fitc-PHA-E;荧光素标记菜豆红细胞凝集素(PHA-E),Fluorescein labeled Phaseolus Vulgaris Erythroagglutinin (PHA-E)

上海金畔生物专业供应一系列的凝集素;同时提供各种荧光标记修饰偶联的凝集素。提供罗丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、琼脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red标记各种凝集素。

菜豆凝集素(Phaseolus vulgaris凝集素)是一个凝集素家族的名称,每个家族都由四个亚基组成。有两种不同类型的亚单位。其中一种主要参与红细胞凝集,并被指定为“E”亚单位(用于红细胞凝集素)。另一种类型参与淋巴细胞凝集和有丝分裂活性,被称为“L”亚单位(白血球凝集素)。这些亚单位结合起来产生五个隔离素。

PHA-E具有较强的血凝活性,但是一种弱的有丝分裂原。PHA-L具有四个L型亚单位,不凝集红细胞,但是一种有效的有丝分裂原。其他三个分离蛋白,分别命名为E3L1、E2L2和E1L3,具有与各自的E或L亚单位数量成比例的红凝集和有丝分裂活性。我们将五种隔离素的混合物称为PHA(E+L)。

FITC标记凝集素的组织化学染色程序

1.组织切片经脱蜡处理,若是Bouin液固定的组织,用70%乙醇洗3次除去组织切片内的黄色后,再用蒸馏水漂洗;

2.PBS漂洗(含1%牛血清白蛋白)2次,每次5分钟;

3.加入FITC-凝集素(PBS适当*释),置湿盒内孵育,室温1小时;

4.PBS漂洗3次,每次5分钟;

5.水溶性封片剂封片,荧光显微镜观察。

6.结果 FITC标记的凝集素能直接与组织细胞内的糖基结合,从而显示糖基的位置,可用于检测组织细胞中的糖成分,阳性部位呈黄绿色荧光。

注意事项

(1)固定液:以Bouin固定液为佳,也可用70%乙醇固定;

(2)与其他组织化学方法一样,染色过程中,应始终保持一定湿度,使切片保持湿润状态;

(3)需经预实验确定FITC-凝集素的*佳工作浓度;

(4)凝集素的活性部位需重金属离子维持,故可用TBS作为缓冲液,加微量的金属(CaCl2、MgCl2、MnCl2各1.0mmol/L),可增强凝集素的结合能力。

fitc-PHA-E;荧光素标记菜豆红细胞凝集素(PHA-E),Fluorescein labeled Phaseolus Vulgaris Erythroagglutinin (PHA-E)

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