链霉亲和素修饰CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测平台研究、评价及应用

量子点是一种新型的半导体纳米晶体材料。作为一种荧光标记探针,它展现出传统荧光染料所没有的许多光化学优点。首先,量子点具有宽的吸收光谱,窄而对称的发射光谱,可以实现单波长同时激发不同量子点;其次量子点光化学稳定性强,经长时间光源照射荧光特性不受损失,抗光漂白性能强。近年来,量子点在基因分析、免疫分析、微生物检测等方面得到应用。

本文的主要工作是将链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点分别引入到基因芯片技术与聚合酶链反应技术之中,建立了链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测平台,同时探讨了链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点对于聚合酶链反应技术的影响作用。

本文的研究内容主要包括以下几个环节:

一.链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测系统的优化研究

本文研究以针对细菌16SrRNA基因为检测靶基因设计的寡核苷酸探针做为本次研究的检测探针。探针以一定的方式固定在醛基化的载玻片上,制成基因芯片。利用针对16SrRNA基因的通用引物对靶基因进行扩增,同时将扩增产物标记上生物素,标记了生物素的扩增产物与寡核苷酸基因芯片在适当的条件下杂交,杂交后的基因芯片经过适当处理后,应用链酶亲和素连接的CdSe/ZnS量子点进行标记,标记后的基因芯片经过处理之后,应用基因芯片扫描仪检测杂交结果,在本文中,我们对链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测系统的杂交体系进行了优化研究,

二.链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测系统的效能评价

基因芯片检测系统的基本参数包括了特异性、敏感性、重复性、等指标,这些参数反应了基因芯片检测系统的基本性能,在本部分实验中我们对建立的量子点标记的基因芯片检测系统针对以上参数进行了评估,CdSe/ZnS量子点融入到现有的基因芯片检测技术之中,建立了链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片技术方法,为了评估该方法的检测效能,我们对该方法的特异性指标、敏感性指标、以及重复性指标进行了考查。

链霉亲和素修饰CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测平台研究、评价及应用

三.链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测系统初步应用

为了测试实验所建立的,链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记基因芯片在实际样品中的潜在应用能力,我们将建立的链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片应用于检测从食品中分离的菌株。

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