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NUGC-4人胃癌细胞的使用方法及注意事项

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NUGC-4人胃癌细胞的使用方法及注意事项

一、产品简介

1、产品名称：NUGC-4人胃癌细胞

2、英文名称：NUGC-4

3、品牌：ACCEGEN

4、货号：ABC-TC0862

5、种属来源：人

6、组织来源：胃

7、细胞形态：上皮细胞样

8、生长特性：贴壁生长

9、细胞含量：＞1×106个/mL

10、规格：1 mL冻存管包装

11、细胞简介：NUGC-4源自人胃印戒细胞癌。印戒细胞癌（Signet ring cell carcinoma，SRCC），又称黏液细胞癌（mucinous cell carcinoma，MCC）是上皮组织的恶性肿瘤，组织学外观特点是可以见到印戒细胞，因癌细胞看起来像印章戒指一样，所以被叫做“印戒细胞癌”。

二、细胞培养方法

1、培养前准备

（1）培养器具：推荐使用25 cm2培养瓶或60 mm培养皿（或更小）。

（2）培养基：准备适合培养NUGC-4人胃癌细胞的培养基（具体咨询上海金畔生物科技有限公司客服推荐培养基），建议用量5 mL（或更少）。

2、细胞解冻

将包装中的冻存管取出后立即放在不高于37℃的水中，并在2分钟内摇晃解冻。

3、细胞复苏

（1）取10ml培养基置于离心管中，用70%酒精或阳离子洗涤剂渗透纱布消毒冻存管，用消毒纱布包裹管身，拧开管盖后，将细胞悬浮液转移到离心管中；

（2）1000 rpm离心3分钟，弃掉上清液；

（3）将细胞重新悬浮在5ml上述培养基中（不清洗细胞）。在25 cm2的培养瓶或60 mm的培养皿中进行培养。

4、细胞传代

在传代之前，确保细胞增殖，因为过度稀释可能导致细胞死亡，尤其是血细胞和淋巴细胞。

5、细胞冻存

待NUGC-4人胃癌细胞生长状态良好时，尽早进行细胞冻存。

三、注意事项

1、收到细胞后首先观察冻存管是否完好，若有问题请及时和我们联系。

2、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清使用比例等细胞培养相关问题，确保细胞培养条件正确。

3、请用相同条件的培养基进行细胞培养。

4、细胞培养过程中，注意保持无菌操作。

5、传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

6、由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，上述细胞培养方法仅供参考。

7、细胞仅供科研使用。

四、产品储存和运输

1、产品储存：冻存细胞保存在液氮中，用冻存管进行保存，收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行细胞复苏，冻存细胞可保存于-80℃。

2、产品运输：于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输。

人胃癌外周血单个核细胞

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上海金畔生物科技有限公司提供人胃癌外周血单个核细胞 ，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
人胃癌外周血单个核细胞

详情介绍

product name：Human Stomach Cancer Peripheral Blood Mononuclear Cells（人胃癌外周血单个核细胞）；

cat no：ABC-TC4358；

Size/Quantity：1 vial；

Biosafety Level：1；

Shipping Info：Dry Ice；

Storage：Liquid Nitrogen；

Description：Included Diagnoses: Adenocarcinoma (including all subtypes) and Squamous Cell Carcinoma (including all subtypes), Neuroendocrine tumors of the stomach, Carcinoma of the stomach.；

Quality Control：All cells test negative for mycoplasma, bacteria, yeast, and fungi；

Application：For research use only.

上海金畔生物代理Accegen在中国的业务。

上海金畔生物科技有限公司：

一、辐射五大服务方向：

国内试剂耗材经销代理；

国外试剂订购（直订或境外代理）；

基因组测序（二代、二代+三代）；

基因分型（SNP检测）：低/中/高通量项目；

生物样本运输；


二、多家代理品牌，涉及30多种，经营代理500多个品牌：

Accegen、Intact Genomic、Sigma、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific……

所有生物试剂耗材都可以进口，特别是冷门品牌，价格优，货期短，可加急。大部分客户我们提供货到付款服务，上海金畔自成立依靠过硬的服务和良好的信誉与各大企事业单位、科研单位建立长期合作。

专业订购国内外试剂耗材，常备现货，一手货源，欢迎合作

                        

胃癌3D类器官培养基

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胃癌3D类器官培养基

详情介绍

产品名称：胃癌3D类器官培养基（Gastric Carcinoma Organoid Medium）
产品说明：胃癌3D类器官培养基（Gastric Carcinoma Organoid Medium）是一种为促进人源胃癌类器官体外形成和扩增而开发的培养基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、生长因子、微量矿物质等。该培养基的*配方可以提供一个理想人源胃癌类器官体外培养环境，选择性地促进体外人源胃癌类器官的生长。

产品优势：
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤特征

(4) 药敏结果与临床数据接近

使用说明：
◉实验前准备
（1）15mL无菌离心管、1.5mL离心管、24孔细胞培养板、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入生物安全柜中紫外照射30min。
（2）提前30min从4℃冰箱取出胃癌类器官培养基平衡至室温，提前1h从-20℃冰箱取出所需体积的基质胶冰上融化。
◉胃癌类器官培养
（1）将获取的胃癌原代细胞悬液计数，根据计算好的体积吸取细胞悬液加入预冷的1.5 mL离心管中。
（2）补齐预冷的培养基至所需体积，将预冷后的细胞悬液加入等体积的基质胶中轻轻混匀（全程冰上操作），使得胃癌原代细胞终浓度为5×106个细胞/毫升。
（3）然后将细胞与基质胶的混合液按照50μL/孔呈半球形点胶于24孔板。
（4）将培养板放入5%CO2 37 ℃培养箱中30min，待基质胶*凝固。
（5）沿孔壁每孔缓慢加入500μL预先恢复至室温的类器官培养基，置5%CO2 37℃培养箱培养。
（6）3天后镜下观察类器官形成情况，粒径大于30~50μm即认为类器官已经形成，每3天更换一次培养基进行培养，持续观察类器官大小，镜下观察大部分类器官大小均大于30~50μm且大小不再增大即可收集类器官进行后续实验。
◉胃癌类器官收集
（1）弃培养基，每孔加入200μL基质胶解离试剂，室温放置1min。
（2）轻轻吹打混匀，收集至15mL离心管中，50rpm恒温震荡解离10-20min，解离之后1500rpm离心3 min，轻轻吸去上清，待用。
◉胃癌类器官传代
（1）收集的类器官，加入适量的消化酶，37℃，200rpm消化（具体时间根据类器官大小和数量决定，以肉眼可见颗粒明显减小一半为准，可中间取消化的类器官显微镜观察，类器官消化至3~10个细胞集合体理想）。
（2）消化*后1500rpm离心3min，弃上清，使用清洗液重悬后1500rpm离心3min。
（3）加入预冷的胃癌类器官培养基进行重悬，计数，按照培养步骤操作继续培养。
注意事项：
1.本产品在使用前需平衡至室温。
2.样本需为肿瘤组织，且肿瘤细胞比例越高（>50%），类器官培养成功率越高;
3.使用产品时应注意无菌操作，避免污染。
4.为保持本产品的愚佳使用效果，不宣将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。5.类器官培养过程要轻柔，避免基质胶凝固后散胶。
6.请于保质期内使用本产品，超出保质期，必须放弃使用。
7.本产品仅用于科研用途，不能用于体外诊断。

原代胃癌*培养基

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原代胃癌*培养基

详情介绍

产品名称：原代胃癌*培养基（Human Gastric Carcinoma Cell Epithelial Cell Medium）
产品说明：原代胃癌*培养基（Human Gastric Carcinoma Cell Epithelial Cell Medium）是一种为促进胃癌原代细胞体外生长而设计的培养基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系，在5%CO2/95%空气的培养箱中平衡时，pH值为7.4。该培养基的配方，可以提供一个理想平衡的营养环境，选择性地促进体外人胃癌原代细胞的生长。

产品优势：
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果与临床数据接近

使用说明：
◉使用前准备
（1）DMEM/F12培养基稀释后的基质胶（Corning#356231）（100倍稀释）。
（2）15mL无菌离心管、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入超净工作台中紫外照射30min。
（3）提前30min从4℃冰箱取出*培养基平衡至室温。
◉胃癌原代细胞培养
（1）至少提前半小时使用稀释后的基质胶预铺培养瓶/板，使用前吸干基质胶，用稀释液润洗一遍。
（2）将分离并计数后的细胞悬液参考表1中细胞数量接种于培养瓶/板，补加*培养基至所需体积，轻轻摇晃混匀，表面消毒后置培养箱，37℃、5%CO2条件培养。
（3）原代细胞初次接种后2-3天内勿动（利于细胞贴壁），第一次换液建议换半液。

◉胃癌原代细胞传代
（1）镜下观察细胞形成克隆，且汇合度达到80~90%时即可传代。
（2培养箱中取出细胞，弃旧培养液，加入适量0.05%胰酶，37 ℃孵育，5min后拿出轻拍培养瓶/板侧面，显微镜下观察细胞消化情况。
（3）细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用原代细胞终止培养基终止消化，并将细胞转移至离心管中，1500 rpm, 3min。
（4）弃上清，以1-2mL*培养基重悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板，补加*培养基至所需体积，轻轻摇晃混匀，表面消毒后置培养箱，37℃、5%CO2条件培养。其他步骤同上。
注意事项：

  1. 本产品在使用前需平衡至室温。

  2. 使用产品时应注意无菌操作，避免污染。

  3. 本产品中不含血清，含有原代细胞专用抗生素，不用额外再添加双抗，可直接使用。

  4. 为保持本产品的理想使用效果，不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。

  5. 请于保质期内使用本产品，超出保质期，必须放弃使用。

  6. 本产品仅用于科研用途，不能用于体外诊断。

  7. 建议使用术中样本以获得最大培养成功率。

原代胃癌条件重编程培养基

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原代胃癌条件重编程培养基

详情介绍

产品名称：原代胃癌条件重编程培养基(Human  Gastric Carcinoma Conditional Reprogramming Medium)
产品说明：原代胃癌条件重编程培养基（Human Esophagus Carcinoma Conditional Reprogramming Medium）是一种为促进人源胃癌原代细胞体外生长而设计的培养基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。该培养基产品基于碳酸氢盐的缓冲体系，在5%CO2/95%空气的培养箱中平衡时，pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个理想平衡的营养环境，选择性地促进体外人源胃癌原代细胞的生长。

产品优势：
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果宇临床数据接近

使用说明
◉使用前准备
（1）y射线照射过的NIH-3T3细胞（40Gy辐照）。
（2）15mL无菌离心管、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入超净工作台中紫外照射30min。提前30min从4℃冰箱取出原代细胞培养基平衡至室温。
◉胃癌原代细胞培养
（1）初次分离的胃癌小样本细胞悬液一般无需计数，直接种入12孔板中。
（2）胃癌术中样本过70微米筛网后计数，按照表1中细胞数接种在合适的培养器皿中，加入y射线辐照后的NIH-3T3细胞（添加滋养细胞数量如表1和表2所示）。
（3）原代细胞初次接种后2-3天勿动（利于细胞贴壁），培养过程中若培养基颜色变黄但细胞未长满时可换半液，镜下观察细胞未长满但3T3细胞已不足时，适量补充γ射线辐照后的3T3细胞（一般补加初始数目的一半）。

注∶针对实体瘤样本，细胞粒径大于10微米进行计数;倍增时间>48小时则定义为增殖较慢的细胞;对于增殖较快细胞，可以综合倍增时间、接种器皿的规格以及培养周期来估算接种的细胞数量;表格供参考，具体实验具体对待。
◉胃癌原代细胞传代
(1) 镜下观察细胞形成克隆，且汇合度达到80~90%时即可传代。
(2) 培养箱中取出细胞，弃旧培养液，0.25%胰mei洗涤30秒后吸尽，再加入适量0.05%胰酶，37℃孵育，5 min后拿出轻拍培养瓶/板侧面，显微镜下观察细胞消化情况。
(3) 细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用终止培养基终止消化，并将细胞转移至离心管中，1500rpm离心3 min。
(4) 弃上清，以1-2mL相对应的原代细胞培养基重悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板，加入y射线辐照后的NIH-3T3细胞（不同规格培养瓶/板底面积、接种原代细胞数量、添加滋养细胞数量如表1或表2所示）。
(5) 补加原代细胞培养基至所需体积，轻轻摇晃混匀，表面消毒后置培养箱，37℃、5%CO2条件培养。
注意事项：
1.本产品在使用前需平衡至室温。
2.本产品中含有胎牛血清和原代细胞专用抗生素，如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可直接使用。
3.为保持本产品的理想使用效果，不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。
4.请于保质期内使用本产品，超出保质期，必须放弃使用。
5.原代细胞初次接种时会贴壁较慢和贴壁不牢，若无必要，尽量减少取出观察的次数，建议2-3天一次。
6.传代消化时切记不要消化过度，对细胞造成损伤，影响细胞状态。
7.接种细胞时注意细胞密度，不可过稀或过密。
8.样本需为胃癌术中或内镜样本，且肿瘤细胞比例越高（至少>50%），培养成功率越高，不推荐用于少量样本（如循环肿瘤细胞）的培养。
9.使用产品时应注意无菌操作，避免污染。
10.本产品仅用于科研用途，不能用于体外诊断。