Renilla Luciferase Assay Kit(海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒) 货号: R6073S/R6073M/R6073L 规格: 50T/200T/1000T

上海金畔生物科技有限公司代理UELANDY荧光染料全系系列产品

Renilla Luciferase Assay Kit(海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒)

产品货号: R6073S/R6073M/R6073L

产品规格: 50T/200T/1000T

目录价(元):663/1842/5526

推荐仪器:化学发光仪、酶标仪或液闪测定仪

大包装询价


产品概述:

储存条件

-80℃保存,有效期见外包装。B组分建议根据实验需求进行小批量分装。海肾检测工作液建议现配现用,避免反复冻融。


    规格

组分

R6073S50T

R6073M200T

R6073L1000T

A. 5× RenillaLuciferase   Lysis Buffer

5 mL

20 mL

100 mL

B. RenillaLuciferase   Assay Buffer

5 mL

20 mL

100 mL

C. 50× Coelenterazine

100 µL

400 µL

2 × 1 mL

 

产品介绍

真核基因表达调控研究常用的方法是进行报告基因的检测,生物发光法又是报告基因检测最常用的有效手段。萤光素酶能催化底物萤光素的转化,并发射出光子。该产品为海肾萤光素酶报告基因在哺乳动物细胞中的表达提供快速、灵敏、稳定的检测方法。

 

产品特点

1. 快速:细胞裂解在10-15 min内完成。

2. 方便:试剂易于配制,样品检测步骤简单。

 

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 由于温度对酶反应有影响,所以测定时,样品和试剂均需达到室温后再进行测定。

3. 海肾萤光素酶催化的生物发光的最强波长为480 nm,为防止孔间干扰,建议使用白色不透光孔板。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

Renilla Luciferase Assay Kit(海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒) 货号:               R6073S/R6073M/R6073L  规格:               50T/200T/1000T UE-R6073S/R6073M/R6073L    
常见问题解答:

检测的萤光数值很低怎么办?

(1)可能为转染效率低
a.优化转染实验条件,用较易转染的质粒做阳性对照(如转染过表达荧光蛋白质粒);
b.确保转染DNA的质量,可通过酶切或琼脂糖凝胶电泳的方法对DNA质量进行鉴定;
c.选择活性较高,处于指数分裂期的细胞进行转染。
(2)可能为启动子活性低或诱导失败
a.转染后的细胞培养使用特异性诱导启动子的条件;
b.优化细胞的培养条件,提高光素酶的表达量;
c.更换强启动子(如SV40、CMV)。
注:海肾萤光素酶基因作为内对照,其表达应不受时期、部位、环境影响,因此常用组成型表达的TK启动子。
(3)样品裂解效率低
a.细胞培养时间不宜过长,12-36h内最好,长时间培养后,细胞可能会难裂解。
b.加入的裂解液需足量,保证细胞能够充分裂解。
(4)检测过程操作不规范
a.选择合适的检测仪器,能够检测化学发光或者生物发光的仪器都适用于该实验;
b.需加入足量底物,保证底物的饱和,否则会造成检测结果出现很大偏差;
c.室温反应。反应时各个组分(细胞裂解产物,底物工作液等)都需要调整到室温;
d.光素酶的半衰期一般约30min,加完底物后可立即检测,尽量在30min内完成。
(5)底物氧化失效
a.底物避光密封保存,萤火虫光素酶底物-20℃保存;海肾光素酶底物推荐-80℃保存;
b.反应工作液建议现用现配。

进行检测的过程中,萤光信号值太高该如何进行调整?
(1) 减少质粒转染量。
(2)细胞样品裂解后,离心取上清后检测或对裂解产物进行稀释后检测。
注:不建议通过减少底物量来降低荧光值,需要保证底物的饱和来反映光素酶真实的表达水平,否则会造成检测结果出现大的偏差。