5-10分钟内即可完成解冻。
解冻后的胎牛血清应立即使用,避免长时间暴露于室温下。若需储存解冻后的血清,应立刻将其分装至干净、无菌的冻存管中,并冷藏保存在-20摄氏度或更低的温度下。
此外,为了确保胎牛血清的质量和活性,在解冻前需检查血清的外观和性状。正常的胎牛血清应呈无色或微黄色液体,透明或微浑浊,不应有异味或沉淀的存在。如发现血清有异常情况,如颜色变化、异味、沉淀等,应停止使用,避免对实验结果产生影响。
综上所述,解冻胎牛血清是一个关键的操作步骤,需要遵循正确的方法和步骤。选择适宜的解冻温度、缓慢升温、轻轻振荡、避免过长暴露于室温和及时分装储存等措施,可以保持胎牛血清的活性和质量。通过正确的解冻方法,我们能够更好地利用胎牛血清进行细胞培养和生化实验,获得准确可靠的实验结果。想了解更多关于怎么解冻胎牛血清呢的问题,请咨询上海金畔客服!

胎牛血清如何解冻

胎牛血清如何解冻

胎牛血清如何解冻

胎牛血清在生物医学研究,以及细胞培养领域中,应用广泛。胎牛血清含有丰富的生长因子、蛋白质和其他生物分子,对细胞生长和增殖具有重要作用。使用胎牛血清,先要将其解冻融化。融化胎牛血清时采取正确的方法非常重要,不正确的解冻过程可能会导致损坏或降低血清的有效性,影响到实验的可重复性和准确性。那么你知道胎牛血清该如何解冻吗?让我们一起来看看吧!

一、解冻方法

胎牛血清中珍贵的生长因子等活性物质,它们在解冻过程中,有着与细胞复苏类似的经历,都需要快速解冻才能最da程度地保留生物活性。

4℃过夜这样的长时间处理,很有可能会导致一部分的损失,影响细胞生长,为了更好地保留胎牛血清中的活性成分,使细胞培养更稳定,我们推荐使用三步法解冻胎牛血清。

 如果是储存在-80℃的胎牛血清,则需提前几天先转移至-20℃冰箱中(至少24小时),再使用三步法溶解,避免温差过大使血清失活。

阶梯解冻

温度

100ml

500ml

1

温度15-20°C水浴

5分钟

20分钟

室温

35分钟

90分钟

2

20°C水浴

15分钟

25分钟

3

37°C水浴

20分钟

35分钟

彻di解冻胎牛血清后,可以根据实验需求,将其分装,保证每一份够一次使用量即可,比如:25ml/管、50ml/管等。密封好后赶紧放回-20℃冰箱继续储存。需要配制培养基的时候,再从-20℃冰箱中取出一管来解冻使用,可以有效避免反复冻融的问题(遵循现用现配、现配现解冻的原则)。配好的培养基可以放到4℃冰箱进行储存。

二、常见问题

1. 胎牛血清有絮状沉淀

把血清置于37℃中过久,或者没有阶梯解冻,还有解冻水浴时振荡不足导致局部温差过大等原因,都会使血清产生一些沉淀。

正确的处理方法:可以等待其自然沉降,然后取上清液使用。若比较急用、或者絮状沉淀过于分散以至于无法取上清,可以20003000rpm离心5min。不推荐使用过滤法,血清的蛋白容易导致滤膜堵塞。热灭活之后的血清更容易产生沉淀。

2. 热灭活?血清热灭活是什么,有必要热灭活吗?

血清热灭活主要是为了除去对热敏感的补体。

补体是广泛存在于人和脊椎动物体血清及组织液中,不耐热,活化后具有酶活性、可介导免疫应答和炎症反应的一类蛋白质。补体的作用包括但不限于调理吞噬、裂解细胞、介导炎症、免疫调节和清除免疫复合物等。但由于胎牛胎龄8个月以下,尚未形成完善的补体系统,对免疫实验的影响较小,而热灭活血清反而会使血清中的很多重要微量生长因子分解流失,因此大部分实验不推荐热灭活血清。

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