FITC-DBA;荧光素标记的双花扁豆凝集素(DBA),Fluorescein labeled Dolichos Biflorus Agglutinin

上海金畔生物专业供应一系列的凝集素;同时提供各种荧光标记修饰偶联的凝集素。提供罗丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、琼脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red标记各种凝集素。

双花扁豆凝集素是一种分子量约为111kda的糖蛋白,由4个大小大致相等的亚基组成,对α-linked N-acetylgalactosamine具有糖专一性。它已被用于通过血凝抑制技术和血型测定来确定A型血个体的分泌状态。这种凝集素也被用作肾集合管发育的一般标志物。DBA是小鼠胚胎干细胞内的重要标志物,用于标记小鼠的胚胎干细胞以及小鼠的嗅觉受体神经元。

FITC标记凝集素的组织化学染色程序

1.组织切片经脱蜡处理,若是Bouin液固定的组织,用70%乙醇洗3次除去组织切片内的黄色后,再用蒸馏水漂洗;

2.PBS漂洗(含1%牛血清白蛋白)2次,每次5分钟;

3.加入FITC-凝集素(PBS适当*释),置湿盒内孵育,室温1小时;

4.PBS漂洗3次,每次5分钟;

5.水溶性封片剂封片,荧光显微镜观察。

6.结果 FITC标记的凝集素能直接与组织细胞内的糖基结合,从而显示糖基的位置,可用于检测组织细胞中的糖成分,阳性部位呈黄绿色荧光。

注意事项

(1)固定液:以Bouin固定液为佳,也可用70%乙醇固定;

(2)与其他组织化学方法一样,染色过程中,应始终保持一定湿度,使切片保持湿润状态;

(3)需经预实验确定FITC-凝集素的*佳工作浓度;

(4)凝集素的活性部位需重金属离子维持,故可用TBS作为缓冲液,加微量的金属(CaCl2、MgCl2、MnCl2各1.0mmol/L),可增强凝集素的结合能力。

FITC-DBA;荧光素标记的双花扁豆凝集素(DBA),Fluorescein labeled Dolichos Biflorus Agglutinin

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