荧光素偶联单、多克隆抗体标记样品细胞前封闭样品细胞的原因

荧光素偶联单、多克隆抗体标记样品细胞前封闭样品细胞的原因

荧光素偶联抗体(fuorochrome-coupledhaitibody),由荧光素和抗体两部分组成,抗体可以是单克隆抗体,也可以是多克隆抗体。

标记样品细胞的荧光素偶联抗体多为单克隆抗体,少数也可能是多克隆抗体。但无论是单克隆抗体还是多克隆抗体,其基本结构都由两部分组成,即包含有特异性结合抗原位点的Fab段和相对保守的Fc段,如图A所示。抗体的特异性表现在Fab段,标记时利用Fab段的抗原结合位点与细胞上抗原分子特异性结合,如图B所示,从而标记并且相对量化细胞表达该抗原分子的情况。但是,有些细胞表面表达FcR( Fc receptor,Fc受体),如巨噬细胞、DC、B淋巴细胞等,FcR可以与荧光素偶联抗体的Fc段结合,如图C所示。Fc与FcR的结合是相对非特异性的,与抗体种属和类别有关,一般情况下,同种属、同类抗体(如所有的鼠IgG抗体)的Fc段是相同的,所以该种属细胞上的所有该类Fc段的FcR(如与鼠1gG对应的FcγR)都可以与Fc段发生非特异性的结合。

荧光素偶联单、多克隆抗体标记样品细胞前封闭样品细胞的原因

应用荧光素偶联抗体标记样品细胞,目标是检测Fab段与抗原分子的特异性结合,Fc段与FcR的非特异性结合是混杂信号,会导致流式分析结果错误,所以需要消除这种非特异性结合的影响。消除的方法就是在用荧光素偶联抗体标记样品细胞前先“封闭”样品。考虑到目前常用的荧光素偶联抗体基本都是IgG抗体,所以可以用无关IgG抗体先与样品细胞孵育一段时间,使样品细胞上的所有FcR都与无关IgG抗体的Fc段非特异结合,然后再标记荧光素偶联抗体,这时样品细胞上的FcR都已饱和,无法与荧光素偶联抗体的Fc段结合,如图D所示,也就“封闭”了与荧光素偶联抗体的非特异性结合,保证所有的结合都是抗原与荧光素偶联抗体的特异性结合。

上海金畔生物可定制荧光素标记/偶联各种单、多克隆抗体,现将产品目录展示如下:

FITC标记抗Brdu单/多克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗马干扰素-γ(IFN-γ)单克隆抗体

FITC(异硫氰酸荧光素)标记抗狂犬病病毒ERA株单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗P-选择素单抗SZ-51-IgG

异硫氰酸荧光素标记直标单克隆抗体2F9-FITC

异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗RABV核蛋白单克隆抗体(MAb)

异硫氰酸荧光素(FITC)标记纯化之抗CD3单克隆抗体

FITC直接标记抗CD62P(GMP-140)单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记小鼠IgG1

异硫氰酸荧光素标记的抗活化GPⅡb/Ⅲa复合物的单克隆抗体(PAC-1 FITC)

FITC标记单克隆抗体检测icIL-1ra

异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的抗人IL 1ra单克隆抗体

荧光素标记抗HLA-B27单克隆抗体

异硫氰酸荧光素标记小鼠抗人CD14单克隆抗体(CD14-FITC)

异硫氰酸荧光素(FITC)标记鼠抗人单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记单克隆抗体(McAb1-FITC)

异硫氰酸荧光素(FITC)标记黄曲霉毒素B1单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记AFB1抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记淫羊藿苷单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记CEA单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记CD16,CD3,HLA-DR单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记CA50单克隆抗体

硫氰酸荧光素(FITC)标记莱克多巴胺单克隆抗体(RAC McAb)

硫氰酸荧光素(FITC)标记两株抗-LH单克隆抗体

异硫氰酸(FITC)荧光素标记抗RABVN蛋白单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记TSH单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗ZEA单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗GST单克隆抗体

异硫氰酸荧光素标记鼠抗人新单抗288a-FITC

异硫氰酸荧光素(FITC)标记鼠抗Ⅷ因子抗原单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记E2单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记AFP单克隆抗体

FITC(异硫氰酸荧光素)标记兔抗小鼠IgM抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗CD4、抗CD161单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记鼠抗人OX40单克隆抗体

异硫氰酸荧光素 (FITC)标记羊抗人抗体 (GAHAb FITC)

异硫氰酸荧光素(FITC)标记羊抗人cTnT多克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记驴抗羊多克隆抗体

异硫氰酸荧光素标记羊抗鼠抗体(FITC-GAM)

异硫氰酸荧光素(FITC)标记直标单克隆抗体2F9-FITC

异硫氰酸荧光素标记鼠抗人T细胞抗原ZCH-2B8a单克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记驴抗羊的多克隆抗体

异硫氰酸荧光素(FITC)标记兔抗人E2多克隆抗体