重点推介:Meridian可风干qPCR/RT-qPCR预混液(MDX082/MDX095)

重点推介:Meridian可风干qPCR/RT-qPCR预混液(MDX082/MDX095)

可风干RT-qPCRqPCR预混液是不含甘油,含有优化的风干辅料,可与风干和烘干兼容的预混液配方。该产品适用于POC诊断平台或高通量自动化平台的多重反应,可与不同的风干方法兼容,制造室温稳定的反应混合液。

对痰液样本中PCR抑制剂有高耐受性

将小鼠RNA加入到含有10%5%0%痰液样本的样品保存液(UTM)中, 使用可风干一步法RT-qPCR预混液对该样本进行扩增。结果显示,可风干一步法RT-qPCR预混液(MDX095)扩增性能良好,对痰液和样品保存液中的抑制剂表现出高耐受性。

风干后酶仍保留完整活性

 

使用可风干一步法RT-qPCR预混液对10倍稀释的小鼠RNA进行扩增,对比湿液和风干液活性。结果显示,与新鲜制备的湿液相比,风干后酶活性和灵敏度没有降低,并且达到检测的分析限度。

多重反应中显示高效和高灵敏度扩增

使用可风干一步法RT-qPCR预混液对不同RNA病毒(甲型流感病毒、诺如病毒和轮状病毒)进行多重扩增。 结果表明,可风干预混液MDX095(红色)相较于普通的RT-qPCR预混液(黑色)检测病毒RNA的性能有所提高。

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重点推介:Meridian抗抑性qPCR预混液(MDX013)

重点推介:Meridian抗抑性qPCR预混液(MDX013)

        基于对肿瘤生物标志物特定分析的qPCRRT-qPCR技术具有较高灵敏度,目前被广泛用于液体活检CTC ctDNA的鉴定。相对于基因测序来说,PCR技术更快速、易操作、成本低。然而CTCctDNA的分离通常需要新鲜血液样品或其他能够立即处理的样品,并要求短时间内对其分析,这在某种程度上限制了应用。

迈迪安公司推出的抗抑性qPCR预混液(MDX013)是开发检测CTCctDNA的液体活检产品的理想选择。这两种预混液可以从血液、尿液或唾液等样本中直接扩增目标DNARNA。在有抑制剂存在的情况下,使用这两种抗抑性产品可以提高qPCR效率,便于开发出更简单、快速、灵敏的癌症生物标志物检测产品。

 

通过对含有多种已知PCR抑制剂的样本,如全血和生物 液体以及粗组织裂解液中扩增,每反应中添加20%样本,测定PCR反应效率。 结果表明,在有多种PCR抑制剂存在时,抗抑性qPCR预混液的反应效率保持在90-110%之间。

对不同液体样本类型(尿液,牛奶和脊髓液)的有效扩增

 

将基因组DNA连续稀释10倍后加入脑脊液、人尿或牛奶中,使用抗抑性qPCR 预混液(绿色)KAPA Probe Force 预混液(红色)DNA扩增。

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重点推介:Meridian可风干植物直扩qPCR预混液(MDX116)

重点推介:Meridian可风干植物直扩qPCR预混液(MDX116)

        迈迪安的可风干植物直扩qPCR预混液(MDX116)是一种无甘油、抗抑性的预混液,专门为开发从植物样本中免核酸提取、进行DNA直扩的常温稳定型检测设计的一款qPCR试剂,适用于从植物裂解液中直接进行DNA扩增和对低量污染物的高灵敏度识别,具有多重检测中高度重现性的稳健扩增。

可风干植物直扩qPCR预混液是市面上shou款用于开发常温稳定的植物DNA直扩的产品。它结合了抗抑性和可风干的优势,为开发高灵敏度,低成本的植物检测提供了理想的解决方案。一小块植物叶片在SDS裂解液、碱性裂解液或水中加热裂解后直接加入风干的反应预混液中即可进行扩增反应,获得高灵敏度和可重复性的检测结果。

可风干植物qPCR预混液在干燥前后均能从使用不同裂解液的植物裂解样本中进行高效扩增:

将一片番茄叶穿孔样本分别加入 (A) 26 μL 0.1% SDS裂解液 (B) 碱性裂解液 20 μL 0.2M NaOH +6 μL 2M Tris-HCl, pH 7.5)在95 °C加热5分钟裂解。分别使用干燥前后的可风干植物直扩qPCR预混液对含有5% 25% 的植物裂解液直接进行扩增,检测番茄Hsp21基因,对比预混液干燥前后的扩增性能。

左图:使用SDS裂解液,棕色为湿液扩增曲线,橙色为使用干燥预混液的扩增曲线。

右图:使用碱性裂解液,绿色为湿液扩增曲线,橙色为使用干燥预混液的扩增曲线。

结果表明,可风干植物qPCR预混液在干燥前后均能从使用不同裂解液的植物裂解样本中进行高效扩增。

对低量污染物的高灵敏度识别:

在可风干植物直扩qPCR预混液中加入水稻ATPe引物和探针,然后将混合物进行风干。分别向40%的番茄叶碱性裂解液中加入1000拷贝(棕色)100拷贝(橙色)10拷贝(绿色)1拷贝(蓝色)的水稻基因组DNA,然后用该样本复溶风干的反应混合物,直接进行qPCR扩增。结果显示,可风干植物直扩qPCR预混液zui低可以检测到番茄裂解液样本中1个拷贝的水稻ATPe ,并且达到100%的扩增。

重检测中高度重现性的稳健扩增:

将水稻ATPe基因(每反应100个拷贝)qPCR提取内控DNA(MDX027)添加到25%的番茄叶碱性裂解液中,然后用来复溶干燥的可风干植物直扩qPCR预混液,对番茄Hsp21基因(棕色)、水稻ATPe(绿色)qPCR提取内控DNA(橙色)直接进行扩增,每个样本均有12个重复。结果显示了可风干植物直扩qPCR预混液在多重反应中的高度重现性。

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重点推介:Meridian高特异性高保真Pfu酶预混液(MDX006)

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Meridian高特异性高保真Pfu是一种基于核酸适配体的热启动高保真DNA聚合酶,非常适合常规测序、NGS文库扩增和用于克隆和蛋白表达的DNA片段扩增。Pfu 高保真热启动聚合酶的高度持续合成能力给PCR 反应提供了非常高的产量和灵敏度,以及针对GC-AT –富集靶点的出色扩增。DNA适配体可逆地与聚合酶结合,在室温下抑制其活性,并在室温条件下防止非特异性扩增。

MeridianPfu酶预混液具有高灵敏度和高产量的特点,对1.2 kbF8基因片段进行PCR扩增。 对人类基因组DNA进行5倍序列稀释。所有反应均根据不同供应商推荐的条件设置,标记物为HyperLadder™ 50bp(BIO-33054).结果表明,使用Pfu高保真热启动聚合酶扩增DNA时,产物的产量和敏感性都更高。

对高GC含量 (20-70%) DNA的高效扩增

对人类基因组DNA以下基因进行扩增:RBB8 161bp 29%GC)、RBB8 450bp32%GC)IL10 417bp 44% GC)Mpex418bp 55%GC)、 EGFR 525 bp 62%GC), EGFR380 bp 65% GC)。 标记物为HyperLadder™ 50 bp(BIO-33054)。结果表明,Pfu 高保真热启动聚合酶对所有GC含量的扩增效率相似,证明了它适用于需要低GC偏差的扩增。

适用于含有高抑制剂样本的多重扩增

20%全血样本中6个靶标进行多重PCR扩增。Pfu热启动高保真聚合酶对含有EDTA的全血显示出更好的扩增效率。

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