细胞转染的方法和PEI Prime ™的介绍

细胞转染的方法和PEI Prime ™的介绍

细胞转染是指将外源分子如DNARNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。

转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。

理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术,是目前转染效率高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势。但是,病毒转染方法的准备程序复杂,常常对细胞类型有很强的选择性,在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点。

需要指出的一点,无论采用哪种转染技术,要获得*的转染结果,可能都需要对转染条件进行优化。影响转染效率的因素很多,从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态,到转染方法的操作细节,都需要考虑。

常见的转染方法是脂质体转染法:

阳离子脂质体表面带正电荷,能与核酸的磷酸根通过静电作用,将DNA分子包裹入内,形成DNA脂复合物,也能被表面带负电的细胞膜吸附,再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前实验室便捷的转染方法之一,其转染率较高,优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性,所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型:cos-7 BHKNIH3T3 Hela等。

 

 

   
 

 

 

美国serochem公司成立于2019年,目标是使基因治疗和生物制剂价格合理。目前,该公司主要进行PEI Prime相关的两款产品(液体和固体两种)。

PEI是聚乙烯亚胺的缩写。pH中性溶液中具有*正电荷密度的合成聚合物。带正电的PEI与带负电的DNA牢固结合,并赋予净阳离子电荷,使DNA进入细胞。当下,PEI是流行的瞬时转染试剂HEK293CHO悬浮培养液。serochem旗下的PEI Prime是一种高性能转染试剂,旨在实现高产量,可重复性,和可扩展的瞬时基因表达,且其是生产任何具有成本效益的生物制剂的很好选择,包括重组蛋白,抗体和病毒。

PEI Prime ™是基于PEI基础上的高性能转染试剂,是化学转染中的阳离子聚合物转染试剂;在HEK293CHO细胞悬浮培养中具有高效性;制备简单,价格适中,适合大规模瞬时转染;比PEI所需时间较少。

PEI Prime的设计着眼于在PEI可扩展性基础上,进一步提高,这使其成为可以用于大规模瞬时基因表达具有成本效益的试剂。无论转染一毫升还是一百万升培养基,我们都会提供较优的性能,服务和价格。而北京百奥作为其国内代理,本着一心为客户着想,认真为客户负责的宗旨,介绍并推荐此产品。

 

 

 

Super ECL Prime(灵敏化学发光检测试剂盒) 货号: S6008S/S6008M/S6008L 规格: 10 mL/100 mL/500 mL

上海金畔生物科技有限公司代理UELANDY荧光染料全系系列产品

Super ECL Prime(灵敏化学发光检测试剂盒)

产品货号: S6008S/S6008M/S6008L

产品规格: 10 mL/100 mL/500 mL

目录价(元):73/405/1253

推荐仪器:凝胶成像仪

大包装询价


产品概述:

储存条件
4℃密封避光保存,短期可放置于室温。有效期见外包装。

组分

   规格

 S6008S10mL

 S6008M100mL

S6008L500mL

A

5 mL

50 mL

250 mL

B

5 mL

50 mL

250 mL

产品介绍
Super ECL Prime 免疫印迹底物是用于增强型化学发光 (ECL)的入门级过氧化物酶底物,性能可靠,但成本更低,性价比极高。
Super ECL Prime 免疫印迹底物适用于辣根过氧化物酶 (HRP)的检测,该底物采用了与其它品牌相同的鲁米诺和过氧化物酶底物配方,无需对检测条件或孵育方案进行优化,从而大大节约成本。
Super ECL Prime(灵敏)特点:
1. 简单易用;
2. 灵敏度更高:可检测较低表达的蛋白;
3. 价格更经济:相比其他品牌的类似产品,在具有高品质和高性能的同时,价格更低。

注意事项
1. 发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能有降低,操作时注意避光。戴手套可以避免在膜上留下手印。
2. 长时间曝光会加深背景;蛋白过量,会使条带强弱变化失去线性关系;曝光不足,则条带模糊或较浅。
3. 如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 曝光。
4. 由于发光液极其灵敏,强烈推荐大多数进口抗体稀释浓度为一抗 1:1000~1:4000,二抗 1:5000~1:10000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带。
5. 某些保鲜膜可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜。
6. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。
7. NaN3 会抑制 HRP 活性,回收二抗应避免使用 NaN3,如必需使用勿超过 0.01%。

说明书:

Super ECL Prime(灵敏化学发光检测试剂盒) 货号:               S6008S/S6008M/S6008L  规格:               10 mL/100 mL/500 mL UE-S6008S/S6008M/S6008L    
MSDS:

MSDS S6008 Super ECL Prime
使用本产品的文献:

Dihydrocapsaicin Inhibits Cell Proliferation and Metastasis in Melanoma via Down-regulating b-Catenin Pathway
Shaomin ShiChongyang LiYanli ZhangChaowei DengWei LiuJuan DuQian LiYacong JiLeiyang GuoLichao LiuHuanrong HuYaling LiuHongjuan Cui

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