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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆 & 合成生物学
NEBuilder® 高保真 DNA 组装克隆试剂盒 收藏
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#E5520S
10 次反应
3,009.00
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特性
概述
NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液可以高效、准确的组装 DNA 片段。不管片段的长度和末端匹配性如何,该方法均可以多片段无缝组装。还可以组装单链寡核苷酸或含 15-80 bp 重叠区的不同片段长度的 DNA 片段。主要用于合成生物学和多片段的一步克隆,该产品操作简单、灵活,以预混液形式提供。在同一反应缓冲液中有几种不同的酶活性:
• 外切酶活性会产生单链 3´ 突出端,促使互补的末端重复序列(重叠区)退火
• 聚合酶活性会填补退火片段的缺口
• 连接酶活性能在组装后的 DNA 切刻处进行连接最终形成双链闭合的 DNA 分子,可以用于 PCR、RCA 或其它的分子生物学应用,以及直接转化到大肠杆菌。
NEBuilder 高保真 DNA 组装克隆试剂盒包含高效的 NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液和 NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞,仅 2 小时即可完成组装和转化实验。
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产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于所有测序平台/模块和酶
NEBNext RNA Mg++ 片段化模块 收藏
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#E6150S
200 次反应
579.00
有
有
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概述
The NEBNext® Magnesium RNA Fragmentation Module has been optimized to fragment RNA into small
pieces by incubation with Magnesium ions at 94˚C. Fragment size is controlled by incubation time (Figure 1), and the reaction is ended by the addition of NEBNext Fragmentation Stop Solution.
TALENs或 ZFN等方法进行了基因编辑的区域),经退火、延伸步骤后,形成异源双链 DNA。在扩增子池中经过多轮循环后,基因插入和缺失(Indels)等造成的突变得到富集。第二步,将退火后的 PCR 产物用 EnGen T7 核酸内切酶 I 进行切割。 EnGen T7 核酸内切酶 I 是一种结构特异性酶,可有效识别大于1个碱基的基因错配。当错配出现时,DNA 分子的两条链被切割从而形成较小的片段。分析片段图谱可以对基因编辑实验的效率进行评估。
EnGen 基因编辑突变检测试剂盒包含一组对照模板和引物预混液,可用作 PCR 反应及 T7 核酸内切酶 I 消化实验的对照。对照模板和引物预混液中含有 2 种对照质粒和 1 对对照引物。经 PCR 扩增、变性、退火后,部分会形成含有10个碱基的插入突变,此种异源双链 DNA 正是 T7 核酸内切酶 I 的底物,600 bp 的 DNA 会被切割成 200 bp 和 400 bp 的两个片段;而同源双链 DNA 则不被 T7 核酸内切酶 I 切割。通过琼脂糖凝胶电泳或片段分析设备可以非常方便的分辨出同源(野生型)和异源(突变)片段。