原代细胞取材的注意事项有哪些？

取材作为原代细胞培养过程中至关重要的一步，那么原代细胞取材的注意事项有哪些呢？让我们一起来看看吧！

一、皮肤和粘膜

主要取皮片，面积一般2~4平方厘米。

二、内脏和实体瘤

1.无菌环境；

2.熟悉所需组织的类型和部位；

3.要避开破溃、坏死液化部分，以防污染，尽量去除混杂的结缔组织。

三、血液细胞

一般多抽取静脉外周血，或从淋巴组织中(如脾、扁桃体、胸腺、淋巴结等)分离细胞，取材时应注意抗凝。

四、骨髓、羊水、胸/腹水细胞

严格无菌，注意抗凝，还要尽快分离培养，离心后，用无钙、镁PBS洗两次，再用培养液洗一次后即可培养，不宜低温存放。

五、动物组织取材——鼠胚组织

1.用引颈或气管窒息致死法处死孕期合适的动物；

2.将其浸泡在含有75%酒精的烧杯中，5分钟后取出动物；

3.在消毒过的木板上可用无菌的图钉或大头针固定四肢，切开皮肤；

4.用无菌操作法解剖取胚。

六、动物组织取材——幼鼠胚肾(或肺)

幼鼠采用上述方法处死消毒后→腹部朝上固定在木板上，先切开游离毛皮并拉开至两侧→采用无菌法打开胸腔取肺，或从背部打开腹腔取肾。

七、鸡(鸭)鸟类胚胎组织

1.取孵化至适当胚龄(9~12天)的胚蛋，用照蛋灯在暗处灯检，若有丰富血管、胚体有运动的胚蛋，说明胚体发育良好，并用有色笔划出气室和胚体位置；

2.将胚蛋置于蛋架上，先用温水清洗蛋壳，再用75%酒精棉球擦干;

经碘酒、75%酒精消毒后，在无菌条件下采用无菌法用剪刀或镊子打开气室，沿气室边缘去除蛋壳;

3.用眼科镊撕去壳膜，暴露出鸡胚;

4.用弯头镊轻挑起胚头，取出胚胎，放入无菌平皿中，解剖取材。

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