【简单介绍】
【详细说明】
美国伯乐BIORAD Agarose琼脂糖 #161-3111
回复
标签归档：琼脂糖
琼脂糖核酸电泳，选择紫外还是蓝光？
琼脂糖核酸电泳，选择紫外还是蓝光？
DNA分子是一种自身不会发出荧光的大分子，需要相应的核酸分子染料结合到DNA分子的大沟处，通过激发光激发DNA –核酸染料复合物，复合物会发出一束强荧光，通过相应的滤光片过滤得到单波长的发射光，通过照相机或者肉眼捕获就能够检测到相应的DNA分子。那么琼脂糖核酸电泳要选择紫外还是蓝光呢？让我们一起来看看吧！
从核酸电泳发展至今，绝大多数的分子生物学实验室选择溴化乙锭（EtBr，也简称EB）作为核酸分子染料，由于EB的光谱特性，又不得不选择紫外光作为激发光。EB分子因其分子量较小，容易透过细胞膜，因此是一种致癌性ji强的有机小分子。而紫外光（UV）照射也会诱发基因突变，不仅会引发实验样品的基因突变，也会对实验人员造成一定的伤害。
为了解决EB分子的致癌问题，科研工作者通过有机合成技术将两个EB分子通过有机分子链连在了一起，解决了EB分子因分子量比较小容易通过细胞膜的问题，连在一起的分子被称为GelRed。这虽然解决了染料相对安全的问题，可激发光依然是UV，不能够从本质上解决对实验样品和实验操作者自身的安全问题。
事实上，除了EB和GelRed这两种以UV为激发光的核酸分子染料，还存在另一类核酸分子染料，如：GelGreen、SYBR Green、SYBR Gold、LED Green、SYBR Safe、GoldView等以480nm蓝光为激发光的核酸染料，这类染料分子量相对较大，细胞膜通透性较差，因此对实验人员带来的危害较小，相对EB分子是一种较安全的核酸分子染料。
由于波长470nm蓝光属于可见光，不会对实验样品造成破坏，也不会对实验人员造成危害，因此470nm的蓝光搭配安全核酸分子染料能够zui大程度降低核酸琼脂糖凝胶电泳带来的潜在危险。
更多有关琼脂糖核酸电泳要选择紫外还是蓝光的问题，请联系上海金畔生物科技有限公司：
CNBr活化磁性琼脂糖色谱填料产品特性
CNBr活化磁性琼脂糖色谱填料产品特性
CNBr活化磁性琼脂糖色谱填料是一种磁性琼脂糖树脂，可以用于制造各种磁性亲和色谱色谱填料，适用于小规模和大规模纯化应用。
CNBr活化磁性琼脂糖色谱填料在制备和使用定制亲和色谱填料方面具有良好的记录。将生物特异性配体与CNBr 活化的琼脂糖偶联是一种广泛使用、成功且有据可查的技术。偶联反应是自发的、快速的并且易于进行。不需要有毒化学品或特殊设备。
应用领域包括蛋白质、多肽和核酸的固定化。
1. 属性
CNBr活化磁性琼脂糖色谱填料(4 HF)由高度交联的4%磁性琼脂糖制成。它可以在更严苛的条件下操作使用，因此可以应用低pH值和某些高浓度有机溶剂。
由于琼脂糖具有出色的亲水性和低非特异性结合特性，长期以来一直用于色谱分离。这些颗粒具有开孔结构，对大蛋白质分子具有出色的传质性能。
基础基质与溴化氢（CNBr）反应生成活性基团，这些活性基团与待固定分子中的伯胺基团反应。CNBr活化磁性琼脂糖色谱填料以含有添加剂的冻干粉形式提供。
表1 CNBr活化磁性琼脂糖层析介(4HF)的特性
|
可耦联基团 |
-NH2 |
|
基质 |
高度交联的4%琼脂糖（4HF） |
|
粒径 |
50-150 μm |
|
膨胀系数 |
3-5 ml/g粉末 |
|
活化水平 |
＞3 mg BSA/ml medium |
|
pH稳定性 |
4-11（具有配体依赖性） |
|
化学稳定性 |
对偶联配体能够接受的所有常用的水性化学品稳定 |
|
保存 |
4℃-8℃ |
2. 配体固定化
2.1 培养基的预处理
CNBr活化磁性琼脂糖色谱填料以含有添加剂的冻干粉末形式提供。这些添加剂必须在偶联反应前洗掉。使用足够量的低 pH 洗涤液以保持反应基团的活性。
2.1.1 称取所需的粉末（1 g干粉提供约3 ‑ 5 ml固定体积的色谱填料）并将其悬浮在预冷的 1 mM HCl中（1 g 干粉使用10 mL 1 mM HCl）。让色谱填料在低温下膨胀30分钟。
2.1.2 在重力流或受控慢流下，在过滤装置中用冷的1 mM HCl 清洗凝胶。所需酸的总体积为15到 20 个凝胶体积。洗涤后的色谱填料应立即用于以下偶联步骤。
2.2配体偶合
以下是一般的配体偶联程序。
2.2.1 将目标配体溶解在含有0.5 M NaCl的0.1 M NaHCO3，pH 8.3的偶联缓冲液中。对于蛋白质配体，凝胶浓度为5-20 mg/ml。对于小配体，凝胶浓度为1-10 µmol/ml 。偶联缓冲液的体积应与固定凝胶的体积相同。
2.2.2 将洗净并吸干的凝胶（来自步骤 2.1.2）转移到上述溶液中。
2.2.3 浆液在4℃下混合过夜或在室温下混合3-4小时。
2.2.4 用至少5 倍凝胶体积的偶联缓冲液清洗凝胶。
2.2.5 将凝胶重新悬浮到相同体积的封闭溶液中，0.1 M Tris/HCl，pH 8.0 或1 M乙醇胺 pH 8.0，持续2 – 3小时。
2.8 用5倍体积的0.1 M Tris/HCl + 1 M NaCl，pH 8.0洗涤凝胶，然后用5倍体积的0.1 M醋酸盐缓冲液 + 1 M NaCl，pH 4.0洗涤凝胶。
2.9 使用前用工作/平衡缓冲液清洗凝胶。
3. 固定化效率的一般考虑
3.1 pH
pH 8.3的缓冲液常用于蛋白质固定。然而偶联pH值可在6-10之间进行优化以获得最佳结果（例如，高偶联产率和高配体活性）。
注意：配体溶解后要调节偶联pH值。
3.2 偶联方案
应避免使用含有氨基的溶液。
可以引入稀释的某些有机溶剂以提高配体的溶解度。应事先测试此类溶剂的适用性。
3.3 盐
偶联缓冲液加入盐可以提高固定效率。
3.4 基础基质中的活化基团
对于某些配体或应用，基础基质中的活化水平可能过高，偶联配体的活性可能会降低。
在降低的pH值下偶联可能会减少配体分子的连接点。它可以提高偶联配体的活性。活化基团的受控水解，例如在添加配体前几个小时用偶联缓冲液孵育凝胶，也可以减少过度偶联问题。
3.5 屏蔽剩余的活化配体
未与配体反应的活化基团应通过添加额外的含有pH 8 – 9伯胺的小分子（例如Tris或乙醇胺）来封端。
3.6 最终色谱填料的洗涤
偶联反应后需要将未连接或弱连接的配体WAN全洗掉。采用高pH值和低pH值交替的洗涤方法可以确保有效去除不需要的物质。
4. 固定化亲和色谱填料的使用
配体偶联色谱填料可用于使用间歇搅拌罐模式或填充柱模式的纯化。处理这种材料遵循与处理其他琼脂糖基质相同的原则。
5. 储存
冻干的CNBr活化磁性琼脂糖色谱填料应在8℃下储存。偶联的湿色谱填料应在防菌剂（例如20%乙醇）存在的情况下于4-8℃储存。切勿冻存耦合色谱填料。
6. 更多信息
访问上海金畔生物了解更多关于BioToolomics产品代理信息或联系上海金畔生物科技有限公司了解产品信息。
7. 订购信息
|
产品 |
规格 |
货号 |
|
CNBr-activated SepFast MAG 4HF |
1 g |
310201-1G |
|
10 g |
310201-10G |
|
|
100 g |
310201-100G |
BioToolomics醛基活化磁性琼脂糖色谱填料产品介绍
BioToolomics醛基活化磁性琼脂糖色谱填料产品介绍
醛基活化磁性琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast MAG)是一种磁性树脂，用于制备定制的磁性亲和色谱填料。在磁铁的帮助下，可以很容易地控制和分离生物原料中的磁性颗粒。将生物特异性配体与醛活化琼脂糖偶联是一项成功且有据可查的技术。
醛基活化磁性琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast MAG)通过还原胺化反应与含有伯胺基团的配体形成化学稳定的仲胺键。这种预活化的琼脂糖基质可以很容易地用于制作各种定制的亲和色谱填料，适用于小规模和大规模纯化应用。
1. 属性
有2种不同的基础基质可供选择，适合各种待偶联或纯化的分子。
• 醛基活化磁性琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast MAG 4 HF)由高度交联的4%磁性琼脂糖制成。其大孔径适用于偶联或纯化大分子。它具有高机械刚度，可在更严苛的条件下操作使用。
• 醛基活化磁性琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast MAG 6 HF)由高度交联的6%磁性琼脂糖制成。其适中的孔径适用于偶联较小的分子。它也具有高机械刚度，可在更严苛的条件下操作使用。
由于琼脂糖具有出色的亲水性和低非特异性结合特性，长期以来一直用于色谱分离。这些颗粒具有开孔结构，对各种分子具有出色的传质性能。基础基质通过氧化被激活以产生醛基。它直接与分子中的伯胺基反应，在还原剂存在的情况下被固定化。
醛基活化磁性琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast MAG)以20%乙醇中的水悬浮液形式提供。
表1 醛基活化磁性琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast MAG)的特性
|
可耦联基团 |
-NH2 |
|
基质 |
SepFast MAG 4HF：高度交联的4%磁性琼脂糖 SepFast MAG 6HF：高度交联的6%磁性琼脂糖 |
|
粒径 |
50-150 μm |
|
活化水平 |
> 5 μmol aldehyde /ml medium |
|
pH稳定性 |
4-13（具有配体依赖性） |
|
化学稳定性 |
对偶联配体能够接受的所有常用的水性化学品稳定 |
|
保存 |
4℃-8℃ |
2. 配体固定化
以下是一般的配体偶联程序。
2.1 将目标配体溶解在偶联缓冲液中，0.1 M磷酸钠，pH 7.0。一般对于蛋白质配体，凝胶的制备浓度为5 – 20 mg/ml。对于小配体，凝胶的制备浓度为10 – 100 µmol/ml。偶联缓冲液的体积可以是固定凝胶体积的一半或相同。
2.2 在过滤装置中用至少5 倍体积的偶联缓冲液清洗醛活化凝胶。
2.3 将洗净并吸干的凝胶（来自步骤 2.2）转移到步骤 2.1 制备的溶液中。
如果发生变化，请调整 pH 值。
2.4 将浆液在通风良好的通风橱中在室温下混合 2‑4 小时。
2.5 将氰基硼QING化钠（0.5 g/100 ml 活性凝胶）加入浆液中，过夜。注意：氰基硼QING化钠有毒，应格外小心处理。
2.6 用至少 5 倍凝胶体积的偶联缓冲液清洗凝胶。
2.7 在氰基硼QING化钠存在下，将凝胶重新悬浮到相同体积的封闭溶液，0.1 M Tris/HCl，pH 8.0或1 M乙醇胺，pH 8.0中2-3 小时。
2.8 用5倍体积的0.1 M Tris/HCl + 1 M NaCl，pH 8.0 洗涤凝胶，然后用5倍体积的0.1 M醋酸盐缓冲液 + 1 M NaCl，pH 4.0洗涤凝胶。
2.9 使用前用工作/平衡缓冲液清洗凝胶。
3. 固定化效率的一般考虑
3.1 pH
还原胺化可以在pH 4 – 10之间非常有效地进行。但是可以优化偶联pH以获得最佳结果（例如，高偶联产率和高配体活性）。
在配体溶解后要注意调整偶联pH 值。
3.2 偶联方案
应避免使用含有氨基的溶液。
可以引入稀释的某些有机溶剂以提高配体的溶解度。应事先测试此类溶剂的适用性。
耦合溶液的体积与活化凝胶的体积保持一致。建议使用0.5-1 : 1 v/v的理想比例。
3.3 盐
偶联缓冲液中盐的存在（例如0.5 M 或饱和）可以提高固定效率。
3.4 基础基质中的活化基团
对于某些配体或应用，基础基质中的活化水平可能过高，偶联配体的活性可能会降低。
在降低的 pH 值下偶联可能会减少配体分子的连接点。它可以提高偶联配体的活性。活化基团的受控封闭，例如在添加配体前几个小时用 5‑10 mM 封闭缓冲液孵育凝胶，也可以减少过度偶联问题。
3.5 反应时间
可以优化偶联过程中配体和活化填料之间的接触时间以保持配体的生物活性。
3.6 还原剂的选择
其他还原剂如硼QING化钠可用于偶联反应。氰基硼氢化物是一种较温和的还原剂，它只还原醛基和伯胺基之间形成的中间席夫碱，得到稳定的仲胺键。硼氢化物是一种更强的还原剂，可还原席夫碱和未偶联的醛基。
3.7 屏蔽剩余的活化配体
未与配体反应的活化基团应通过添加含有pH 8 – 9伯胺的额外小分子（例如 Tris 或乙醇胺）来封端。
3.8 最终填料的洗涤
偶联反应后需要将未连接或弱连接的配体WAN全洗掉。采用高pH值和低pH值交替的洗涤方法可以确保有效去除不需要的物质。
4. 固定化亲和填料的使用
配体偶联填料可用于使用间歇搅拌罐模式或填充柱模式的纯化。处理这种材料遵循与处理其他基于琼脂糖基质相同的原则。
5. 储存
醛基活化磁性琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast MAG)应在8℃下储存。偶联的湿填料应在防菌剂（例如20%乙醇）存在的情况下于4-8℃储存。切勿冻存耦合填料。
6. 更多信息
访问上海金畔生物了解更多关于BioToolomics产品代理信息或联系上海金畔生物科技有限公司了解产品信息。
7. 订购信息
|
产品 |
规格 |
货号 |
|
Aldehyde-activated SepFast MAG 4HF |
5 mL |
340201-5ML |
|
50 mL |
340201-50ML |
|
|
1 L |
340201-1L |
|
|
Aldehyde-activated SepFast MAG 6HF |
5 mL |
340204-5ML |
|
50 mL |
340204-50ML |
|
|
1 L |
340204-1L |
BioToolomics醛基活化琼脂糖色谱填料产品介绍
BioToolomics醛基活化琼脂糖色谱填料产品介绍
醛基活化琼脂糖基质在制备和使用定制亲和色谱填料方面具有良好的记录。将生物特异性配体与醛基活化琼脂糖偶联是一项成功且有据可查的技术。
醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast)通过还原胺化反应与含有伯胺基团的配体形成化学稳定的仲胺键。这种预活化的琼脂糖基质可用于亲和色谱填料的定制，适用于小规模和大规模纯化应用。
1. 属性
有2种基质可供选择，适合各种待偶联或纯化的分子。
• 醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast 4 High Flow)由高度交联的4%珠状琼脂糖组成。其大孔径适用于偶联或纯化大分子。它具有高机械刚度，可在降低背压的情况下实现高流量。
• 醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast 6 High Flow)由高度交联的6%珠状琼脂糖组成。其适中的孔径适用于偶联较小的分子。它也具有高机械刚度，可在降低背压的情况下实现高流量。
由于琼脂糖具有出色的亲水性和低非特异性结合特性，长期以来一直用于色谱分离。这些颗粒具有开孔结构，对各种分子具有出色的传质性能。基质通过氧化被激活以产生醛基，它直接与分子中的伯胺基反应，在还原剂存在的情况下被固定化。
醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast)以20%乙醇中的水悬浮液形式提供。
表1 醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast)的特性
|
可耦联基团 |
-NH2 |
|
基质 |
SepFast 4HF：高度交联的4%琼脂糖 SepFast 6HF：高度交联的6%琼脂糖 |
|
粒径 |
50-150 μm |
|
活化水平 |
> 5 μmol aldehyde /ml medium |
|
pH稳定性 |
3-13（具有配体依赖性） |
|
化学稳定性 |
对偶联配体能够接受的所有常用的水性化学品稳定 |
|
保存 |
4℃-8℃ |
2. 配体固定化
以下是一般的配体偶联程序。
2.1 将目标配体溶解在偶联缓冲液中，0.1 M磷酸钠，pH 7.0。一般对于蛋白质配体，凝胶的制备浓度为5 – 20 mg/ml。对于小配体，凝胶的制备浓度为10 – 100 µmol/ml。偶联缓冲液的体积可以是固定凝胶体积的一半或相同。
2.2 在过滤装置中用至少5 倍体积的偶联缓冲液清洗醛活化凝胶。
2.3 将洗净并吸干的凝胶（来自步骤 2.2）转移到步骤 2.1 制备的溶液中。
如果发生变化，请调整 pH 值。
2.4 将浆液在通风良好的通风橱中在室温下混合 2‑4 小时。
2.5 将氰基硼QING化钠（0.5 g/100 ml 活性凝胶）加入浆液中，过夜。注意：氰基硼qing化钠有毒，应格外小心处理。
2.6 用至少 5 倍凝胶体积的偶联缓冲液清洗凝胶。
2.7 在氰基硼QING化钠存在下，将凝胶重新悬浮到相同体积的封闭溶液，0.1 M Tris/HCl，pH 8.0或1 M乙醇胺，pH 8.0中2-3小时。
2.8 用5倍体积的0.1 M Tris/HCl + 1 M NaCl，pH 8.0 洗涤凝胶，然后用5倍体积的0.1 M醋酸盐缓冲液 + 1 M NaCl，pH 4.0洗涤凝胶。
2.9 使用前用工作/平衡缓冲液清洗凝胶。
3. 固定化效率的一般考虑
3.1 pH
还原胺化可以在pH 4 – 10之间非常有效地进行。但是可以优化偶联pH以获得最佳结果（例如，高偶联产率和高配体活性）。
在配体溶解后要注意调整偶联 pH 值。
3.2 偶联方案
应避免使用含有氨基的溶液。
可以引入稀释的某些有机溶剂以提高配体的溶解度。应事先测试此类溶剂的适用性。
耦合溶液的体积与活化凝胶的体积保持一致。建议使用0.5-1 : 1 v/v的理想比例。
3.3 盐
偶联缓冲液中盐的存在（例如0.5 M 或饱和）可以提高固定效率。
3.4 基础基质中的活化基团
对于某些配体或应用，基础基质中的活化水平可能过高，偶联配体的活性可能会降低。
在降低的 pH 值下偶联可能会减少配体分子的连接点。它可以提高偶联配体的活性。活化基团的受控封闭，例如在添加配体前几个小时用 5‑10 mM 封闭缓冲液孵育凝胶，也可以减少过度偶联问题。
3.5 反应时间
可以优化偶联过程中配体和活化填料之间的接触时间以保持配体的生物活性。
3.6 还原剂的选择
其他还原剂如硼QING化钠可用于偶联反应。氰基硼氢化物是一种较温和的还原剂，它只还原醛基和伯胺基之间形成的中间席夫碱，得到稳定的仲胺键。硼氢化物是一种更强的还原剂，可还原席夫碱和未偶联的醛基。
3.7 屏蔽剩余的活化配体
未与配体反应的活化基团应通过添加含有pH 8 – 9伯胺的额外小分子（例如 Tris 或乙醇胺）来封端。
3.8 最终填料的洗涤
偶联反应后需要将未连接或弱连接的配体WAN全洗掉。采用高pH值和低pH值交替的洗涤方法可以确保有效去除不需要的物质。
4. 固定化亲和填料的使用
配体偶联填料可用于使用间歇搅拌罐模式或填充柱模式的纯化。处理这种材料遵循与处理其他基于琼脂糖基质相同的原则。
5. 储存
醛基活化琼脂糖色谱填料(Aldehyde-activated SepFast)t应在8℃下储存。偶联的湿填料应在防菌剂（例如20%乙醇）存在的情况下于4-8℃储存。切勿冻存耦合填料。
6. 更多信息
访问上海金畔生物了解更多关于BioToolomics产品代理信息或联系上海金畔生物科技有限公司了解产品信息。
7. 订购信息
|
产品 |
规格 |
货号 |
|
Aldehyde-activated SepFast 4HF |
5 mL |
340101-5ML |
|
50 mL |
340101-50ML |
|
|
1 L |
340101-1L |
|
|
Aldehyde-activated SepFast 6HF |
5 mL |
340104-5ML |
|
50 mL |
340104-50ML |
|
|
1 L |
340104-1L |
BioToolomics胺基活化磁性琼脂糖色谱填料产品特性
BioToolomics胺基活化磁性琼脂糖色谱填料产品特性
胺基活化磁性琼脂糖色谱填料(Amine-activated SepFast MAG)用于制备磁性色谱吸附剂。它与含有羧基的配体形成化学稳定的酰胺键，他有一个长间隔区（9个原子）。与目标分子结合后，磁性树脂可以很容易地在磁铁的帮助下从生物原料中分离出来。
胺基活化的琼脂糖可用于固定含羧基或含醛的分子。耦合化学是基于碳二亚胺或还原胺化的，是一项成功且有据可查的技术。
1. 属性
胺基活化磁性琼脂糖色谱填料(Amine-activated SepFast MAG 4 HF)由高度交联的4%磁性琼脂糖制成。它可以在严苛的条件下操作使用，因此可以应用于低pH值和某些高浓度有机溶剂。
由于琼脂糖具有出色的亲水性和低非特异性结合特性，长期以来一直用于色谱分离。这些颗粒具有开孔结构，对大蛋白质分子具有出色的传质性能。
通过在末端连接带有胺基的长亲水链来激活基础基质。在碳二亚胺试剂存在下与含羧基配体反应，或在还原剂存在下与含醛配体反应。胺基活化磁性琼脂糖色谱填料(Amine-activated SepFast MAG)以20%乙醇中的水悬浮液形式提供。
表1 胺基活化磁性琼脂糖色谱填料(Amine-activated SepFast MAG)的特性
|
可耦联基团 |
-COOH，CHO |
|
基质 |
高度交联的4%琼脂糖（4HF） |
|
粒径 |
50-150 μm |
|
间隔臂 |
9个原子 |
|
活化水平 |
10-25 μmol amine /ml medium |
|
pH稳定性 |
4-13（具有配体依赖性） |
|
化学稳定性 |
对偶联配体能够接受的所有常用的水性化学品稳定 |
|
保存 |
4℃-8℃ |
*可根据要求提供其他粒径
2. 配体固定化
以下是含羧基配体一般的偶联流程。
2.1 将目标配体溶解在偶联缓冲液中，将pH值调整为4.5。偶联缓冲液的体积可以是固定凝胶体积的一半或相同。
2.2 在过滤装置中用至少5 倍体积的偶联缓冲液清洗胺活化凝胶。
2.3 将洗净并吸干的凝胶（来自步骤 2.2）转移到步骤2.1 制备的溶液中。
2.4 将碳二亚胺作为干粉或预先溶解的溶液添加到浆液中，最终浓度为0.1 M。如果碳二亚胺预先溶解在水中，则将pH值调整为4.5。
2.5 在室温或4-8℃下混合浆料。
2.6 在第1个小时内通过添加 0.1 M NaOH调节反应pH值至4.5。
2.7 将偶联反应放置2-24小时。
2.8 用5倍体积的0.1 M 醋酸盐缓冲液 + 0.5 M NaCl，pH 4.0洗涤凝胶，然后用5倍体积的0.1 M Tris/HCl + 0.5 M NaCl，pH 8.0洗涤凝胶。重复上述洗涤2次以上。
2.9 使用前用工作/平衡缓冲液清洗凝胶。
3. 固定化效率的一般考虑
3.1 pH
偶联反应在pH 4.5 – 7.5之间非常有效地进行。但是可以优化偶联pH以获得最佳结果（例如，高偶联产率和高配体活性）。
在偶联反应的第1个小时内，pH值会降低。要记得通过添加0.1 M NaOH来调节偶联pH值。之后pH值会趋于稳定。
3.2 偶联方案
去离子水可直接用作偶联溶液。应避免使用含有氨基、巯基或羧基的缓冲溶液，因为它们会与配体偶联发生竞争。
可以引入稀释的某些有机溶剂以提高配体的溶解度。应事先测试此类溶剂的适用性。
3.3 碳二亚胺的选择
应使用水溶性碳二亚胺，例如1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺 (EDC) 或1‑环己基‑3‑(2‑吗啉代乙基) 碳二亚胺 (CMC)（通常合成为 metho‑p‑甲苯磺酸盐）。EDC是常用的碳二亚胺试剂。
3.4 碳二亚胺的浓度
添加的碳二亚胺的量应以化学计量的方式超过活化的胺基。建议以最终反应浆料中的0.1 M作为起点。
3.5 反应时间和温度
可以优化偶联过程中配体和活化填料之间的接触时间以保持配体的生物活性。
典型的反应时间是在室温或冷藏室中过夜。
3.6 屏蔽剩余的活化配体
如果加入过量的配体，则可能不需要封闭残留的活化基团。
未与配体反应的活化基团应在碳二亚胺存在下通过添加含有pH 8 – 9伯胺的额外小分子（例如1 M乙醇胺）来封端。
3.7 最终填料的洗涤
偶联反应后需要将未连接或弱连接的配体WAN全洗掉。采用高pH值和低pH值交替的洗涤方法可以确保有效去除不需要的物质。
4. 固定化亲和填料的使用
配体偶联填料可用于使用间歇搅拌罐模式或填充柱模式的纯化。处理这种材料遵循与处理其他基于琼脂糖基质相同的原则。
5. 储存
胺基活化磁性琼脂糖色谱填料(Amine-activated SepFast MAG)应在8℃下储存。偶联的湿填料应在防菌剂（例如20%乙醇）存在的情况下于4-8℃储存。切勿冻存耦合填料。
6. 更多信息
访问上海金畔生物了解更多关于BioToolomics产品代理信息或联系上海金畔生物科技有限公司了解产品信息。
7. 订购信息
|
产品 |
规格 |
货号 |
|
Amine-activated SepFast MAG 4HF |
5 mL |
350201-5ML |
|
50 mL |
350201-50ML |
|
|
1 L |
350201-1L |
BioToolomics胺基活化琼脂糖色谱填料产品介绍
BioToolomics胺基活化琼脂糖色谱填料产品介绍
胺基活化的琼脂糖可以用于含羧基或含醛的分子。耦合化学是基于碳二亚胺的，是一项成功且有据可查的技术。
胺基活化琼脂糖色谱填料(Amine-activated SepFast)与含有羧基的配体形成化学稳定的酰胺键，它有一个长间隔区（9个原子）。预活化的琼脂糖基质可以用于制造各种定制的亲和色谱吸附剂，适用于小规模和大规模纯化应用。
1. 属性
胺基活化琼脂糖色谱填料(Amine-activated SepFast 4 High Flow)由高度交联的4%珠状琼脂糖制成。它具有高机械刚度，可在降低背压的情况下实现高流量。
由于琼脂糖具有出色的亲水性和低非特异性结合特性，长期以来一直用于色谱分离。这些颗粒具有开孔结构，对大蛋白质分子具有出色的传质性能。
通过在末端连接带有胺基的长亲水链来激活基础基质。在碳二亚胺试剂存在下与含羧基配体反应，或在还原剂存在下与含醛配体反应。胺基活化琼脂糖色谱填料(Amine-activated SepFast)以20%乙醇中的水悬浮液形式提供。
表1 胺基活化琼脂糖色谱填料(Amine-activated SepFast)的特性
|
可耦联基团 |
-COOH，CHO |
|
基质 |
高度交联的4%琼脂糖（4HF） |
|
粒径 |
50-150 μm |
|
间隔臂 |
9个原子 |
|
活化水平 |
10-25 μmol amine /ml medium |
|
pH稳定性 |
2-13（具有配体依赖性） |
|
化学稳定性 |
对偶联配体能够接受的所有常用的水性化学品稳定 |
|
保存 |
4℃-8℃ |
2. 配体固定化
以下是含羧基配体一般的偶联流程。
2.1 将目标配体溶解在偶联缓冲液中，将pH值调整为4.5。偶联缓冲液的体积可以是固定凝胶体积的一半或相同。
2.2 在过滤装置中用至少5 倍体积的偶联缓冲液清洗胺活化凝胶。
2.3 将洗净并吸干的凝胶（来自步骤 2.2）转移到步骤2.1 制备的溶液中。
2.4 将碳二亚胺作为干粉或预先溶解的溶液添加到浆液中，最终浓度为0.1 M。如果碳二亚胺预先溶解在水中，则将pH值调整为4.5。
2.5 在室温或4-8℃下混合浆料。
2.6 在第1个小时内通过添加 0.1 M NaOH调节反应pH值至4.5。
2.7 将偶联反应放置2-24小时。
2.8 用5倍体积的0.1 M 醋酸盐缓冲液 + 0.5 M NaCl，pH 4.0洗涤凝胶，然后用5倍体积的0.1 M Tris/HCl + 0.5 M NaCl，pH 8.0洗涤凝胶。重复上述洗涤2次以上。
2.9 使用前用工作/平衡缓冲液清洗凝胶。
3. 固定化效率的一般考虑
3.1 pH
偶联反应在pH 4.5 – 7.5之间非常有效地进行。但是可以优化偶联pH以获得最佳结果（例如，高偶联产率和高配体活性）。
在偶联反应的第1个小时内，pH值会降低。要记得通过添加0.1 M NaOH来调节偶联pH值。之后pH值会趋于稳定。
3.2 偶联方案
去离子水可直接用作偶联溶液。应避免使用含有氨基、巯基或羧基的缓冲溶液，因为它们会与配体偶联发生竞争。
可以引入稀释的某些有机溶剂以提高配体的溶解度。应事先测试此类溶剂的适用性。
3.3 碳二亚胺的选择
应使用水溶性碳二亚胺，例如1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺 (EDC) 或1‑环己基‑3‑(2‑吗啉代乙基) 碳二亚胺 (CMC)（通常合成为 metho‑p‑甲苯磺酸盐）。EDC是常用的碳二亚胺试剂。
3.4 碳二亚胺的浓度
添加的碳二亚胺的量应以化学计量的方式超过活化的胺基。建议以最终反应浆料中的0.1 M作为起点。
3.5 反应时间和温度
可以优化偶联过程中配体和活化填料之间的接触时间以保持配体的生物活性。
典型的反应时间是在室温或冷藏室中过夜。
3.6 屏蔽剩余的活化配体
如果加入过量的配体，则可能不需要封闭残留的活化基团。
未与配体反应的活化基团应在碳二亚胺存在下通过添加含有pH 8 – 9伯胺的额外小分子（例如1 M乙醇胺）来封端。
3.7 最终填料的洗涤
偶联反应后需要将未连接或弱连接的配体WAN全洗掉。采用高pH值和低pH值交替的洗涤方法可以确保有效去除不需要的物质。
4. 固定化亲和填料的使用
配体偶联填料可用于使用间歇搅拌罐模式或填充柱模式的纯化。处理这种材料遵循与处理其他基于琼脂糖基质相同的原则。
5. 储存
胺基活化琼脂糖色谱填料(Amine-activated SepFast)应在8℃下储存。偶联的湿填料应在防菌剂（例如20%乙醇）存在的情况下于4-8℃储存。切勿冻存耦合填料。
6. 更多信息
访问上海金畔生物了解更多关于BioToolomics产品代理信息或联系上海金畔生物科技有限公司了解产品信息。
7. 订购信息
|
产品 |
规格 |
货号 |
|
Amine-activated SepFast 4HF |
5 mL |
350101-5ML |
|
50 mL |
350101-50ML |
|
|
1 L |
350101-1L |
|
|
Amine-activated SepFast 6HF |
5 mL |
350301-5ML |
|
50 mL |
350301-50ML |
|
|
1 L |
350301-1L |
BioToolomics羧基活化磁性琼脂糖色谱填料产品介绍
BioToolomics羧基活化磁性琼脂糖色谱填料产品介绍
羧基活化的磁性琼脂糖可用于制备磁性色谱填料。它与含有伯胺基团的配体形成化学稳定的酰胺键，它有一个长间隔区（9个原子）。目标分子结合后，磁性树脂可以很容易地在磁铁的帮助下从生物原料中分离出来。
羧基活化琼脂糖可用于固定含胺分子。耦合化学是基于碳二亚胺的，是一项成功且有据可查的技术。
1. 属性
羧基活化磁性琼脂糖色谱填料(Carboxyl-activated SepFast MAG 4 HF)由高度交联的4%磁性琼脂糖制成。它可以在更严苛的条件下进行操作使用，因此可以应用于低pH值和某些高浓度有机溶剂。
由于琼脂糖具有出色的亲水性和低非特异性结合特性，长期以来一直用于色谱分离。这些颗粒具有开孔结构，对大蛋白质分子具有出色的传质性能。
通过将长的亲水性间隔臂连接到骨架上来活化基础基质。它直接与分子中的伯胺基反应，在碳二亚胺试剂存在下被固定。羧基活化磁性琼脂糖色谱填料(Carboxyl-activated SepFast MAG)以20%乙醇中的水悬浮液形式提供。
表1 羧基活化磁性琼脂糖色谱填料(Carboxyl-activated SepFast MAG 4HF)的特性
|
可耦联基团 |
-NH2 |
|
基质 |
高度交联的4%磁性琼脂糖（4HF） |
|
粒径 |
50-150 μm |
|
间隔臂 |
9个原子 |
|
活化水平 |
8-19 μmol carboxyl /ml medium |
|
pH稳定性 |
4-13（具有配体依赖性） |
|
化学稳定性 |
对偶联配体能够接受的所有常用的水性化学品稳定 |
|
保存 |
4℃-8℃ |
*可应要求提供其他粒径
2. 配体固定化
以下是配体一般的偶联流程。
2.1 将目标配体溶解在偶联缓冲液中，将pH值调整为4.5。偶联缓冲液的体积可以是固定凝胶体积的一半或相同。
2.2 在过滤装置中用至少5 倍体积的偶联缓冲液清洗羧基活化凝胶。
2.3 将洗净并吸干的凝胶（来自步骤 2.2）转移到步骤2.1 制备的溶液中。
2.4 将碳二亚胺作为干粉或预先溶解的溶液添加到浆液中至终浓度为0.1 M。如果碳二亚胺预先溶解在水中，则将pH值调整为4.5。
2.5 在室温或4-8℃下混合浆料。
2.6 在第1个小时内通过添加 0.1 M NaOH调节反应pH值至4.5。
2.7 将偶联反应放置2-24小时。
2.8 用5倍体积的0.1 M 醋酸盐缓冲液 + 0.5 M NaCl，pH 4.0洗涤凝胶，然后用5倍体积的0.1 M Tris/HCl + 0.5 M NaCl，pH 8.0洗涤凝胶。重复上述洗涤2次以上。
2.9 使用前用工作/平衡缓冲液清洗凝胶。
3. 固定化效率的一般考虑
3.1 pH
偶联反应在pH 4.5 – 7.5之间非常有效地进行。但是可以优化偶联pH以获得最佳结果（例如，高偶联产率和高配体活性）。
在偶联反应的第1个小时内，pH值会降低。要记得通过添加0.1 M NaOH来调节偶联pH值。之后pH值会趋于稳定。
3.2 偶联方案
去离子水可直接用作偶联溶液。应避免使用含有氨基、巯基或羧基的缓冲溶液，因为它们会与配体偶联发生竞争。
可以引入稀释的某些有机溶剂以提高配体的溶解度。应事先测试此类溶剂的适用性。
3.3 碳二亚胺的选择
应使用水溶性碳二亚胺，例如1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺 (EDC) 或1‑环己基‑3‑(2‑吗啉代乙基) 碳二亚胺 (CMC)（通常合成为 metho‑p‑甲苯磺酸盐）。EDC是常用的碳二亚胺试剂。
3.4 碳二亚胺的浓度
添加的碳二亚胺的量应以化学计量的方式超过活化的羧基。建议以最终反应浆料中的0.1 M作为起点。
3.5 反应时间和温度
可以优化偶联过程中配体和活化填料之间的接触时间以保持配体的生物活性。
典型的反应时间是在室温或冷藏室中过夜。
3.6 屏蔽剩余的活化配体
如果加入过量的配体，则可能不需要封闭残留的活化基团。
未与配体反应的活化基团应在碳二亚胺存在下通过添加额外的含有pH 8 – 9伯胺的小分子（例如1 M乙醇胺）来封端。
3.7 最终填料的洗涤
偶联反应后需要将未连接或弱连接的配体WAN全洗掉。采用高pH值和低pH值交替的洗涤方法可以确保有效去除不需要的物质。
4. 固定化亲和填料的使用
配体偶联填料可用于使用间歇搅拌罐模式或填充柱模式的纯化。处理这种材料遵循与处理其他基于琼脂糖基质相同的原则。
5. 储存
羧基活化磁性琼脂糖色谱填料(Carboxyl-activated SepFast MAG)应在8℃下储存。偶联的湿填料应在防菌剂（例如20%乙醇）存在的情况下于4-8℃储存。切勿冻存耦合填料。
6. 更多信息
访问上海金畔生物了解更多关于BioToolomics产品代理信息或联系上海金畔生物科技有限公司了解产品信息。
7. 订购信息
|
产品 |
规格 |
货号 |
|
Carboxyl-activated SepFast MAG 4HF |
5 mL |
380201-5ML |
|
50 mL |
380201-50ML |
|
|
1 L |
380201-1L |
BioToolomics羧基活化琼脂糖色谱填料产品介绍
BioToolomics羧基活化琼脂糖色谱填料产品介绍
羧基活化的琼脂糖可用于固定含胺分子。耦合化学是基于碳二亚胺的，是一项成功且有据可查的技术。
羧基活化琼脂糖色谱填料(Carboxyl-activated SepFast)与含有伯胺基团的配体形成化学稳定的酰胺键，它有一个长间隔区（9个原子）。预活化的琼脂糖基质可以用于制作各种定制的亲和色谱填料，适用于小规模和大规模纯化应用。
1. 属性
羧基活化琼脂糖色谱填料(Carboxyl-activated SepFast 4HF)由高度交联的4%珠状琼脂糖制成。它具有高机械刚度，可在降低背压的情况下实现高流量。
由于琼脂糖具有出色的亲水性和低非特异性结合特性，长期以来一直用于色谱分离。这些颗粒具有开孔结构，对大蛋白质分子具有出色的传质性能。
通过将长的亲水性间隔臂连接到骨架上来活化基础基质。它直接与分子中的伯胺基反应，在碳二亚胺试剂存在下被固定。羧基活化琼脂糖色谱填料(Carboxyl-activated SepFast)以20%乙醇中的水悬浮液形式提供。
表1 羧基活化琼脂糖色谱填料(Carboxyl-activated SepFast 4HF)的特性
|
可耦联基团 |
-NH2 |
|
基质 |
高度交联的4%琼脂糖（4HF） |
|
粒径 |
50-150 μm |
|
间隔臂 |
9个原子 |
|
活化水平 |
8-19 μmol carboxyl /ml medium |
|
pH稳定性 |
2-13（具有配体依赖性） |
|
化学稳定性 |
对偶联配体能够接受的所有常用的水性化学品稳定 |
|
保存 |
4℃-8℃ |
2. 配体固定化
以下是配体一般的偶联流程。
2.1 将目标配体溶解在偶联缓冲液中，将pH值调整为4.5。偶联缓冲液的体积可以是固定凝胶体积的一半或相同。
2.2 在过滤装置中用至少5 倍体积的偶联缓冲液清洗羧基活化凝胶。
2.3 将洗净并吸干的凝胶（来自步骤 2.2）转移到步骤2.1 制备的溶液中。
2.4 将碳二亚胺作为干粉或预先溶解的溶液添加到浆液中，最终浓度为0.1 M。如果碳二亚胺预先溶解在水中，则将pH值调整为4.5。
2.5 在室温或4-8℃下混合浆料。
2.6 在第1个小时内通过添加 0.1 M NaOH调节反应pH值至4.5。
2.7 将偶联反应放置2-24小时。
2.8 用5倍体积的0.1 M 醋酸盐缓冲液 + 0.5 M NaCl，pH 4.0洗涤凝胶，然后用5倍体积的0.1 M Tris/HCl + 0.5 M NaCl，pH 8.0洗涤凝胶。重复上述洗涤2次以上。
2.9 使用前用工作/平衡缓冲液清洗凝胶。
3. 固定化效率的一般考虑
3.1 pH
偶联反应在pH 4.5 – 7.5之间非常有效地进行。但是可以优化偶联pH以获得最佳结果（例如，高偶联产率和高配体活性）。
在偶联反应的第1个小时内，pH值会降低。要记得通过添加0.1 M NaOH来调节偶联pH值。之后pH值会趋于稳定。
3.2 偶联方案
去离子水可直接用作偶联溶液。应避免使用含有氨基、巯基或羧基的缓冲溶液，因为它们会与配体偶联发生竞争。
可以引入稀释的某些有机溶剂以提高配体的溶解度。应事先测试此类溶剂的适用性。
3.3 碳二亚胺的选择
应使用水溶性碳二亚胺，例如1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺 (EDC) 或1‑环己基‑3‑(2‑吗啉代乙基) 碳二亚胺 (CMC)（通常合成为 metho‑p‑甲苯磺酸盐）。EDC是常用的碳二亚胺试剂。
3.4 碳二亚胺的浓度
添加的碳二亚胺的量应以化学计量的方式超过活化的羧基。建议以最终反应浆料中的0.1 M作为起点。
3.5 反应时间和温度
可以优化偶联过程中配体和活化填料之间的接触时间以保持配体的生物活性。
典型的反应时间是在室温或冷藏室中过夜。
3.6 屏蔽剩余的活化配体
如果加入过量的配体，则可能不需要封闭残留的活化基团。
未与配体反应的活化基团应在碳二亚胺存在下通过添加额外的含有pH 8 – 9伯胺的小分子（例如1 M乙醇胺）来封端。
3.7 最终填料的洗涤
偶联反应后需要将未连接或弱连接的配体WAN全洗掉。采用高pH值和低pH值交替的洗涤方法可以确保有效去除不需要的物质。
4. 固定化亲和填料的使用
配体偶联填料可用于使用间歇搅拌罐模式或填充柱模式的纯化。处理这种材料遵循与处理其他基于琼脂糖基质相同的原则。
5. 储存
羧基活化琼脂糖色谱填料(Carboxyl-activated SepFast)应在8℃下储存。偶联的湿填料应在防菌剂（例如20%乙醇）存在的情况下于4-8℃储存。切勿冻存耦合填料。
6. 更多信息
访问上海金畔生物了解更多关于BioToolomics产品代理信息或联系上海金畔生物科技有限公司了解产品信息。
7. 订购信息
|
产品 |
规格 |
货号 |
|
Carboxyl-activated SepFast 4HF |
5 mL |
380101-5ML |
|
50 mL |
380101-50ML |
|
|
1 L |
380101-1L |
BioToolomics之CNBr活化琼脂糖色谱填料产品特性介绍
BioToolomics之CNBr活化琼脂糖色谱填料产品特性介绍
CNBr活化的琼脂糖在制备和使用定制亲和色谱填料方面具有良好的记录。将生物特异性配体与CNBr活化的琼脂糖偶联是一项广泛使用、成功且有据可查的技术。偶联反应是自发的、快速的并且易于进行。不需要有毒化学品或特殊制备。
这种预活化的琼脂糖基质可以很容易地用于制造各种亲和色谱填料，适用于小规模和大规模纯化应用。应用领域包括蛋白质、多肽和核酸的固定化。
1.属性
CNBr活化琼脂糖色谱填料(CNBr-activated SepFast 4 HF)由高度交联的4%珠状琼脂糖制成。它具有高机械刚度，可在降低背压的情况下实现高流量。
由于琼脂糖具有出色的亲水性和低非特异性结合特性，长期以来一直用于色谱分离。这些颗粒具有开孔结构，对大蛋白质分子具有出色的传质性能。
基础基质与溴化氢（CNBr）反应生成活性基团，这些活性基团与待固定分子中的伯胺基团反应。CNBr活化琼脂糖色谱填料(CNBr-activated SepFast)以添加添加剂的冻干粉形式提供。
表1 CNBr活化琼脂糖色谱填料(CNBr-activated SepFast 4 HF)的特性
|
可耦联基团 |
-NH2 |
|
基质 |
高度交联的4%琼脂糖（4HF） |
|
粒径 |
50-150 μm |
|
膨胀系数 |
3-5 ml/g粉末 |
|
活化水平 |
＞5 mg BSA/ml medium |
|
pH稳定性 |
3-11（具有配体依赖性） |
|
化学稳定性 |
对偶联配体能够接受的所有常用的水性化学品稳定 |
|
保存 |
4℃-8℃ |
2.配体固定化
以下是配体一般的偶联流程。
2.1 将目标配体溶解在含有0.5 M NaCl的0.1 M NaHCO3，pH 8.3的偶联缓冲液中。对于蛋白质配体，凝胶浓度为5 – 20 mg/ml。对于小配体，制作1 – 10µmol/ml凝胶。偶联缓冲液的体积应与固定凝胶的体积相同。
2.2 称取所需的粉末（1 g干粉提供约9 ‑ 12 ml的沉降填料）并将其悬浮在预冷的 1 mM HCl中（1 g 干粉使用20 ml预冷的1 mM HCl）。让填料在低温下膨胀2 – 3分钟。
2.3 快速去除过滤装置中的液体。
2.4 将洗净吸干的凝胶转移到偶联缓冲液中。
2.5 浆液在4℃下混合过夜或在室温下混合3-4小时。
2.6 用至少5 倍凝胶体积的偶联缓冲液清洗凝胶。
2.7 将凝胶重新悬浮到相同体积的封闭溶液中，0.1 M Tris/HCl，pH 8.0 或1 M 乙醇胺 pH 8.0，持续2 – 3小时。
2.8 用5倍体积的0.1 M 0.1 M Tris/HCl + 1 M NaCl，pH 8.0洗涤凝胶，然后用5倍体积的0.1 M醋酸盐缓冲液 + 1 M NaCl，pH 4.0洗涤凝胶。
2.9 使用前用工作/平衡缓冲液清洗凝胶。
3.固定化效率的一般考虑
3.1 pH
pH 8.3的缓冲液常用于蛋白质固定。然而偶联pH值可在6-10之间进行优化以获得最佳结果（例如，高偶联产率和高配体活性）。
注意：配体溶解后要调节偶联pH值。
3.2 偶联方案
应避免使用含有氨基的溶液。
可以引入稀释的某些有机溶剂以提高配体的溶解度。应事先测试此类溶剂的适用性。
3.3 盐
偶联缓冲液中盐的存在可以提高固定效率。
3.4 基础基质中的活化基团
对于某些配体或应用，基础基质中的活化水平可能过高，偶联配体的活性可能会降低。
在降低的pH值下偶联可能会减少配体分子的连接点。它可以提高偶联配体的活性。活化基团的受控水解，例如在添加配体前几个小时用偶联缓冲液孵育凝胶，也可以减少过度偶联问题。
3.5 屏蔽剩余的活化配体
未与配体反应的活化基团应通过添加额外的含有pH 8 – 9伯胺的小分子（例如Tris或乙醇胺）来封端。
3.6 最终填料的洗涤
偶联反应后需要将未连接或弱连接的配体WAN全洗掉。采用高pH值和低pH值交替的洗涤方法可以确保有效去除不需要的物质。
4.固定化亲和填料的使用
配体偶联填料可用于使用间歇搅拌罐模式或填充柱模式的纯化。处理这种材料遵循与处理其他基于琼脂糖基质相同的原则。
5.储存
冻干的CNBr活化琼脂糖色谱填料(CNBr-activated SepFast 4 HF)应在8℃下储存。偶联的湿填料应在防菌剂（例如20%乙醇）存在的情况下于4-8℃储存。切勿冻存耦合填料。
6.更多信息
访问上海金畔生物了解更多关于BioToolomics产品代理信息或联系上海金畔生物科技有限公司了解产品信息。
7.订购信息
|
产品 |
规格 |
货号 |
|
CNBr-activated SepFast 4HF |
1 g |
310101-1G |
|
5 g |
310101-5G |
|
|
500 g |
310101-500G |
BioToolomics之CNBr活化琼脂糖色谱填料产品特性
BioToolomics之CNBr活化琼脂糖色谱填料产品特性
BioToolomics之CNBr活化琼脂糖色谱填料产品特性
CNBr活化的琼脂糖在制备和使用定制亲和色谱填料方面具有良好的记录。将生物特异性配体与CNBr活化的琼脂糖偶联是一项广泛使用、成功且有据可查的技术。偶联反应是自发的、快速的并且易于进行。不需要有毒化学品或特殊制备。
这种预活化的琼脂糖基质可以很容易地用于制造各种亲和色谱填料，适用于小规模和大规模纯化应用。应用领域包括蛋白质、多肽和核酸的固定化。
1. 属性
CNBr活化琼脂糖色谱填料(CNBr-activated SepFast 4 HF)由高度交联的4%珠状琼脂糖制成。它具有高机械刚度，可在降低背压的情况下实现高流量。
由于琼脂糖具有出色的亲水性和低非特异性结合特性，长期以来一直用于色谱分离。这些颗粒具有开孔结构，对大蛋白质分子具有出色的传质性能。
基础基质与溴化氢（CNBr）反应生成活性基团，这些活性基团与待固定分子中的伯胺基团反应。CNBr活化琼脂糖色谱填料(CNBr-activated SepFast)以添加添加剂的冻干粉形式提供。
表1 CNBr活化琼脂糖色谱填料(CNBr-activated SepFast 4 HF)的特性
|
可耦联基团 |
-NH2 |
|
基质 |
高度交联的4%琼脂糖（4HF） |
|
粒径 |
50-150 μm |
|
膨胀系数 |
3-5 ml/g粉末 |
|
活化水平 |
＞5 mg BSA/ml medium |
|
pH稳定性 |
3-11（具有配体依赖性） |
|
化学稳定性 |
对偶联配体能够接受的所有常用的水性化学品稳定 |
|
保存 |
4℃-8℃ |
2. 配体固定化
以下是配体一般的偶联流程。
2.1 将目标配体溶解在含有0.5 M NaCl的0.1 M NaHCO3，pH 8.3的偶联缓冲液中。对于蛋白质配体，凝胶浓度为5 – 20 mg/ml。对于小配体，制作1 – 10µmol/ml凝胶。偶联缓冲液的体积应与固定凝胶的体积相同。
2.2 称取所需的粉末（1 g干粉提供约9 ‑ 12 ml的沉降填料）并将其悬浮在预冷的 1 mM HCl中（1 g 干粉使用20 ml预冷的1 mM HCl）。让填料在低温下膨胀2 – 3分钟。
2.3 快速去除过滤装置中的液体。
2.4 将洗净吸干的凝胶转移到偶联缓冲液中。
2.5 浆液在4℃下混合过夜或在室温下混合3-4小时。
2.6 用至少5 倍凝胶体积的偶联缓冲液清洗凝胶。
2.7 将凝胶重新悬浮到相同体积的封闭溶液中，0.1 M Tris/HCl，pH 8.0 或1 M 乙醇胺 pH 8.0，持续2 – 3小时。
2.8 用5倍体积的0.1 M 0.1 M Tris/HCl + 1 M NaCl，pH 8.0洗涤凝胶，然后用5倍体积的0.1 M醋酸盐缓冲液 + 1 M NaCl，pH 4.0洗涤凝胶。
2.9 使用前用工作/平衡缓冲液清洗凝胶。
3. 固定化效率的一般考虑
3.1 pH
pH 8.3的缓冲液常用于蛋白质固定。然而偶联pH值可在6-10之间进行优化以获得最佳结果（例如，高偶联产率和高配体活性）。
注意：配体溶解后要调节偶联pH值。
3.2 偶联方案
应避免使用含有氨基的溶液。
可以引入稀释的某些有机溶剂以提高配体的溶解度。应事先测试此类溶剂的适用性。
3.3 盐
偶联缓冲液中盐的存在可以提高固定效率。
3.4 基础基质中的活化基团
对于某些配体或应用，基础基质中的活化水平可能过高，偶联配体的活性可能会降低。
在降低的pH值下偶联可能会减少配体分子的连接点。它可以提高偶联配体的活性。活化基团的受控水解，例如在添加配体前几个小时用偶联缓冲液孵育凝胶，也可以减少过度偶联问题。
3.5 屏蔽剩余的活化配体
未与配体反应的活化基团应通过添加额外的含有pH 8 – 9伯胺的小分子（例如Tris或乙醇胺）来封端。
3.6 最终填料的洗涤
偶联反应后需要将未连接或弱连接的配体完q洗掉。采用高pH值和低pH值交替的洗涤方法可以确保有效去除不需要的物质。
4. 固定化亲和填料的使用
配体偶联填料可用于使用间歇搅拌罐模式或填充柱模式的纯化。处理这种材料遵循与处理其他基于琼脂糖基质相同的原则。
5. 储存
冻干的CNBr活化琼脂糖色谱填料(CNBr-activated SepFast 4 HF)应在8℃下储存。偶联的湿填料应在防菌剂（例如20%乙醇）存在的情况下于4-8℃储存。切勿冻存耦合填料。
6. 更多信息
访问www.bestbaiao.com了解更多关于BioToolomics产品代理信息或联系上海金畔生物科技有限公司了解产品信息。
7. 订购信息
|
产品 |
规格 |
货号 |
|
CNBr-activated SepFast 4HF |
1 g |
310101-1G |
|
5 g |
310101-5G |
|
|
500 g |
310101-500G |
Promega低熔点琼脂糖V2111V2111
Promega低熔点琼脂糖V2111
简要描述：
Promega低熔点琼脂糖V2111，说明：低熔点琼脂糖，分析级，是用于凝胶电泳后回收完整DNA 片段的理想选择。外观：白色粉末。特性： 1、凝固温度（1.5%）：24-28℃。2、 熔点（1.5%）：≤ 65.5℃。3、 盐：≤ 0.12%。4、 EEO（-mr）：≤ 0.11。5、凝胶强度（1%）：≥ 300g/cm2。
Promega低熔点琼脂糖V2111Agarose, Low Melting Point,Analytical Grade
|
说明 |
低熔点琼脂糖，分析级，是用于凝胶电泳后回收完整DNA 片段的理想选择。
|
|
| 外观 |
白色粉末。
|
|
| 特性 |
• 凝固温度(1.5%)：24-28℃。 • 熔点(1.5%)：≤ 65.5℃。 •盐：≤ 0.12%。 • EEO(-mr)：≤ 0.11。 • 凝胶强度(1%)：≥ 300g/cm2。
|
|
|
特点 |
. 质量检测：每一批分析级低熔点琼脂糖均经过检验并保证没有DNA 酶及RNA 酶活性。
|
|
| 储存条件 |
储存于22-25℃。 |
西班牙琼脂糖100gAgarose
西班牙琼脂糖100g
简要描述：
西班牙琼脂糖100g，产品名称:琼脂糖Agarose 产地:西班牙 （原装） 缩写为AG，是琼脂中不带电荷的中性组成成份，也译为琼胶素或琼胶糖。琼胶糖化学结构由β-D-吡喃半乳糖（1-4）连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基单位构成.
西班牙琼脂糖100g
产品名称:琼脂糖Agarose 产地:西班牙 (原装) 缩写为AG，是琼脂中不带电荷的中性组成成份，也译为琼胶素或琼胶糖。琼胶糖化学结构由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基单位构成.
电泳级别的西班牙琼脂糖/biowest agrose的纯度很高，不仅适用于蛋白电泳也可以用于其他核酸分析电泳。
规格：100g
产地：Biowest原装
参数：
Regular
EEO —————————–0.15
Gel Strength(1%) (g/cm2)————≥750
Gelling temperature (1%)(℃)——37±1.5
说明：用于日常核酸分析电泳、蛋白电泳
Eylabs琼脂糖微珠代理商
上海金畔生物科技有限公司是Eylabs琼脂糖微珠代理商 ，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
Eylabs琼脂糖微珠代理
详情介绍
Eylabs琼脂糖微珠代理——上海金畔生物科技有限公司，提供Eylabs产品，如琼脂糖微珠、琼脂糖单珠试剂盒、荧光试剂等，更多Eylabs品牌产品等，欢迎咨询！
Eylabs公司介绍：
自1978年以来，Eylabs一直是研究生物化学和临床诊断的全球创新者。三十多年来，Eylabs利用了多项技术突破，从用于研究的生化试剂到应用于临床环境和没有特殊设备的偏远第三世界环境的护理点应用。如今，Eylabs继续在所有研究领域进行创新，并推动生物化学创新的边界。
三十年来，Eylabs为全球近150个国家的研究科学和临床实验室提供服务。产品和服务的专业知识和应用领域几乎涵盖了所有科学学科。
Eylabs详细产品列表：
|
货号 |
产品 |
价格 |
品牌 |
|
CG-001-5 |
a-L-Fucose Gel, Immobilized Carbohydrates, 5mL |
询价 |
Eylabs |
|
PG-004-5 |
a-Lactalbumin (Bovine Milk) Gel, Immobilized Proteins, 5mL |
询价 |
Eylabs |
|
CG-004-5 |
a-Lactose Gel, Immobilized Carbohydrates, 5mL |
询价 |
Eylabs |
|
A-8003-1 |
Aegopodium podagragria Gel -APP- Immobilized Lectin, 1mL |
询价 |
Eylabs |
|
A-5001-2 |
Agaricus bisporus Gel -ABA- Immobilized Lectin, 2mL |
询价 |
Eylabs |
|
A-6401-1 |
Allomyrina dichotoma Lectin (Japanese Beetle) -Allo A-, 1mg |
询价 |
Eylabs |
|
CG-030-5 |
Aminophenyl a-Fucose Gel, 5mL |
询价 |
Eylabs |
|
CG-032-5 |
Aminophenyl a-Galactose Gel, 5mL |
询价 |
Eylabs |
|
CG-035-5 |
Aminophenyl a-Glucose Gel, 5mL |
询价 |
Eylabs |
|
CG-040-5 |
Aminophenyl a-Mannose Gel, 5mL |
询价 |
Eylabs |
更多有关Eylabs产品介绍，请联系Eylabs琼脂糖微珠代理——上海金畔生物科技有限公司：
琼脂糖 货号: A2015 规格: 100g
上海金畔生物科技有限公司代理UELANDY荧光染料全系系列产品
琼脂糖
产品货号: A2015
产品规格: 100g
目录价（元）:280
大包装询价
产品概述：
储存条件
室温保存，有效期见外包装。
产品介绍
Agarose即琼脂糖，不含DNase、RNase和Protease。常用于配制核酸分析凝胶，例如用于DNA或RNA电泳的琼脂糖凝胶等。常使用TAE或TBE作为电泳液。琼脂糖凝胶的浓度和DNA电泳的分辨率及理想的电泳液参考下表。对于分辨率要求不高时，使用 TAE (Tris-乙酸EDTA缓冲液)和 TBE (Tris-硼酸EDTA缓冲液)均可；对于分辨率要求比较高时，较低浓度的胶有利于提高大分子量核酸的分辨率，此时宜使用TAE；而较高浓度的胶有利于提高小分子量核酸的分辨率，此时宜使用TBE。
|
胶浓度（w/v） |
理想分离范围 |
理想的电泳液 |
|
0.8% |
800-22,000 bp |
TAE |
|
1.0% |
500-10,000 bp |
TAE/TBE |
|
1.2% |
400-7,000 bp |
TAE/TBE |
|
1.5% |
250-5,000 bp |
TAE/TBE |
|
2.0% |
150-3,000 bp |
TBE |
质量控制
凝胶强度（1%）：> 1200 g/cm2；
电渗（EEO）：< 0.15；
硫化物：≤ 0.15%；
凝胶温度（1.5%凝胶）：35~37℃；
熔胶温度（1.5%凝胶）：87~89℃；
水分：≤ 10%；
核酸酶不得检出。
说明书：
UE-A2015
使用本产品的文献：
1.Evaluation of a Universal Nested Reverse Transcription Polymerase Chain
Yuyang Wang, Weidi Xu, Huancheng Guo, Wenjie Gong, Biao He, Zhongzhong Tu, Changchun Tu， Ye Feng
Journal of Visualized Experiments
β-琼脂糖酶 I 货 号 #M0392L NEB酶试剂 New England Biolabs
上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 其它
β-琼脂糖酶 I 收藏
货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
#M0392L
500 units
3,529.00
无
无
无
无
无
#M0392S
100 units
879.00
有
有
有
无
无
Download:
- isoschizomers |
- compatible ends |
- single letter code
特性
从琼脂糖凝胶中提取 DNA
不含 DNase 和 RNase
不含 DNase 和 RNase
概述
β-琼脂糖酶切割琼脂糖亚单位或未置换的新琼脂乙糖（3,6-酐-α-L-吡喃型半乳糖基-1-3-D-半乳糖）生成新琼脂-寡糖。β-琼脂糖酶 I消化琼脂糖，形成不能再成胶的碳水化合物分子，同时释放所俘获的 DNA。通常残留的碳水化合物分子或 β-琼脂糖酶 I 不会影响随后的限制性内切酶消化、连接反应及转化反应等 DNA 操作。
来源
重组 E. coli 菌株，此菌株的质粒上携带有 β-琼脂糖酶 I 的编码基因。
反应条件
1X β-琼脂糖酶 I 反应缓冲液
[10 mM Bis Tris-HCl（pH 6.5 @ 25℃），1 mM EDTA]，42℃ 温育。
注意事项
琼脂糖：由于在反应温度 42℃ 条件下，溶液必需呈液态，所以仅低熔点琼脂糖适合于用 β-琼脂糖酶 I 消化。
pH 敏感性：β-琼脂糖酶 I 在 pH 6.5 时有最适酶活力，在 pH 5.0-8.5 范围内可以保持 ＞ 75% 的酶活力。
盐敏感性：NaCl 或 Na2EDTA 浓度在 50 到 500 mM之间不影响 β-琼脂糖酶 I 活性。
盐敏感性：NaCl 或 Na2EDTA 浓度在 50 到 500 mM之间不影响 β-琼脂糖酶 I 活性。
质保声明
β-琼脂糖酶 I 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情登陆
单位定义
1 单位指 42℃ 条件下，1 小时消化 200 μl 低熔点琼脂糖或 NuSieve 琼脂糖生成可溶性新琼脂-寡糖所需的酶量。
经 β-琼脂糖酶 I处理后乙醇沉淀的琼脂糖量
65℃ 条件下在含 1 mM Na2EDTA 的 10 mM Bis Tris-HCl 中熔化含 200 μl 1% 低熔点琼脂糖凝胶的样品，冷却到 42℃，加入 1 单位或 2 单位的 β-琼脂糖酶 I 反应不同时间。不能被消化的琼脂糖可通过加入终浓度为 250 mM 的 NaOAc 和 75% 的异丙醇，-70℃ 冷却来沉淀，沉淀后的琼脂糖可通过在 0.1 N 的 HCl中煮沸水解。碳水化合物含量以占 200 μl 未消化低熔点琼脂糖凝胶的百分比表示。
浓度
1,000 units/ml。
热失活
95℃ 加热 2 分钟或 65℃ 15 分钟温育可使 50 单位的 β-琼脂糖酶 I 失活。β-琼脂糖酶 I 可以在 45-50℃ 保持几个小时的活性。反应体系中存在琼脂糖可以稳定 β-琼脂糖酶 I。
参考文献
关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。
氨基琼脂糖磁珠|氨基活化琼脂糖磁珠|氨基琼脂糖微球|Magarose-NH2
环氧基活化琼脂糖磁珠|环氧基琼脂糖微球|Magarose-Epoxy的产品性能
琼脂糖珠与磁珠在分离蛋白质及蛋白复合物的对比
wyf 02.01
抗-PEG琼脂糖亲和纯化mPEG-BSA的方法及注意事项
