你了解PVDF膜的使用技巧吗？

PVDF超滤膜是一种以聚偏氟乙烯（PVDF）为主要原料制成的超滤膜，具有优异的耐化学性、耐高温性、耐候性和机械强度，普遍应用于水处理、食品饮料、生物医药等领域的分离、浓缩和纯化等工艺。那么，你了解PVDF膜的使用技巧吗？一起来学习一下吧！

PVDF膜使用时要用甲醇浸泡？
PVDF本质是一种疏水性的聚合物，在水溶液中不会浸湿。为了在水性缓冲液使用PVDF膜，首先必须将其浸泡在50%醇溶液中。甲醇、乙醇和异丙醇都适合浸泡这种膜。之后必须用水反复冲洗以去除醇类，经预处理的膜现在可以直接放入转印缓冲液中平衡。
PVDF膜浸泡步骤？

湿转：

(1) 将膜在甲醇中浸泡30秒。膜应均匀的从不透明变成半透明。

(2) 小心的将膜放入双蒸水中，浸泡2分钟。

(3) 小心的将膜放入转印缓冲液中，至少平衡5分钟。

半干转：

第一步甲醇浸泡只需15秒，其他步骤同上。

PVDF膜的孔径怎么选？

一旦膜被浸湿，蛋白结合可通过蛋白与膜的接触而实现。由于蛋白与膜的结合贯穿整个膜的厚度，结合能力是由孔的内部表面积来决定的。0.2um PVDF膜内部表面积大约是0.45um PVDF 膜的三倍，使其吸附能力更高。可以看出，20KD以下蛋白选用0.2um PVDF膜, 20KD以上蛋白选用0.45um PVDF膜。
怎样确定PVDF膜是否转成功？

可以采用染色法来确定转膜是否成功，PVDF膜染料分2类，可逆染料在评估印迹之后可被从膜上洗掉。不干扰后续的免疫检测或印迹上蛋白的其它分析。常用的可逆蛋白染料是丽春红。可逆染料主要缺点在于它们的灵敏度不及不可逆染料。由于印迹上高丰度蛋白的染色模式通常也能很好地提示低丰度蛋白在多大程度上转移，可逆染料灵敏度不高的缺点在大部分情况下并不影响使用。

不可逆染料通常表现出最佳的灵敏度，但会干扰蛋白的进一步分析。不可逆染料有氨基黑和考马斯亮蓝等。

以上就是有关于PVDF膜的使用技巧的知识点，如果你还有更多补充，请咨询上海金畔客服！