CM离子交换色谱填料SepFast 6HF Plus产品特性

1.简介

CM离子交换色谱填料SepFast 6HF Plus是一组弱阳离子交换色谱填料。CM离子交换色谱填料SepFast 6HF Plus结合容量和结合动力学高于IEX  SepFast  6HF系列。CM离子交换色谱填料SepFast 6HF Plus特别适用于需要增加结合能力的生物分子的一般大规模纯化。

CM离子交换色谱填料SepFast 6HF Plus在配体密度、负载量和单个组分的分离能力之间进行了平衡设计，适用于大规模生物制造应用。

CM离子交换色谱填料SepFast 6HF Plus的基质由高度交联的 6%琼脂糖和葡聚糖制成，具有优异的流动性。它对生物加工行业中遇到的大多数化学条件都非常稳定。

2.产品特性

表1  CM SepFast 6HF Plus的特性

*测试条件：10  mM缓冲液 pH  7.5，上样5 mg/ml 蛋白质，停留时间5分钟，50%穿透。

**在 32  mm内径色谱柱中，床高 15 cm，室温下用水测量。

图1 IEX  SepFast  Media的压力–流动特性

（备注：将基础基质填充到32 mm内径的柱子中，最终床⾼为15 cm。流动相是去离子水。测试在室温下进行）

图2 滴定曲线

3.方法优化

建议在载量、流速、结合pH值、结合离子强度、洗脱速度和梯度等参数之间进行筛选。由于CM离子交换色谱填料SepFast 6HF Plus的快速孔隙可及性，结合步骤可以在比洗脱步骤更快的流速下完成。建议特别注意优化洗脱条件以获得最佳分离能力。

强离子交换色谱填料可以在较宽的pH范围内保持其电荷（并因此保持其功能），而弱离子交换色谱填料的离解程度和离子交换容量随pH值而变化。因此，如果使用弱离子交换色谱填料，优化pH值更为关键。

通常，在优化方法时，平衡组分分离度与工艺产量是主要考虑因素。此外，对于不稳定或对剪切力敏感分子的纯化，需要优化操作条件以平衡产量和对目标分子可能造成的损害。

4.装柱

CM离子交换色谱填料SepFast 6HF Plus由高度交联的珠状琼脂糖制成，具有出色的机械强度。该色谱填料可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何类型的色谱柱中。典型的包装压力高达3 bar。

5.保养

根据不同的应用，色谱填料可能会被多次使用。如需重复使用，请参阅以下说明。

（1）再生

每次运行后，用高离子强度溶液（例如1M NaCl缓冲液）或增加pH 值。

（2）就地清洗  (CIP)

CIP是一种去除强结合物质的程序，例如再生后残留在吸附剂表面的脂质、内毒素和变性蛋白质。定期 CIP 可防止污染物在填充床中积聚，并有助于保持色谱柱性能。

应根据存在的污染物类型为每个过程制定具体的 CIP程序。CIP 的频率取决于各个应用的性质。

以下信息可作为一般指导：浓度高达2 M的盐可用于清除因离子相互作用而结合的杂质。疏水性结合的污染物可以通过以下试剂去除：1 M NaOH、低比例的非离子洗涤剂（例如0.1-2%）、碱性或酸性条件下的30%  异丙醇（例如在乙酸或磷酸存在下）。也可以探索上述试剂的组合。一般来说，孵育时间应该更长（例如从 30 min到2 h），以确保污染物WAN全解离。

（3）消毒

建议使用接触时间为1 h的0.5‑1.0 M NaOH进行消毒。

6.储存

CM离子交换色谱填料SepFast 6HF Plus应储存在20%乙醇中（强阳离子交换色谱填料含有0.2 M NaAC）以防止微生物生长。将色谱填料存储在4℃到30℃的温度下。使用前，用至少5床体积的运行缓冲液来平衡色谱填料。

7.更多信息

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8.订购信息