TaqMan探针法基因分型服务

TaqMan探针法基因分型服务

TaqMan探针法是针对DNA上的SNP位点设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增检测的方法,通常用于少量SNP位点的分析,核酸定量分析以及肿瘤细胞突变分析等。

探针的5’-端和3’-端分别标记一个荧光报告基团(Reporter,如FAM、VIC、HEX等)和一个荧光淬灭基团(Quencher,如TAMRA、BHQ1等)。当荧光探针保持完整时,5′-端报告基团经仪器光源激发的荧光正好被近距离的3′端荧光基团淬灭,仪器检测不到5′端报告基团所激发的荧光信号。

PCR扩增时,加入一对特异引物的同时,加入一对特异性的荧光探针,该探针只与模板特异性地结合,其结合位点在两条引物之间。当溶液中存在DNA目的片段时,荧光探针与模板退火结合,随着PCR的进行,热启动Taq酶在链延伸过程中遇到与模板结合的探针,其5′-3′外切酶活性(此活性是双链特异性的,游离的单链探针不受影响)就会切割探针,释放5′-端报告基团游离于反应体系中,远离3′-端荧光淬灭基团的屏蔽,破坏两荧光分子基团间的能量转移(FRET),因此5′-端报告基团受激发所发射的荧光信号就可以被探头检测到。每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号累积与PCR产物形成的同步,荧光信号的强度能够代表模板DNA的拷贝数。 

技术原理 

结果示例 

服务内容 
1、基因和SNP序列信息分析。 
2、实验方案讨论与确定。 
3、引物和探针的设计优化。 
4、引物和探针的合成。 
5、qPCR实验。 
6、数据分析整理。 
7、报告生成。 
服务流程 
1、提交项目课题相关需求和资料。 
2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。 
3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。 
4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。 
5、开展实验,按期完成合同规定的内容。 
6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。 
我们的优势 
1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。 
2、专业的操作人员。 
3、高规格实验室。 
4、数据结果交付周期快。 
5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。 
咨询与订购 
感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联系我们,我们将竭诚为您解答和服务。 

 

STR分型检测

STR分型检测

细胞STR分型介绍
细胞STR分型(cell line STR genotyping)也称为短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分型、简单重复序列(SSR)分型或微卫星标记(Microsatellite)分型,是检测广泛分布在真核生物基因组中的简单重复序列。一般由2-6bp的核心序列串联重复而成,构成了STR基因座的遗传多态性。对于一个特定的个体,染色体上某个特定位置的重复序列的重复次数是固定的,而对于不同的个体重复次数可能不同,这就构成了人群中STR的多态性。由于人类基因组中这种重复序列非常多,通过对STR多态性的检测,就可以区分个体之间的差异,确定亲缘关系。  
STR/SSR具有分布广泛均匀、多态性丰富、遵循孟德尔共显性遗传、信息量大、检测简便等优点,STR/SSR分型快捷,结果准确,是非常重要的遗传标记,在遗传制图、连锁性分析、亲子鉴定、疾病基因定位和物种多态性研究等领域有着广泛的应用。 
微卫星位点通常通过PCR扩增,扩增产物通过电泳分析检测。ABI3730XL遗传分析仪对荧光标记DNA segments进行检测,加上分子量内标进行DNA片段长度计算,使STR分型变得快捷,结果也更加可靠,可以实现包括单倍型分析、遗传连锁分析或构建遗传连锁图谱等在内的多种应用。 

 

检测内容 

编号

服务名称

内容说明

周 期

MG301

微卫星 单色检测

单色检测,数据分析size等

5工作日

MG302

微卫星 多单色检测

多色检测,数据分析size等

5工作日

MG303

微卫星 AFLP跑板

上机检测,数据分析01矩阵等

5工作日

MG304

微卫星 STR跑板

上机检测,不分析数据等

5工作日

MG305

微卫星 普通引物合成

20D,PAGE纯化,不超过30碱基

5工作日

MG306

微卫星 荧光引物合成

FAM   2OD

HEX   20D

TMR   2OD

ROX   2OD

7工作日

MG307

微卫星 引物设计

不含验证

3工作日

检测流程 

技术优势 
1. 开发SSR多态性引物
针对基因组序列信息未知或不完整的物种,开发出多态性比较好的SSR引物。
1) 序列已知:根据数据库发布的全基因组序列或EST序列,得到微卫星序列信息。
2) 序列未知:采用磁珠富集的方法,对微卫星序列进行富集、克隆、测序,得到微卫星序列信息。 
2. 大量群体样本微卫星分析 
针对已开发出的多态性SSR位点,对大量群体样本进行微卫星分析,得到个体的基因型。 
3. 根据个体的基因型进行连锁分析 
1) 遗传连锁图谱。
2) 连锁不平衡分析。
3) LOH分析。 
检测结果示例 

我们的优势

1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。

2、专业的操作人员。

3、高规格实验室。

4、数据结果交付周期快。

5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。

服务流程

1、提交项目课题相关需求和资料。

2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。

3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。

4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。

5、开展实验,按期完成合同规定的内容。

6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。

咨询与订购

感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联系我们,我们将竭诚为您解答和服务。 

 

 

SNaPshot法基因分型介绍

SNaPshot法基因分型介绍

SNaPshot基因分型技术是由美国ABI公司开发的一种基于荧光标记单碱基延伸链终止反应原理的分型技术,主要针对中小通量的SNP分型项目。简单说来,在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临SNP位点5’-端的不同长度延伸引物和模板DNA的反应体系中,引物延伸一个碱基即终止,经ABI 3730XL测序仪检测后,根据峰的位置确定该延伸产物对应的SNP位点,而根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类,从而确定该样本的基因型。同时,通过多重PCR反应体系,可以同时检测多种SNP位点,通常可以用于10-35个SNP位点的同时分析。技术原理 

实验流程

1、样本采集。

2、PCR扩增。

3、PCR产物纯化。

4、毛细管电泳检测。

5、数据分析。

结果示例 

服务内容 
1、项目咨询,包括样本类型,检测SNP位点的选取。
2、DNA样本的提取和质检。
3、SNP分型引物的设计、合成与优化。
4、SNaPshot分型超多重PCR引物的设计、合成与优化。
5、数据分析和项目报告。
服务流程 
1、提交项目课题相关需求和资料。 
2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。 
3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。 
4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。 
5、开展实验,按期完成合同规定的内容。 
6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。 
我们的优势 
1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。 
2、专业的操作人员。 
3、高规格实验室。 
4、数据结果交付周期快。 
5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。 
咨询与订购 
感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联系我们,我们将竭诚为您解答和服务。 

 

MASS ARRAY 基因分型服务

MASS ARRAY 基因分型服务

质谱法基因分型技术简介

DNA质谱阵列基因分析系统以其通量高、自动化、灵活、结果准确、实验成本低廉等诸多优势成为了大学、医学生物学研究所、生物技术公司、制药企业、疾控中心等机构所推崇的研究工具。应用领域涵盖医学及转化医学、分子生物学、基因组学、表观遗传学、农业遗传育种及转基因技术等相关领域。

检测仪器信息

Sequenom MassArray时间飞行质谱生物芯片系统是为基因组学研究提供兼顾灵敏度和特异服务的中高通量技术平台,广泛地应用于遗传突变检测、SNP分型以及DNA甲基化定量分析研究,是目前唯yi采用质谱法进行直接检测的设备。

Sequenom MassArray系统反应体系为非杂交依赖性,不需要各种标记物,实验设计灵活,更可实现高达40重反应,是目前市场上拥有高性价比的产品。

Sequenom MassArray特定SNP位点检测服务采用专业的引物设计和基因分型软件,可对95%以上已被证实的SNP进行实验设计,特别适合于SNP位点小于200个,样本量大于500份的项目。实验过程无需荧光标记,大大降低每次基因型分析的成本。


 

检测原理
Sequenom MassARRAY® 分子量阵列技术是Sequenom 公司推出的世界上的基因分析工具,通过引物延伸或切割反应与灵敏、可靠的MALDI-TOF质谱技术相结合,经过PCR扩增,SAP酶处理, 延伸引物单碱基延伸,树脂除盐纯化, 芯片点样, 质谱检测等实验步骤,终使用Typer4.0 软件分析实验数据,获得基因分型结果。 
具体原理:Sequenom MassArray系统主要是利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS) 进行分析,即PCR扩增产物或者预处理样本在延伸单碱基后,将制备的样品分析物与芯片基质共结晶,将该晶体放入质谱仪的真空管,而后用瞬时纳秒 (10-9s) 强激光激发,由于基质分子经辐射所吸收的能量,导致能量蓄积并迅速产热,从而使基质晶体升华,核酸分子就会解吸附并转变为亚稳态离子,产生的离子多为单电荷离子,这些单电荷      离子在加速电场中获得相同的动能,进而在一非电场漂移区内按照其质荷比率得以分离,在真空小管中飞行到达检测器。 
检测应用 
中高通量SNP基因型分析
GWAS及二代测序验证
肿瘤体细胞基因突变谱分析
基因表达定量及目标基因CNV分析
DNA甲基化定位定量
病原体分子分型
技术优势
定制灵活:可以自由选择感兴趣的SNP位点一张芯片上,样本的数量和位置可以自由选择一张芯片上,样本和SNP位点的配对可以自由选择。
分析准确:直接检测待测物分子量,准确度超过99.7%。质谱技术灵活检测PCR实验失败或三等位基因的存在。可重复性高,每个样品将要检测到SNP位点适合精细定位和芯片实验的后续研究。
高通量检测:一张芯片上可完成384个样品的多重iPLEX GOLD实验;每个反应孔高可实现多达40重反应;每天可进行高达十万次基因型分析。
检测服务流程
1、客户提供DNA或者生物样本,并需要检测SNP位点(rs编号) 
2、设计引物(包括PCR扩增引物和单碱基延伸引物) 
3、样本制备PCR扩增、SAP处理、单碱基延伸 
4、点样制备检测用芯片阵列 
5、MALDI-TOF质谱检测 
6、数据分析、给出分型报告 

样本要求 
基因组DNA: 总量大于10 ng(视检测位点数量递增) 
A260/280在1.8-2.0 
A260/230大于1.8 
服务流程 
1、提交项目课题相关需求和资料。 
2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。 
3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。 
4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。 
5、开展实验,按期完成合同规定的内容。 
6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。 
咨询与订购 
感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联系我们,我们将竭诚为您解答和服务。 

 

 

KASP基因分型技术服务

KASP基因分型技术服务

KASP基因分型介绍 
KASP(Kompetitive Allele-Specific PCR),即竞争性等位基因特异性PCR,原理上与TaqMan检测法类似,都是基于终端荧光信号的读取判断,每孔反应都是采用双色荧光检测一个SNP位点的两种基因型,不同的SNP对应着不同的荧光信号。 
KASP技术与TaqMan法类似,它与TaqMan技术不同的是,它不需要每个SNP位点都合成特异的荧光引物,它基于*的ARM PCR原理,所有的位点检测终都可以使用通用荧光引物进行扩增,这降低了KASP技术的试剂成本,既有准确度,又降低了成本,更具SNP位点适用性,因此在医学、农学检测方面KASP技术都有很好的应用潜力,如癌症、代谢疾病、心血管疾病、糖尿病、动植物育种、水产养殖等研究。 

技术原理 

KASP反应包括Primer Mix和Master Mix两种主要成分。Primer Mix由两条末端碱基不同的等位基因正向引物与一条反向引物构成,两条正向引物5’端分别连有不同序列的检测引物序列。Master Mix包含两条带有不同荧光的检测引物。

1、变性模板与Primer Mix中相匹配的引物结合并退火,延伸后序列被加上了检测引物的序列。

2、等位基因特异性的末端序列的互补链合成。

3、带有不同荧光的两条检测引物与互补链结合,特异序列对应的检测引物随PCR反应指数性扩增,相应荧光信号被检测。
4、数据分析。

实验过程: 

实验结果: 

KASP技术优势

1、只需要合成两条通用荧光探针,节省了探针的合成费用。

2、支持低、中、高通量研究,以及单个重复实验。

3、对PCR仪和荧光定量仪等仪器设备具有良好的兼容性。

我们的优势

1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。

2、专业的操作人员。

3、高规格实验室。

4、数据结果交付周期快。

5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。

服务流程

1、提交项目课题相关需求和资料。

2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。

3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。

4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。

5、开展实验,按期完成合同规定的内容。

6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。

咨询与订购

感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联系我们,我们将竭诚为您解答和服务。 

HLA分型技术服务

HLA分型技术服务

简介
HLA(Human lymphocyte antigen,人类白细胞抗原,也成主要组织相容性抗原,MHC)位于6号染色体短臂上,长约4000kb,由一群紧密连锁的基因组成,是目前已知的多态性高的抗原系统,化学本质为一类糖蛋白,由一条α—重链(被糖基化的)和一条β轻链非共价结合而成,肽链的氨基端向外,羧基端穿入细胞质中,中间疏水部分在胞膜。HLA研究涉及免疫学、生物学、遗传学、分子生物学、医学等多个学科,并已经发展成为一个独立的学科。HLA分型基于二代测序进行,通过对所要分析的HLA基因片段进行PCR扩增,然后对HLA片段进行测序。基于基因检测的HLA分型依赖于合理的技术方案,准确的分型结果,对于疾病早期诊断,靶向用药有潜在的指导意义。
迈基生物主要通过PCR-序列特异性引物扩增技术(PCR-SSR)和PCR-直接碱基序列分析基因分型技术(PCR-SBT)两种分型方法。

应用领域
医学领域,如qi官移植配型,某些遗传病的重要标志,法医鉴定等

技术流程

二代测序分型的优势
检测通量高
数据质量严格把控
高分辨数据库

客户提供
血液样本≥2ml(加入抗凝剂或EDTA,不建议使用肝素钠抗凝剂)
干冰运输血液样本
采样管上注明血样姓名、性别、采血日期
其他特殊要求请注明

我们的优势
经验丰富的技术团队
一站式服务流程
分型结果准确、、专业

服务流程
1、提交项目课题相关需求和资料。
2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。
3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。 
4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。
5、开展实验,按期完成合同规定的内容。
6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等。

咨询与订购
感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联系我们,我们将竭诚为您解答和服务。