ELISA主要材料试剂有哪些？

酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，简写ELISA或ELASA）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。那么ELISA主要材料试剂有哪些呢？让我们一起来看看吧！

一、抗原和抗体

在ELISA实施过程中，抗原和抗体的质量决定实验是否成功的关键因素。本法要求所用抗原纯度高，抗体效价高、亲和力强。ELISA 所用抗原有三个来源：天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于动物组织或体液、微生物培养物等，一般含有多种抗原成分，需经纯化，提取出特定的抗原成分后才可应用，因此也称提纯抗原（purifiedantigen）。

重组抗原（recombinantantigen）和多肽抗原（peptideantigen）均为人工合成品，使用安全，而且纯度高，干扰物质少。因此虽然制备合成抗原有较高的技术难度且要求较为昂贵的仪器设备和试剂，但对那些不易得到的天然抗原，显出其du特的优势。

二、Elisa板

可用作ELISA板的物质很多，常用的是聚苯乙烯和聚氯乙烯，它们具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。作为塑料，可制成各种形式。在ELISA测定过程中，它们作为载体和容器，不参与化学反应。加之它们的价格低廉，所以被普遍采用。专用于ELISA测定的产品也称为ELISA板，国际通用的标准板形是8×12的96孔式。

三、酶和底物

ELISA实验中对所使用的酶也有所要求，主要为纯度高、催化反应的转化率高、专一性强、性质稳定、来源丰富、价格便宜、制备成的酶标抗体或抗原性质稳定，与抗体或抗原偶联后需继续保留着它的活性部分和催化能力。在受检标本中不存在与标记酶相同的酶。此外，酶的底物应易于制备和保存，价格低廉，有色产物易于测定，光吸收度高。ELISA中常用的酶为辣根过氧化酶（HRP）和从牛肠粘膜或大肠杆菌提取的碱性磷酸酶（AP）。

四、免疫吸附剂

固相的抗原或抗体称为免疫吸附剂。将抗原或抗体固相化的过程称为包被（coating）。由于载体的不同，包被的方法也不同。如以聚苯乙烯 ELISA 板为载体，通常将抗原或抗体溶于缓冲液（常用的为 pH9.6 的碳酸盐缓冲液）中，加至ELISA 板孔中在 4℃ 过夜孵育，经清洗后即可使用。如果包被液中的蛋白质浓度过低，固相载体表面未能被此蛋白质wan全覆盖，其后加入的待测样品中的蛋白也会吸附于固相载体表面，最后产生非特异性显色而导致本底偏高。

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