异源双功能的光反应氨基酸交联剂
|
共价连接相互作用蛋白
|
大多数蛋白–蛋白结合相互作用是瞬时的，只作为细胞内信号级联反应或其他代谢功能的一部分而短暂发生。通过交联方法可以稳定或永久连接相互作用复合物中的成分，从而有助于鉴别这些瞬时接触。一旦相互作用的成分被共价偶联，可以使用其他步骤（例如细胞裂解，亲和纯化和电泳）来制备分析样品，同时可维持较初的相互作用复合物。
|
|
同源双功能交联
|
通过交联用于蛋白相互作用分析较简单的方法是通过向完整的培养细胞或细胞裂解液中加入可以与氨基反应的同源双功能交联剂（homobifunctional crosslinker）来实现的。交联剂可以与其遇见的任何蛋白的伯胺（例如赖氨酸残基的侧链）反应，不论是在细胞表面或是细胞内（如果交联剂是膜通透性的）。因此在分子种群中以高于特定频率阈值相互作用的特异复合体中的所有蛋白将被永久交联。如果有可以检测某种特异蛋白的特异抗体，则该相互作用复合物（自身二聚体化或蛋白–蛋白相互作用）在Western blotting分析时被检测到条带迁移。
甲醛在这类实验中可作为较简单的同源双功能交联剂或固定剂使用。交联剂DSS （膜通透性）和BS3（膜不通透性）是常用于同源双功能交联的具有氨基反应活性的NHS–ester试剂。在间隔臂含有可剪切二硫键的交联剂（例如 DSP和 DTSSP）可以与相互作用蛋白偶联，因此可以通过免疫沉淀或相似方法被共同纯化，之后通过还原性SDS-PAGE 被分离为构成型亚基。通过精心设置的对照及适当的检测探针，同源双功能交联可作为蛋白相互作用初步研究的极好方法。
|
|
用于质谱分析的同源双功能交联
|
当使用质谱（MS）进行分析时，相互作用蛋白之间被交联的片段，由于连接交联剂分子而造成分子量的改变，从而可以被辨认出来。我们提供配对的含有重氢和不含重氢的同源双功能交联剂，从而可以很容易在质谱分析中鉴定交联片段。
|
异源双功能，两步，光反应交联：
异源双功能交联剂（heterobifunctional crosslinker）含有不同的反应基团。反应基团的特定组合需要进行两步交联。对于蛋白相互作用研究，交联反应基团较有用的组合是一端的氨基特异性反应基团（自发反应）和另外一端的非特异性的光反应基团（光激活）。这种安排使得纯化的诱饵蛋白通过与伯胺反应而被标记上交联剂。被标记的诱饵蛋白之后加入到含有假定相互作用蛋白的细胞或样品中。一旦相互作用复合物形成，将样品用紫外光照射从而激活光反应基团与邻近的功能基团随机地交联。在这里，交联剂和诱饵蛋白同时加入，因此可以将脱靶交联降至较低。
光反应氨基酸：
光反应活性氨基酸为两步光反应交联方法提供了新的选择。将表达诱饵蛋白（或诱饵和猎物蛋白）的细胞培养于含有L-亮氨酸和L-甲硫氨酸的光反应类似物的培养基中，相互作用复合物中蛋白被合成含有双吖丙啶光反应基团，从而用于随后的交联反应。
标记转移试剂：
标记转移是指用标记的交联剂交联相互作用分子（例如诱饵和猎物蛋白），之后切断诱饵和猎物蛋白之间的连接，标记分子保留连接于猎物分子上。这种方法非常有用，因为其可鉴别与感兴趣的蛋白发生弱相互作用或瞬时相互作用的蛋白。较早的标记转移试剂为APDP 等，含有一个光反应活性的羟苯基叠氮基团，可使用碘–125（125I）进行标记。
新一代的多功能标记转移试剂，在可剪切的间隔臂的猎物靶向且具有光反应活性的一端包含生物素基团。生物素标记可以用于纯化捕获的猎物蛋白或诱饵–猎物复合物，并且可通过Western blotting 进行检测。Sulfo–SBED和Mts–Atf–Biotin 试剂是这种类型交联剂的代表。
产品供应：
主要产品分类：
1、Mass Spectrometry Sthaidards – Mass Spec Sthaidards （质朴分析相关试剂）
2、Mobile phase solvents （色谱相关试剂）
3、protein crosslinkers （蛋白交联相关试剂）
4、Deuterated crosslinkers for mass specctrometry （交联相关试剂）
5、Protein modification regents （蛋白修饰相关试剂）
6、Immobilization resins （吸附树脂相关产品）
7、chemical reagents （化学试剂相关产品）
8、purified Enzymes （纯化酶相关试剂）
产品列表：
Mass Spectrometry Sthaidards – Mass Spec Sthaidards （质朴分析相关试剂）
Leu-Enkephalin
Gonadoliberin
Angiotensin I
Neurotensin
Peptide Calibration Sthaidard Set
protein crosslinkers （蛋白交联相关试剂）
Heterobifunctional Crosslinkers异型双功能交联剂：
SMCC Crosslinker CAS Number: 64987-85-5
Sulfo-SMCC Crosslinker CAS Number: 92921-24-9
Sulfo-SANPAH Crosslinker CAS Number: 102568-43-4
SMPH Crosslinker
PDPH Crosslinker
MBS Crosslinker CAS Number: 58626-38-3
Sulfo-MBS Crosslinker
SPDP Crosslinker CAS Number: 68181-17-9
LC-SPDP Crosslinker
Sulfo-LC-SPDP Crosslinker
SIA Crosslinker CAS Number: 39028-27-8
SBA Crosslinker CAS Number: 42014-51-7
SMPB Crosslinker CAS Number: 79886-55-8
BMPS Crosslinker CAS Number: 55750-62-4
EMCS Crosslinker CAS Number: 55750-63-5
GMBS Crosslinker CAS Number: 80307-12-6
ANB-NOS Crosslinker CAS Number: 60117-35-3
Homobifunctional Crosslinkers同型双功能交联剂：
BS3 Crosslinker CAS Number: 82436-77-9
DSS Crosslinker CAS Number: 68528-80-3
BS2G Crosslinker
DSG Crosslinker CAS Number: 79642-50-5
DSP Crosslinker CAS Number: 57757-57-0
DTSSP Crosslinker CAS Number: 81069-02-5
Sulfo-EGS Crosslinker CAS Number: 167410-92-6
EGS Crosslinker CAS Number: 70539-42-3
DST Crosslinker CAS Number: 62069-75-4
Zero-Length Crosslinkers – EDC-HCl, Sulfo-NHS & NHS：
EDC-HCl CAS Number: 25952-53-8
Sulfo-NHS CAS Number: 106627-54-7
Deuterated Crosslinker BS3-d4
Deuterated Crosslinker BS2G-d4
Deuterated Crosslinker DSS-d4
Protein modification regents （蛋白修饰相关试剂）
Protein Modification Reagents 蛋白质修饰剂：
SATA Protein Modifier
N-Succinimidyl-S-Acetyl-Thioacetate
CAS Number: 76931-93-6
Sulfo-NHS-Acetate
CAS Number: 152305-87-8
Traut's Reagent
CAS Number: 4781-83-3
HPG
CAS Number: 24645-80-5
Iodoacetic Acid
CAS Number: 64-69-7
BMPA Modifier
CAS Number: 7423-55-4
生物素交联试剂
Biotinylation Reagents生物素化试剂
Sulfo-NHS-Biotin CAS Number: 119616-38-5
NHS-Biotin CAS Number: 35013-72-0
Sulfo-NHS-LC-Biotin CAS Number: 127062-22-0
NHS-LC-Biotin CAS Number: 72040-63-2
Sulfo-NHS-SS-Biotin CAS Number: 325143-98-4
NHS-SS-Biotin CAS Number: 142439-92-7
Biotin Hydrazide CAS Number: 66640-86-6
Biotin-HPDP CAS Number: 129179-83-5
Iodoacetyl-LC-Biotin CAS Number: 93285-75-7
Immobilization Resins固定化树脂
Immobilization Resins固定化树脂
Amino-Reactive Resin
Sulfhydryl-Reactive Resin
Carbohydrate-Reactive Resin
Carboxyl-Reactive Resin
Immobilized Pepsin
Immobilized Chymotrypsin
质谱分析试剂列表：
Leu-Enkephalin
Gonadoliberin
Angiotensin I
Neurotensin
Peptide Calibration Sthaidard Set
上述产品金畔生物均可供应，仅用于科研实验！
wyf 03.26
