上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-SH 3.4k 异氰酸聚乙二醇巯基 分子量MW 3400
品牌：
货号：JPB-05708
中文名：异氰酸聚乙二醇巯基 分子量MW 3400
英文名：NCO-PEG-SH 3.4k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：3.4k/3400
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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qq号：2743691513
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上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-NHS 3.4k 异氰酸聚乙二醇琥珀酰酯 分子量MW 3400
品牌：
货号：JPB-05707
中文名：异氰酸聚乙二醇琥珀酰酯 分子量MW 3400
英文名：NCO-PEG-NHS 3.4k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：3.4k/3400
分散度：《1.05
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上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-NH2 3.4k 异氰酸聚乙二醇氨基或保护氨基 分子量MW 3400
品牌：
货号：JPB-05706
中文名：异氰酸聚乙二醇氨基或保护氨基 分子量MW 3400
英文名：NCO-PEG-NH2 3.4k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：3.4k/3400
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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【简单介绍】
【详细说明】
你知道WB实验操作步骤有哪几步吗？
蛋白质印迹(Western blotting)：又称为免疫印迹，根据抗原抗体的特异性结合，半定量检测样品中的某种蛋白的方法。基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析条带的位置和条带深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况。那么你知道WB实验操作步骤有哪几步吗？让我们一起来看看吧！
一、样本制备蛋白提取
1.前期准备：首先要了解你所研究蛋白的内源表达水平，常用的数据库如Uniport、Atlas、BioGPS，或查阅相关文献。设置阳性对照，选择内参蛋白。
2.蛋白提取：是Western Blotting 的第一步，要求选择样本新鲜，降低背景，避免反复冻融，选择合适的裂解液裂解样本，选择合适的蛋白酶或磷酸酶抑制剂，防止蛋白的降解和磷酸化信号的丢失。
二、蛋白浓度测定
蛋白质浓度测定的方法包括Lowry法、Bradford法、BCA法，常用的是BCA法，基本原理是在碱性条件下，蛋白将Cu+ +还原为Cu+，Cu+ 与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
之后加入Loading buffer，含有变性剂，使蛋白质变性，释放二硫键，最后煮沸变性保存样品于-20℃或-80℃。
三、上样和电泳
1. 制备凝胶：根据蛋白分子量的大小，选择合适浓度的分离胶，配胶的APS需要在4℃的冰箱中保存。配胶的试剂中，APS与TEMED是促凝剂，所以在加促凝剂之前，需先把其他组分混匀。
2.上样：蛋白Marker孔加入5-10μL，多选择生物素化蛋白Marker，其余蛋白总上样量20-50μg，组织样本稍多些上样，尽量保持每个泳道的上样量一致，空泳道用Loading buffer补齐。
3. 电泳：接上电源后，先用80V恒压电泳浓缩至溴酚蓝指示剂到浓缩胶与分离胶交界处，成线状，改为恒压100v–120v直至溴酚蓝电泳到凝胶底部，此过程约用时1.5h。
四、转膜
1.膜的选择：广泛使用的是NC膜和PVDF膜
2.转膜：转膜的方法包括湿转、半干转、干转，湿转是转膜最完quan且应用zui广泛的方法，但是所需时间较长。
五、封闭和抗体孵育
1.封闭：目的是为了减少膜对一二抗的非特异吸附，降低背景。将NC膜从湿转系统中取出，并用TBST润洗2次，每次5 min，然后进行封闭。
化学发光法：用含5% 脱脂奶粉的TBST（封闭液）浸泡NC膜，室温摇床封闭1-2h；
荧光法：含5% 脱脂奶粉的TBS，脱脂奶粉需选择实验室级别的。
最后再用TBST润洗封闭后的NC膜3次，每次5 min。
2.抗体孵育：一抗能识别膜上不同种属的蛋白，买经过验证的，二抗上带有发光底物，只能识别一抗。
六、显色曝光
常用的是化学发光，抗体上偶联的HRP催化ECL发光底物显色，取出洗涤的膜后，用滤纸吸干水分，放置于成像仪上，均匀滴加ECL工作液，排出气泡，开始曝光。
更多WB实验的操作步骤相关问题，请联系上海金畔生物科技有限公司：
上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-OH 3.4k 异氰酸聚乙二醇羟基 分子量MW 3400
品牌：
货号：JPB-05705
中文名：异氰酸聚乙二醇羟基 分子量MW 3400
英文名：NCO-PEG-OH 3.4k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：3.4k/3400
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-COOH 3.4k 异氰酸聚乙二醇羧基 分子量MW 3400
品牌：
货号：JPB-05704
中文名：异氰酸聚乙二醇羧基 分子量MW 3400
英文名：NCO-PEG-COOH 3.4k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：3.4k/3400
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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MERCK MILLIPORE表面滤膜0.1um孔径混合纤维素酯VCWP04700
MERCK MILLIPORE表面滤膜0.1um孔径混合纤维素酯VCWP04700
说明:MF-Millipore 表面滤膜，混合纤维素酯，亲水，0.1 µm，47 mm，白色，光面
商标名:MF-Millipore
数量/包装:100
应用:DNA 和蛋白质微量透析
滤膜材质:Mixed Cellulose Esters
滤膜商标名:MF-Millipore
折射率:1.5
水通量，mL/min x cm2:1.5
23 °C 时的泡点:≥14.1
zui高操作温度，°C:75
滤膜类型:表面滤膜
滤膜孔径，µm:0.1
可润湿性:亲水
滤膜直径，mm:47
滤膜代码:VCWP
滤膜颜色:白色
产品名称:MF-Millipore 表面滤膜
滤膜表面:光面
重量分析溶出物，%:1.5
厚度，µm:105
空气流速，L/min x cm2:0.4
孔隙率 %:74
不含 Triton® 表面活性剂的 MF-Millipore 滤膜包含极少量的润湿剂，其水溶出物比标准的 MF-Millipore 滤膜低。
颜色：白色
表面：光面
可湿性：亲水
灭菌方法：高温高压灭菌（121 °C， 1 bar）、EO 或 γ 射线灭菌
使用温度：55 °C zui大
蛋白结合：150 µg/cm2
细菌内毒 素：8.0 EU/mL
重量溶出物：< 1.0%
上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-MAL 3.4k 异氰酸聚乙二醇马来酰亚胺顺丁烯二酰亚胺 分子量MW 3400
品牌：
货号：JPB-05703
中文名：异氰酸聚乙二醇马来酰亚胺顺丁烯二酰亚胺 分子量MW 3400
英文名：NCO-PEG-MAL 3.4k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：3.4k/3400
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-CM 2k 异氰酸聚乙二醇乙酸 分子量MW 2000
品牌：
货号：JPB-05702
中文名：异氰酸聚乙二醇乙酸 分子量MW 2000
英文名：NCO-PEG-CM 2k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：2k/2000
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-AA 2k 异氰酸聚乙二醇乙酸 分子量MW 2000
品牌：
货号：JPB-05701
中文名：异氰酸聚乙二醇乙酸 分子量MW 2000
英文名：NCO-PEG-AA 2k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：2k/2000
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-P-MAL 2k 异氰酸聚乙二醇丙酰胺马来酰亚胺 分子量MW 2000
品牌：
货号：JPB-05700
中文名：异氰酸聚乙二醇丙酰胺马来酰亚胺 分子量MW 2000
英文名：NCO-PEG-P-MAL 2k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：2k/2000
分散度：《1.05
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上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-propargyl 2k 异氰酸聚乙二醇炔丙基 分子量MW 2000
品牌：
货号：JPB-05699
中文名：异氰酸聚乙二醇炔丙基 分子量MW 2000
英文名：NCO-PEG-propargyl 2k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：2k/2000
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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细胞培养基的灭菌及储存方法有哪些？
不同的培养基由于其营养成份不同，灭菌方式和储存方法也可能不同。那么细胞培养基的灭菌及储存方法有哪些呢？让我们一起来看看吧！
一、不同细胞培养基的除菌方式及注意事项
某些培养基（如MEM）可进行高压灭菌，这类培养基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠，一般是在培养基高压灭菌后才加入。另外可用耐高压的谷氨酸盐（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）代替L-谷氨酰胺。可高压灭菌的培养基在121℃、15 psi，15分钟的条件下wan全可达到灭菌效果及营养成分的最小损失，不需将灭菌时间延长。
绝大多数细胞培养基不适宜高压灭菌。因培养液中常含有维生素、蛋白质、多肽、生长因子等物质，这些物质在高温或射线照射下易发生变性或失去功能，因而上述液体多采用过滤消毒以除去细菌。可供过滤灭菌使用的滤膜很多，其材料多为polyethersulphone（PES）、尼龙、多聚碳酸盐、醋酸纤维素、硝酸纤维素、PTFE、陶瓷等。膜过滤除菌是当前较为常用及便捷的一种方法，常采用0.2 μm孔径的滤膜，部份采用0.1 μm孔径。与高压过滤方式相比，滤膜具有使用期限且价格较高，但对细胞培养基的营养成份破坏性较小。
二、不同细胞培养基存储过程中的注意事项
通常液体细胞培养基避免-20 ℃冻存，因为解冻时可能会有营养成份析出，影响培养效果。正常情况下于2 ~ 8 ℃避光保存，使用前从冰箱取出，放入室温进行平衡。通常的液体培养基有效期是6个月到12个月。液体细胞培养基尽量避免长期贮存，其中的谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解，如果细胞生长不良，可考虑检测培养基中的谷氨酰胺含量确定是否再补加谷氨酰胺。市售商业化液体细胞培养基有具体的有效期，对于使用干粉细胞培养基自行配制成液体以后，也应低温（2 ~ 8 ℃）贮存。除培养基中如谷氨酰胺易降解之外，培养基中的其他成份随着温度的升高也可能会发生降解或是析出。
更多有关细胞培养基的灭菌及储存方法，请联系上海金畔生物科技有限公司：
上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-acryloyl 2k 异氰酸聚乙二醇丙烯酰 分子量MW 2000
品牌：
货号：JPB-05698
中文名：异氰酸聚乙二醇丙烯酰 分子量MW 2000
英文名：NCO-PEG-acryloyl 2k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：2k/2000
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-N3 2k 异氰酸聚乙二醇叠氮基 分子量MW 2000
品牌：
货号：JPB-05697
中文名：异氰酸聚乙二醇叠氮基 分子量MW 2000
英文名：NCO-PEG-N3 2k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：2k/2000
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-MS 2k 异氰酸聚乙二醇甲磺酸 分子量MW 2000
品牌：
货号：JPB-05696
中文名：异氰酸聚乙二醇甲磺酸 分子量MW 2000
英文名：NCO-PEG-MS 2k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：2k/2000
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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上海金畔生物科技有限公司提供NCO-PEG-OTS 2k 异氰酸聚乙二醇对甲苯磺酰氧基 分子量MW 2000
品牌：
货号：JPB-05695
中文名：异氰酸聚乙二醇对甲苯磺酰氧基 分子量MW 2000
英文名：NCO-PEG-OTS 2k
端基取代率：》95%
纯度：》95%
分子量：2k/2000
分散度：《1.05
包装：1克/5克/10克
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Merck Millipore聚碳酸酯膜（PC膜）5um孔径TMTP04700
Merck Millipore聚碳酸酯膜（PC膜）5um孔径TMTP04700
Isopore 表面滤膜是在聚碳酸酯表面径迹蚀刻而成，推荐用于所有需要通过光学或电子显微镜技术对空气中的污染物及其它颗粒进行观察分析时使用。 Isopore 表面滤膜具有光滑的，像玻璃一样的表面，可以进行清晰的样品观察。
说明: Isopore 表面滤膜，聚碳酸酯，亲水，5.0 µm，47 mm，白色，光面
商标名: Isopore
数量/包装: 100
滤膜材质: Polycarbonate
滤膜商标名: Isopore
折射率: 1.6
zui高操作温度，°C: 140
滤膜类型: 表面滤膜
滤膜孔径，µm: 5.0
可润湿性: 亲水
滤膜直径，mm: 47
Air Flow Rate, L/min x cm2/psi: 50
Water Flow Rate, mL/min x cm2/psi: 250
滤膜代码: TMTP
滤膜颜色: 白色
产品名称: Isopore 表面滤膜
滤膜表面: 光面
重量分析溶出物，%: <1
厚度，µm: 20
孔隙率 %: 5–20
颜色：白色
表面：光面
可湿性：亲水
厚度：7– 22 µm
成孔率：5–20%
灭菌方法：高温高压灭菌 （121 °C，1 bar）、EO 或 γ 射线灭菌
胰岛素吸收率：3 µg/cm2
重量溶出物：< 1.0%