如何选择荧光定量PCR中的对照？

对照的目的是对检测的各个环节进行监控，因此我们按照检测的流程对对照进行梳理。那么我们应该如何选择荧光定量PCR中的对照呢？让我们一起来看看吧！

一、阳性对照和阴性对照

阳性对照和阴性对照是指在相同的处理条件下，比如一份已知的感染样品和一份已知的未感染样品，都进行了提取和扩增最终获得了阳性结果和阴性结果。阴阳性对照强调处理过程与样品一致，并且有明确的预期结果。

二、扩增对照

我们通常说的阳性对照和阴性对照指的是扩增试剂盒中附带的不需要提取的阳性对照和阴性对照，更准确的定义应该是扩增阳性对照和扩增阴性对照。扩增阳性对照含有阳性扩增模板，扩增阴性对照应含有阴性扩增模板（基质核酸）。扩增对照只能监控每次扩增过程中的扩增系统是否正常，不能监控采样、提取和每份样品的操作过程。如果是检测RNA样品的检测试剂盒，其扩增阳性对照使用质粒，便无法监控反转录过程。

三、内标（Internal Control，IC）

内标是指在同一反应管中与靶序列共同扩增的一段非靶序列分子。内标有两种形式，一种是使用天然样品中含有的内参基因作为内标，另一种是人工添加的内标。内标的最大特点是与靶序列共同扩增，而其他的对照都是独立扩增。

四、核酸提取对照

可以使用内参基因，假病毒混合基质，灭活病毒混合基质来监控提取到扩增的流程。

五、反转录对照（RT control）

可以使用提取好的RNA内参基因，RNA假病毒混合基质，灭活RNA病毒混合基质来监控反转录到扩增的流程。

无反转录对照（no-RT control）含有除反转录酶以外的所有成分。

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