什么是生物素亲和素ELISA系统?

什么是生物素亲和素ELISA系统?

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    生物素亲和素(又称抗生物素)系统(biotin avidin system,BAS)标记抗体的技术是20世纪70年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。由于亲和素与生物素间的亲和力ji强,结合迅速,且极其稳定,生物素标记抗体和酶的标记率高,又不影响蛋白的活性,使BAS标记技术比常规酶联免疫、放射免疫及荧光免疫技术有着更高的灵敏度,为微量抗原、抗体的检测开辟了新的途径。近年来,在BAS检测中多用链霉亲和素“streptavidin,SA”,它是链霉菌培养过程中的分泌物,完整的链霉亲和素和从卵白中提取的亲和素一样,也由4条相同的肽链组成。因链霉亲和素在检测应用中发生的非特异性结合远较亲和素低,因此日渐受重视,已有取代亲和素之势。

BAS ELISA具有的特点:

①对于所有的抗原抗体系统,包括免疫细胞化学、ELISA、免疫印迹法等都适用,应用范围极广;

②BAS在温和条件下可与各类生物大分子如蛋白质、脂多糖等结合,并且这种结合对原生物大分子的生物活性无影响;

③每个亲和素分子可与4个生物素分子结合,所以可以偶合更多连接生物素的酶分子,从而大大提高了灵敏度;

④生物素和亲和素间亲和力强,故二者一旦结合,就极为稳定,不受在ELISA方法中的保温及多次洗涤影响,而且这种结合反应时间比抗原抗体反应所需时间短;

⑤结果专一性强,非特异性显色或染色背景极低;

⑥第一抗体稀释度高,可节约抗体。

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