培养基中各类添加成分所具有的作用是什么?

培养基中各类添加成分所具有的作用是什么?

细胞培养基是供给细胞营养、维持细胞生长和增殖的多种营养物质的混合物,基础细胞培养基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。人工合成培养基使用时还需添加一定量的血清使细胞生长和繁殖。培养基中各类添加成分所具有的作用是什么?一起学习下吧!

L-谷氨酰胺 (L-Glutamine)
是细胞培养液体环境中所必需的一种营养成分,是细胞生长的必须氨基酸,为培养的细胞提供重要的能量来源。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。但其在水溶液中不稳定,易降解产生对细胞有害的氨;而氨对于一些细胞具有毒性。

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)

在水溶液中十分稳定,不会自发降解,其被细胞利用的机制为:细胞在培养时会向培养液中释放一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰胺逐渐水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,这种将低浓度水平的L-谷氨酰胺逐渐释放到培养液中的过程类似于流加培养策略,可以提高L-谷氨酰胺的利用率,且不会产生多余的氨,更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺适用于所有的细胞,几乎无需适应,并且可以延长细胞的培养时间,减少传代次数,细胞活性降低得更慢。L-丙氨酰-L- 谷氨酰胺的添加可能导致延滞期略微延长,其原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间,但不会影响后续培养。

丙酮酸钠(Sodium pyruvate)

可以作为细胞培养中的替代碳源,在葡萄糖不足的时候,细胞可以代谢丙酮酸钠,保证细胞更好地生长。

HEPES

是一种常用非离子两性缓冲液,能有效控制pH在6.8~8.2范围,尤其在pH7.2~7.4具有较好的缓冲能力。在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定pH值。因此是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,培养基添加HEPES后能够较长时间保持恒定的pH范围,可以有效的防止培养液pH波动较大对细胞生长状态产生的不利影响。与其他缓冲液如PBS相比,HEPES在维持细胞培养基的pH值方面具有更高的稳定性。

酚红

酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低pH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的pH值时使培养液呈紫色,pH值7.2~7.4时为红色,适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类激素 (特别是雌激素)的作用,因此在用到雌激素敏感的细胞时 (如乳腺组织),最好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。

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细胞培养之胎牛血清的作用跟功效

细胞培养之胎牛血清的作用跟功效

细胞培养是一种重要的生物学实验技术,它可以使人们更好地了解细胞的生理特性和病理变化。胎牛血清是从胎牛胎儿脐静脉或心脏采集血液,经过一系列加工处理后得到的一种生物学制品。胎牛血清的生产流程包括采集血液、分离血清、放置、过滤、瓶装和灭菌等步骤,其成分要求包括高蛋白质含量、低内毒素、无病原微生物和无抗生素残留等。在细胞培养过程中,胎牛血清被广泛应用于培养基中。那么你知道胎牛血清在细胞培养中的作用与功效吗?让我们一起来看看吧!
胎牛血清作为一种天然的生长因子,含有丰富的营养物质、激素和生长因子等成分,能够为细胞提供必需的营养和生长条件,促进细胞的增殖和分化。胎牛血清中的营养成分包括蛋白质、脂肪、碳水化合物等,这些成分不仅可以满足细胞的基本代谢需求,还能够促进细胞的生长和分裂,具有极为重要的功能:
1. 提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3. 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4. 胎牛血清中粘附因子成分与细胞培养容器表面分子相互作用促进细胞生长速度和活力。
5. 起酸碱度缓冲液作用。
6. 提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
除了提供营养物质,胎牛血清还含有多种生长因子,如表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)等,这些因子可以直接作用于细胞表面的受体,通过信号转导途径调控细胞的增殖和分化过程。此外,胎牛血清中还含有丰富的抗体,可以中和培养基中的病毒和细菌,保护细胞免受感染。

然而在使用胎牛血清也存在一些问题。胎牛血清的来源不稳定,可能存在批次间的差异,影响细胞培养的结果。中科百抗胎牛血清在GMP净化车间全自动灌装生产,经过三级0.1μm过滤,在严格质量控制体系下,经过病毒、支原体、内毒素等多项测试,无细菌、真菌、病毒、支原体及黑胶虫等污染,内毒素含量≤10EU/ml,血红蛋白含量≤200mg/L,批量大、批间差小,具有高质量和高稳定性。欢迎咨询!
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胎牛血清的功能与作用是什么?

胎牛血清的功能与作用是什么?

胎牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,其中含有丰富的细胞生长所必须的营养成分,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。那么你知道胎牛血清的功能与作用是什么吗?让我们一起来看看吧!

一、功能

1. 提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。

2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。

3. 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。

4. 是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5. 起酸碱度缓冲液作用。

6. 提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。

二、作用

1. 血清提供:营养和能量来源;生长和粘附因子;肽和类固醇激素;载体蛋白。

2. 保护细胞:免受蛋白酶、毒性物质、PH值波动、机械剪切力、氧化及自由基的损伤。

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