Elabscience一步法TUNEL流式凋亡检测试剂盒的原理与注意事项

Elabscience一步法TUNEL流式凋亡检测试剂盒是一款灵敏度高且能快速简便地检测细胞凋亡的产品。本试剂盒可通过流式细胞仪来进行悬浮细胞、贴壁细胞的流式凋亡检测。那么你知道Elabscience一步法TUNEL流式凋亡检测试剂盒的原理与注意事项是什么吗？让我们一起来看看吧！

一、检测原理

细胞在发生凋亡时，会激活一些特异性的DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。使得凋亡细胞的DNA被切割成180~200bp片段，在琼脂糖凝胶上通常以180~200bp 的阶梯状迁移。细胞经过固定破膜后，TdT酶（脱氧核糖核酸末端转移酶）将荧光标记的dUTP 连接到细胞断裂DNA 暴露的 3'-OH 末端，通过流式细胞仪检测 dUTP偶联物发出的荧光信号，从而来检测晚期凋亡。

二、保存条件

-20°C 保存，保质期一年。Labeling Solution 需避光保存，Labeling Solution、Fixation Buffer、Permeabilization Buffer需避免反复多次冻融，建议分装保存。

三、注意事项

1. 本产品仅限于专业人员的科学研究使用。

2. 请注意安全事项，遵守实验室试剂操作规范操作。

3. 用于该试剂盒的检测样本zui低细胞数目不低于 5×105个。

4. 实验中需要重悬细胞的步骤，用移液器轻轻吹打细胞 10~20次，吹打时请勿将枪头中的液体wan全吹出，避免造成细胞损伤和产生过多的气泡。

5. 离心去上清的操作要小心谨慎，避免造成细胞损失。

6. Labeling Solution和TdT Enzyme 应避免反复冻融和涡旋操作。

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